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.2018年9月;18(3):2531-2540.
doi:10.3892/mmr.2018.9233。 Epub 2018年6月29日。

cullin 4A过表达在肝癌中作用的研究

附属公司

cullin 4A过表达在肝癌中作用的研究

陈刚(音译)等。 摩尔医学代表. 2018年9月.

摘要

Cullin 4A(CUL4A)是基于Cullin‑RING‑的E3泛素蛋白连接酶复合物的主要成分,调节靶蛋白的泛素化。CUL4A的过度表达与各种癌症的发展和进展有关。然而,对CUL4A在人类肝癌中的作用的详细了解尚未由以前的研究确定。在本研究中,研究了人类肝癌与CUL4A表达之间的关系。采用逆转录定量聚合酶链反应、western blotting和免疫组织化学染色检测患者肝癌组织和癌旁组织中CUL4A的表达。分别用过表达载体和小干扰RNA转染诱导人肝癌细胞株中CUL4A的过表达和敲除,并用细胞计数试剂盒-8分析其对细胞增殖的影响,以探讨CUL4A在人肝癌中的作用。转染后还分析了细胞迁移、侵袭、凋亡和细胞周期。本研究结果显示,与3例患者的癌旁组织相比,肝癌组织中CUL4A的mRNA和蛋白表达增加。此外,结果表明,下调CUL4A表达可抑制HEPG2和MHCC97‑H细胞的细胞增殖、迁移和侵袭,并增加细胞凋亡的百分比,而CUL4A过度表达则产生相反的效果。因此,本研究结果表明,CUL4A可能在人类肝癌的发展和进展中发挥重要作用,并突出了CUL4A作为新靶点在人类肝癌和潜在其他癌症类型的诊断和治疗中的潜力。

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图1。
图1。
CUL4A在人类肝癌组织和癌旁组织中的表达。通过(A)逆转录定量聚合酶链反应(B)western blotting和(C)免疫组织化学染色检测CUL4A在人肝癌组织和癌旁组织中的表达。比例尺,50µm。在三个独立的实验中也得到了类似的结果。结果表示为平均值的平均值±标准误差*与癌旁组织组相比,P<0.05。CUL4A、cullin 4A。
图2。
图2。
人类肝癌细胞株中CUL4A过度表达和CUL4A敲除的评估。通过(A)逆转录定量聚合酶链反应和(B)western blotting检测HEPG2和MHCC97-H肝癌细胞株中对照组、过表达组和siRNA组CUL4A的表达。在三个独立的实验中也得到了类似的结果。结果表示为平均值的平均值±标准误差*与对照组相比P<0.05。CUL4A、cullin 4A;小干扰RNA。
图3。
图3。
CUL4A对细胞增殖能力的影响。(A) 使用细胞计数试剂盒-8分析评估CUL4A过度表达和CUL4A敲除对HEPG2和MHCC97-H肝癌细胞增殖的影响。(B) 采用流式细胞术对对照组、CUL4A过表达组、CUL 4A-siRNA HEPG2和MHCC97-H细胞进行碘化丙啶染色,分析细胞周期分布。(C) 各期HEPG2或MHCC97-H细胞的百分比。在三个独立的实验中也得到了类似的结果。结果表示为平均值的平均值±标准误差*与对照组相比,P<0.05。CUL4A、cullin 4A;小干扰RNA。
图4。
图4。
使用Annexin V-FITC/PI染色和流式细胞术分析HEPG2和MHCC97-H肝癌细胞的细胞凋亡。(A) 流式细胞术检测细胞凋亡。右下象限显示早期凋亡细胞(Annexin V-FITC阳性和PI阴性),右上象限显示晚期凋亡细胞(Ennexin V-FITC和PI阳性)(B)计算的早期和晚期凋亡细胞的凋亡率(%)。在三个独立的实验中也得到了类似的结果。结果表示为平均值的平均值±标准误差。异硫氰酸荧光素;PI,碘化丙啶;小干扰RNA。
图5。
图5。
细胞迁移和侵袭试验。在HEPG2和MHCC97-H肝癌细胞中,CUL4A过度表达和CUL4A敲除对(A)细胞迁移和(B)侵袭能力的影响。(C) HEPG2肝癌细胞上皮-间质转化过程中关键蛋白表达的Western blot分析。在光学显微镜下进行的三个独立实验(放大倍率,×100)也获得了类似的结果。结果表示为平均值的平均值±标准误差*与对照组相比,P<0.05。CUL4A、cullin 4A;小干扰RNA;Cldn3,克劳丁3;Ocln,闭塞素;上皮细胞粘附分子Epcam。

类似文章

引用人

  • Cullin4A的过度表达与食管鳞癌的不良预后和肿瘤进展相关。
    Nakade H、Migita K、Matsumoto S、Wakatsuki K、Kunishige T、Miyao S、Sho M。 Nakade H等人。 国际临床肿瘤学杂志。2020年3月;25(3):446-455. doi:10.1007/s10147-019-01547-2。Epub 2019 9月18日。 国际临床肿瘤学杂志。2020 PMID:31535245
  • Cul4A通过调节ANXA10调节肺癌的侵袭和转移。
    Hung MS、Chen YC、Lin P、Li YC、Hsu CC、Lung JH、You L、Xu Z、Mao JH、Jablons DM、Yang CT。 Hung MS等人。 癌症(巴塞尔)。2019年5月2日;11(5):618. doi:10.3390/cancers11050618。 癌症(巴塞尔)。2019 PMID:31052599 免费PMC文章。

工具书类

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