Role of microRNA 146a on the healing of cornea alkali burn treated with mesenchymal stem cells

doi:10.3892/mmr.2018.9328

.2018年9月；18(3):3203-3210.

doi:10.3892/mmr.2018.9328。 Epub 2018年7月27日。

microRNA 146a在间充质干细胞治疗角膜碱烧伤愈合中的作用

徐罗¹, 李建民², 尹丽慧^三, 潘健⁴, 杨章⁴, 江紫培⁴

附属公司

¹温州医科大学第一附属医院创伤与烧伤科，浙江温州，325000，中国。
²温州医科大学第一附属医院病理科，浙江温州，325000。
^三温州医科大学第一附属医院内科实验室，浙江温州，325000，中国。
⁴温州医科大学第一附属医院眼科，浙江温州325000。

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microRNA 146a在间充质干细胞治疗角膜碱烧伤愈合中的作用

徐罗等。分子医学代表. 2018年9月.

.2018年9月；18(3):3203-3210.

doi:10.3892/mmr.2018.9328。 Epub 2018年7月27日。

作者

徐罗¹, 李建民², 尹丽慧^三, 潘健（Jian Pan）⁴, 杨章⁴, 江紫培⁴

附属公司

¹温州医科大学第一附属医院创伤与烧伤科，浙江温州，325000，中国。
²温州医科大学第一附属医院病理科，浙江温州，325000，中国。
^三温州医科大学第一附属医院内科实验室，浙江温州，325000，中国。
⁴温州医科大学第一附属医院眼科，浙江温州325000。

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摘要

本研究旨在探讨microRNA 146a（miR146a）对骨髓间充质干细胞（MSCs）促进角膜碱烧伤修复的作用。根据随机数表，共24只Sprague‑Dawley雌性大鼠被分为正常组（对照组）、正常MSC治疗组（正常MSCs）、miR146a敲除MSC处理组（miR146a-low MSCs）和miR146a-high expression MSCs处理组（miR146a-high MSCs）。定量聚合酶链反应用于评估miR146a的表达水平。MTT法检测骨髓间充质干细胞（MSCs）的细胞活力，流式细胞仪检测细胞凋亡。western blotting分析p65核因子（NF）‑κB、增殖细胞核抗原（PCNA）和Fas蛋白的表达水平。通过ELISA检测MSCs的血管内皮生长因子（VEGF）、CD45、干扰素（IFN-γ）和白细胞介素（IL）-10的分泌水平。miR146a‑high MSCs可提高MSCs的细胞活力，并抑制碱烧伤后MSCs的凋亡。miR146a‑high MSCs降低p65NF‑κB和PCNA的表达水平，增强Fas的表达水平。此外，miR146a–high MSCs改善了碱烧伤后大鼠的角膜不透明度并增强了对新生血管的抑制。miR146a‑high MSCs抑制VEGF、CD45、IFN‑γ的表达，同时增强IL‑10的表达。因此，miR146a促进MSCs治疗大鼠角膜碱烧伤的修复。

PubMed免责声明

数字

**图1。**
各组miR146a表达水平对MSCs细胞活力的影响***与对照组相比，P<0.001；^#与正常MSCs相比P<0.05；^##与正常MSC相比，P<0.01。miR146a，microRNA 146a；MSC，间充质干细胞。

**图2。**
各组miR146a的表达水平及其对细胞凋亡的影响。碱烧伤后正常MSCs（B）、miR146a-低MSCs（C）、miR146a-高MSCs（D）的凋亡率，未经任何处理的MSCs作为对照（A）。右上加右下为总凋亡率。miR146a，microRNA 146a；间充质干细胞；PI，碘化丙啶。

**图3。**
各组miR146a表达水平及对MSCs p65 NF-κB、PCNA和Fas表达水平的影响。（A） Western blotting检测骨髓间充质干细胞p65 NF-κB、PCNA和Fas的表达水平。GAPDH担任内部控制。（B） MSCs中p65 NF-κB、PCNA和Fas蛋白表达的定量*与对照组相比，P<0.05、**P<0.01和***P<0.001；^#与正常MSC相比，P<0.05。miR146a，microRNA 146a；间充质干细胞；核因子-κB；增殖细胞核抗原。

**图4。**
各组大鼠房水中VEGF和角膜组织样品中炎症因子水平的变化。MSCs中（A）VEGF、（B）CD45、（C）IL-10和（D）IFN-γ分泌的定量*与对照组相比，P<0.05和**P<0.01；^#P<0.05和^##与正常MSC相比P<0.01。血管内皮生长因子；干扰素-γ；白细胞介素；MSC，间充质干细胞。

**图5。**
各组角膜碱烧伤治疗后苏木精和伊红染色。治疗4周后，对（A）对照组、（B）正常MSCs组、（C）miR146a-低MSCs组和（D）miR1460a-高MSCs组大鼠角膜进行H&E染色。miRNA146a，microRNA 146a。

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