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.2018年10月；22(10):4664-4675.
doi:10.1111/jcmm.13688。 Epub 2018年8月17日。

转录因子ATF3介导乳腺癌的放射抗性

赵文燕（Wenyan Zhao） 1, 孙铭 2, 李树强 1, 陈兆福 2, 耿东华 1
附属公司

转录因子ATF3介导乳腺癌的放射抗性

赵文燕（Wenyan Zhao）等。 细胞与分子医学杂志. 2018年10月.

摘要

本研究旨在研究激活转录因子3（ATF3）对乳腺癌放射抗性的影响。用qRT-PCR和免疫组织化学方法检测ATF3的表达。肿瘤细胞系体外培养，放射治疗前后用qRT-PCR和Western blot检测ATF3的表达。流式细胞术分析细胞周期和细胞凋亡。Western blot检测下游通路中相应蛋白表达的变化。采用异种肿瘤移植评估ATF3在体内的作用。在乳腺癌组织和细胞中观察到ATF3更强。放射治疗后，乳腺癌细胞中ATF3的表达上调。沉默ATF3可促进G2/M期阻滞，促进细胞凋亡，降低克隆形成存活率。ATF3的过度表达可抑制G2/M期阻滞，抑制细胞凋亡，提高克隆形成存活率。过度表达ATF3可以通过上调PI3K/Akt信号通路中Akt的磷酸化水平来增加放射抗性。通过抑制PI3K/Akt信号通路可以减轻乳腺癌细胞的放射抗性。ATF3在体内也能促进抗辐射性。ATF3基因能够提高乳腺癌细胞的放射抗性。

关键词：ATF3；MCF7细胞；乳腺癌；抗辐射性。

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数字

图1
图1
自动变速箱油三在多种乳腺癌细胞系中高表达。A、 火山图，通过微阵列分析差异表达基因；B、 热图显示自动变速箱油接受5Gy放射治疗后，病情得到了改善
图2
图2
自动变速箱油三在乳腺癌组织和细胞系中均高表达。A、，自动变速箱油三 信使核糖核酸乳腺癌组织中表达上调；B、 的相对蛋白表达自动变速箱油乳腺癌组织中3例表达上调；C、 信使核糖核酸的表达水平自动变速箱油三在不同细胞系中增加；D、 的相对蛋白表达自动变速箱油在多个细胞系中有3个上升*P（P）< .05, **P（P）<.01，与正常或最大持续流量10安
图3
图3
自动变速箱油三电离辐射后产量增加。A、 相对信使核糖核酸的表达式自动变速箱油三放射治疗后，不同细胞系中均有上升趋势。B、 相对蛋白质表达自动变速箱油三Western blot检测放射治疗前后不同细胞系的表达*P（P）<0.05，与0Gy组相比
图4
图4
照射后乳腺细胞凋亡率显著升高。A、 放射治疗后细胞凋亡率明显改善，明显高于阴性对照组；B、 放射治疗后细胞凋亡率显著增加，明显低于阴性对照组；C、 凋亡相关蛋白裂解caspase3在年放疗后上调最大持续流量7个细胞转染si自动变速箱油3；D、 放疗后caspase3活性明显提高，明显高于阴性对照组最大持续流量7个细胞；E、 放射治疗后，细胞凋亡相关蛋白切割的胱天蛋白酶3也上调SUM（总和）159个细胞转染LZRS公司‐IRES公司‐泽奥‐自动变速箱油三; F、 放射治疗后caspase3活性显著提高，明显低于阴性对照组。硅数控：用相同碱基数的独立核酸序列转染的细胞。硅自动变速箱油三：用干扰核苷酸序列转染的细胞。数控：用空质粒转染的细胞LZRS公司‐IRES公司‐zeo。自动变速箱油三：转染质粒的细胞LZRS公司‐IRES公司‐泽奥‐自动变速箱油3. *P（P）<0.05，与数控或si数控组
图5
图5
的表达式自动变速箱油三影响辐射诱导的细胞周期的变化。A、 放射治疗后，细胞内G2/M期细胞数量显著增加，G2/M相细胞数量增加自动变速箱油3组明显大于阴性对照组。S期细胞呈相反趋势；B、 放射线治疗后，G2/M期细胞数显著增加LZRS公司‐IRES公司‐泽奥‐自动变速箱油三与阴性对照组相比，实验组大幅度下降。S期细胞呈相反趋势。硅数控：用相同碱基数的独立核酸序列转染的细胞。硅自动变速箱油三：用干扰核苷酸序列转染的细胞。数控：用空质粒转染的细胞LZRS公司‐IRES公司‐zeo。自动变速箱油三：转染质粒的细胞LZRS公司‐IRES公司‐泽奥‐自动变速箱油3. *P（P）<.05，相比之下数控或si数控组
图6
图6
放射治疗诱导自动变速箱油三导致激活圆周率3K/Akt信号通路。A、 沉默后Akt磷酸化过程被抑制自动变速箱油三在中最大持续流量7细胞系；B、 Akt磷酸化过程在自动变速箱油三过度表达于SUM（总和）159细胞株；C、 Akt磷酸化过程在自动变速箱油三过度表达SUM（总和）抑制剂处理的159细胞系年294002; D、 自动变速箱油三可以加快乳腺癌细胞的存活率，而抑制剂利204002可抑制乳腺癌细胞的存活率。硅数控：用相同碱基数的独立核酸序列转染的细胞。硅自动变速箱油三：用干扰核苷酸序列转染的细胞。数控：用空质粒转染的细胞LZRS公司‐IRES公司‐zeo。自动变速箱油三：用质粒转染的细胞LZRS公司‐IRES公司‐泽奥‐自动变速箱油三。自动变速箱油三+年294002：质粒转染细胞LZRS公司‐IRES公司‐泽奥‐自动变速箱油3和圆周率3K抑制剂年294002. *P（P）<0.05，与数控或si数控组
图7
图7
自动变速箱油3促进了体内乳腺癌的放射抗性。A&E，肿瘤照片；B&F，肿瘤体积曲线；C&G，30天后肿瘤的重量；D&H，相对表达式自动变速箱油三在肿瘤中*P（P）<0.05，与数控或数控+2 Gy组。# P（P）<.05，与si相比自动变速箱油3或自动变速箱油3组
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参考文献

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