Fibulin-3 knockdown inhibits cervical cancer cell growth and metastasis in vitro and in vivo

doi:10.1038/s41598-018-28906-9

.2018年7月13日；8(1):10594.

doi:10.1038/s41598-018-28906-9。

纤维蛋白-3敲除抑制宫颈癌细胞在体内外的生长和转移

胡安·李¹, 陈琪², 夏柳², 李长忠¹, 陈杰（音译）^三, 闵石⁴

附属公司

¹山东大学附属山东省医院妇产科，济南，250021。
²陕西妇产科学院，陕西省妇幼保健与计划生育服务中心，陕西省，274300。
^三山东大学公共卫生学院妇幼保健系，济南，250012。
⁴山东大学附属山东省医院妇产科，济南，250021。minstone11@126.com。

PMID： 30006571
预防性维修识别码：下午6045626
内政部： 10.1038/s41598-018-28906-9

纤维蛋白-3敲除抑制宫颈癌细胞在体内外的生长和转移

胡安·李等。科学代表. 2018.

.2018年7月13日；8（1）：10594。

doi:10.1038/s41598-018-28906-9。

作者

胡安·李¹, 陈琦², 夏柳², 李长忠¹, 陈杰（音译）^三, 闵石⁴

附属公司

¹山东大学附属山东省医院妇产科，济南，250021。
²陕西妇产科学院，陕西省妇幼保健与计划生育服务中心，陕西省，274300。
^三山东大学公共卫生学院妇幼保健系，济南，250012。
⁴山东大学附属山东省医院妇产科，济南，250021。minstone11@126.com。

PMID： 30006571
预防性维修识别码： PMC6045626型
内政部： 10.1038/s41598-018-28906-9

缩回

退缩提示：在体内外，Fiblin-3基因敲除可抑制宫颈癌细胞的生长和转移。
李杰，齐C，刘X，李C，陈J，石M。李杰等。科学报告2023年7月10日；13(1):11162. doi:10.1038/s41598-023-38389-y。科学报告2023。 PMID：37429930 免费PMC文章。没有可用的摘要。

摘要

为了探讨fiblin-3在宫颈癌恶性细胞生长和转移中的作用，采用免疫组织化学方法检测了fiblin3在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变（CIN）和宫颈癌中的表达。采用定量实时聚合酶链反应、western blotting和免疫细胞化学方法评估不同侵袭性克隆亚系中fiblin-3在mRNA和蛋白水平的表达。用Fiblin-3 shRNA和fiblin-3 cDNA转染强侵袭性和弱侵袭性克隆亚系。通过体外和体内功能测定，我们研究了下调和上调fiblin-3表达对不同克隆亚系增殖和侵袭的影响。在慢病毒转染系统中仔细研究了上皮间充质转化（EMT）及其信号通路PI3K/AKT和ERK。Fiblin-3在宫颈癌中表达上调，其过度表达与宫颈癌的恶性表型和不良预后显著相关。Fibulin-3通过诱导EMT和激活PI3K-Akt-mTOR信号转导通路，促进宫颈癌细胞的侵袭能力。纤维蛋白-3可以促进宫颈癌的发展。本文的结果将有助于为宫颈癌患者制定新的预后因素和可能的治疗方案。

PubMed免责声明

利益冲突声明

作者声明没有相互竞争的利益。

数字

图1
纤维蛋白-3在人宫颈组织中的表达。纤维蛋白-3在(A类)正常人宫颈组织(B类)宫颈上皮内瘤变（CIN）(C类)宫颈癌I期和II期，以及(D类)IHC检测宫颈癌Ⅲ期和Ⅳ期。(E类)fiblin-3高表达（蓝线）的宫颈癌患者的预后比fiblin-2低表达（绿线）的患者差。（放大倍数x200）。

图2
不同侵袭能力的宫颈癌细胞克隆亚系中Fiblin-3的表达。通过以下方法测量高侵袭性克隆亚系和低侵袭性克隆亚系中Fiblin-3的表达(A类)western印迹（裁剪印迹）(B类)实时q-RT-PCR，以及(C类)ICC染色。（放大倍数x200）**P（P）* < 0.05.

图3
慢病毒转染系统中下调和上调fiblin-3表达的鉴定。通过以下方法测量对照shRNA感染细胞和对照cDNA感染细胞，以及fiblin-3 shRNA感染的细胞和fiblin-3cDNA感染的细胞中fiblin-2的表达(A类)ICC染色(B类)实时q-RT-PCR，以及(C类)western印迹（裁剪印迹）（放大倍数x200）**P（P）* < 0.05.

图4
纤维蛋白-3敲低和过表达对宫颈癌细胞增殖和集落形成能力的影响。(A类)下调的fiblin-3显著抑制高侵袭性克隆亚系细胞的细胞增殖能力，而上调的fiblin-3显著促进低侵袭性克隆亚系细胞的增殖能力。(B类)fiblin-3基因敲除抑制了高侵袭性克隆亚系细胞的集落形成能力；同时，fiblin-3上调促进了低侵袭性克隆亚系细胞的集落形成能力。(C类)来自软琼脂集落形成试验的对照shRNA感染细胞和fiblin-3 shRNA感染细胞的集落图像。(D类)通过软琼脂集落形成试验（放大x200）检查对照cDNA感染细胞和fiblin-3 cDNA感染的细胞的集落图像**P（P）* < 0.05.

图5
纤维蛋白-3敲低和过表达对宫颈癌细胞迁移和侵袭能力的影响。(A类)使用无Matrigel的Boyden细胞迁移实验测量对照shRNA感染细胞和fiblin-3 shRNA感染的细胞，以及对照cDNA感染细胞和Fiblin-3 cDNA感染的细胞的迁移图像。(B类)通过使用涂有Matrigel的Boyden培养箱进行细胞侵袭实验，测量对照shRNA感染细胞和fiblin-3 shRNA感染的细胞以及对照cDNA感染细胞和Fiblin-3 cDNA感染的细胞的侵袭图像。(C类)迁移和入侵的fibulin-3 shRNA感染细胞的平均计数远低于对照组；同时，迁移和入侵的fiblin-3 cDNA感染细胞的平均计数远高于对照组（放大倍数x200）**P（P）* < 0.05.

图6
fiblin-3基因敲除和过度表达对肿瘤生长的影响体内. (A类)敲除fiblin-3抑制肿瘤生长，而上调fiblin3促进肿瘤生长。裸鼠皮下接种(B类)控制shRNA感染细胞和fiblin-3 shRNA感染的细胞(C类)对照cDNA感染细胞和fiblin-3 cDNA感染的细胞**P（P）* < 0.05.

图7
fiblin-3基因敲除和过度表达对关键EMT特征的影响。慢病毒转染后，EMT标记物包括E-钙粘蛋白、N-cadherin、vimentin、Snail、Slug、Zeb2和Twist通过(A类)western印迹（裁剪印迹）和(B类)慢病毒转染系统中的实时q-RT-PCR**P（P）* < 0.05.

图8
纤维蛋白-3与所研究的EMT标记物E-cadherin、N-cadherin和Vimentin之间的相关性。E-钙粘蛋白(A类)，N-钙粘蛋白(B类)和Vimentin(C类)IHC法检测正常人宫颈组织和宫颈癌组织中的表达。(D类)Pearson的生产-时刻相关系数分析表明，fiblin-3与N-cadherin和Vimentin呈显著正相关，而与E-cadherin呈负相关。

图9
纤维蛋白-3与转录因子之间的相关性与EMT密切相关。使用TCGA数据库中的转录组学数据(A类)fiblin-3与转录因子Snail 1和Snail 2呈显著正相关(B类)转录因子Twist1和Twist2，以及(C类)转录因子Zeb1和Zeb2。

**图10**
通过Boyden小室评估fiblin-3敲除和过度表达对PI3K/AKT/mTOR和ERK通路的影响。纤维蛋白-3 cDNA感染的细胞，其血清饥饿并用二甲基亚砜或指示的抑制剂PD98059和LY294002处理48 h、测量单位：(A类)不含Matrigel和(B类)使用Matrigel进行细胞侵袭测定。Fibulin-3 shRNA-infected cells，which are needed and treated with DMSO and indicated inhibitors PD98059 and LY294002 for 48（Fibulin-3-shRNA-invected cellss which is serum needed，and treatment with DM h、受到(C类)不含Matrigel和(D类)用Matrigel进行细胞侵袭试验。(E类)与LY294002孵育后，迁移和入侵的fiblin-3 cDNA感染细胞的平均计数显著降低，而与PD98059孵育时则没有显著降低。(F类)经二甲基亚砜、LY294002和PD98059处理的细胞中，迁移和侵袭的fiblin-3 shRNA感染细胞的平均计数没有显著差异。

**图11**
通过western blotting（裁剪印迹）测定fiblin-3敲除和过度表达对PI3K/AKT/mTOR和ERK通路的影响。(A类)与DMSO对照组相比，LY294002治疗显著降低了PI3K、AKT和mTOR磷酸化水平，从而改变了EMT标记的表达，但对fiblin-3的表达没有影响。(B类)PD98059降低了ERK磷酸化水平，但对fiblin-3的表达没有影响，并且不能阻止fiblin-3-介导的EMT的促进。(C类)Fiblin-3基因敲除降低PI3K、AKT和mTOR磷酸化水平，从而使PI3K/AKT/mTOR通路失活，但对ERK磷酸化水平没有影响；相反，fiblin-3上调增加了PI3K、AKT和mTOR磷酸化水平，以激活PI3K/AKT/mTOR通路，但对ERK磷酸化水平没有影响。

**图12**
人类宫颈组织中p-PI3K、p-AKT和p-mTOR的表达及其与纤维蛋白-3的相关性。p-PI3K的表达(A类)，p-AKT(B类)和p-mTOR(C类)采用IHC法对正常宫颈组织和宫颈癌组织进行检测。(D类)采用Pearson相关系数分析分别分析p-PI3K、p-AKT、p-mTOR和fiblin-3之间的相关性，并观察到显著的正相关。

请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

纤维蛋白-4通过PI3K/Akt/mTOR途径诱导上皮细胞向间充质细胞转化，从而促进骨肉瘤的侵袭和转移。
张德、王S、陈杰、刘海、陆杰、姜浩、黄A、陈毅。 Zhang D等人。国际癌症杂志。2017年5月；50(5):1513-1530. doi:10.3892/ijo.2017.3921。Epub 2017年3月21日。国际癌症杂志。2017 PMID：28339091 免费PMC文章。
纤维蛋白-4与子宫内膜癌患者的预后相关，并通过Wnt/β-catenin信号通路抑制癌细胞的侵袭和转移。
王T，王M，方S，王Q，方R，陈J。 Wang T等。 Oncotarget公司。2017年3月21日；8(12):18991-19012. doi:10.18632/目标15086。 Oncotarget公司。2017 PMID：28177909 免费PMC文章。
纤维蛋白-3通过诱导上皮细胞向间充质细胞转化和激活Wnt/β-catenin信号通路，促进骨肉瘤的侵袭和转移。
王S、张德、韩S、高平、刘C、李杰、潘X。 Wang S等人。科学代表2017年7月24日；7(1):6215. doi:10.1038/s41598-017-06353-2。 2017年科学报告。 PMID：28740094 免费PMC文章。缩回。
在宫颈癌患者中，fiblin-4的过度表达与肿瘤进展和不良预后相关。
陈杰，张杰，刘X，方瑞，赵毅，马D。陈杰等。 Oncol众议员，2014年6月；31(6):2601-10. doi:10.3892/或.2014.3139。Epub 2014年4月16日。 Oncol报告2014。 PMID：24737201
赖氨酸脱甲基酶2A通过调节PI3K通路和逆转上皮-间质转化促进卵巢癌的进展。
Lu DH、Yang J、Gao LK、Min J、Tang JM、Hu M、Li Y、Li ST、Chen J、Hong L。 Lu DH等。 Oncol Rep.2019年2月；41(2):917-927. doi:10.3892/或.2018.6888。Epub 2018年11月27日。 2019年Oncol报告。 PMID：30483796 免费PMC文章。

查看所有类似文章

引用人

子宫内膜癌和宫颈癌中细胞外基质的变化：系统综述。
帕德日尼克T、奥列克西A、科坎A、塔卡奇I、索博坎M。 Padeínik T等人。国际分子科学杂志。2023年3月13日；24(6):5463. doi:10.3390/ijms24065463。国际分子科学杂志。2023 PMID：36982551 免费PMC文章。审查。
宫颈癌侵袭转移病理生理的多维展望。
George N、Bhandari P、Shruptha P、Jayaram P、Chaudhari S、Satyamoorthy K。 George N等人。分子细胞生物化学。2023年11月；478(11):2581-2606. doi:10.1007/s11010-023-04686-3。Epub 2023年3月11日。分子细胞生物化学。2023 PMID：36905477 免费PMC文章。审查。
纤维蛋白-3缺乏对心肌缺血/再灌注损伤的保护作用在体外心脏球体。
Sharma P、Beck D、Murtha LA、Figtree G、Boyle A、Gentile C。 Sharma P等人。 Front Cardiovasc Med.2022年6月20日；9:913156. doi:10.3389/fcvm.2022.913156。eCollection 2022年。《Front Cardiovasc Med.2022》。 PMID：35795376 免费PMC文章。
纤维蛋白-3在膀胱癌中表达的意义：一项基于组织微阵列的免疫组织化学研究。
Al-Khader A、Fararjeh AFS、Kaddumi EG、Al-Saghbini M。 Al-Khader A等人。世界外科肿瘤杂志。2022年4月26日；20(1):133. doi:10.1186/s12957-022-02597-z。世界外科肿瘤杂志。2022 PMID：35473807 免费PMC文章。
纤维蛋白-3在卵巢癌中的表达及其与预后的关系。
王X，朱莉，吴杰，赵毅。王X等。 Transl癌症研究，2020年9月；9(9):5173-5181. doi:10.21037/tcr-20-984。 Transl Cancer研究，2020。 PMID：35117884 免费PMC文章。

查看所有“被引用”文章

工具书类

1. Bobdey S、Sathwara J、Jain A、Balasubramaniam G。印度宫颈癌的负担和筛查的作用。印度医学儿科杂志。2016;37:278–285. doi:10.4103/0971-5851.195751。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
1. Suneja G等人，美国近距离放射治疗学会：低收入和中等收入国家局部晚期宫颈癌的近距离放射疗法建议。近距离治疗。2017;16:85–94. doi:10.1016/j.brachy.2016.10.007。-内政部-公共医学
1. Mezei AK等人，《中低收入国家宫颈癌筛查方法的成本效益：系统综述》。国际癌症杂志。2017;141:437–446. doi:10.1002/ijc.30695。-内政部-公共医学
1. 张毅，马莫尔斯坦。聚焦分子：纤维蛋白-3（EFEMP1）实验眼科研究。2010；90(3):374–375. doi:10.1016/j.exer.2009.09.018。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
1. Timpl R、Sasaki T、Kostka G、Chu ML。纤维蛋白：细胞外基质蛋白的多功能家族。Nat Rev Mol细胞生物学。2003;4:479–489。doi:10.1038/nrm1130。-内政部-公共医学

出版物类型

行动
行动

MeSH术语

行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动

[1] Bobdey S、Sathwara J、Jain A、Balasubramaniam G。印度宫颈癌的负担和筛查的作用。印度医学儿科杂志。2016;37:278–285. doi:10.4103/0971-5851.195751。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

[2] Bobdey S、Sathwara J、Jain A、Balasubramaniam G。印度宫颈癌的负担和筛查的作用。印度医学儿科杂志。2016;37:278–285. doi:10.4103/0971-5851.195751。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

[3] Suneja G等人，美国近距离放射治疗学会：低收入和中等收入国家局部晚期宫颈癌的近距离放射疗法建议。近距离治疗。2017;16:85–94. doi:10.1016/j.brachy.2016.10.007。-内政部-公共医学

[4] Suneja G等人，美国近距离放射治疗学会：低收入和中等收入国家局部晚期宫颈癌的近距离放射疗法建议。近距离治疗。2017;16:85–94. doi:10.1016/j.brachy.2016.10.007。-内政部-公共医学

[5] Mezei AK等人，《中低收入国家宫颈癌筛查方法的成本效益：系统综述》。国际癌症杂志。2017;141:437–446. doi:10.1002/ijc.30695。-内政部-公共医学

[6] Mezei AK等人，《中低收入国家宫颈癌筛查方法的成本效益：系统综述》。国际癌症杂志。2017;141:437–446. doi:10.1002/ijc.30695。-内政部-公共医学

[7] 张毅，马莫尔斯坦。聚焦分子：纤维蛋白-3（EFEMP1）实验眼科研究。2010；90(3):374–375. doi:10.1016/j.exer.2009.09.018。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

[8] 张毅，马莫尔斯坦。聚焦分子：纤维蛋白-3（EFEMP1）实验眼科研究。2010；90(3):374–375. doi:10.1016/j.exer.2009.09.018。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

[9] Timpl R、Sasaki T、Kostka G、Chu ML。纤维蛋白：细胞外基质蛋白的多功能家族。Nat Rev Mol细胞生物学。2003;4:479–489。doi:10.1038/nrm1130。-内政部-公共医学

[10] Timpl R、Sasaki T、Kostka G、Chu ML。纤维蛋白：细胞外基质蛋白的多功能家族。Nat Rev Mol细胞生物学。2003;4:479–489。doi:10.1038/nrm1130。-内政部-公共医学

将引文保存到文件

电子邮件引文

添加到集合

添加到我的书目

您保存的搜索

为外部引文管理软件创建文件

您的RSS源

收回物品

纤维蛋白-3敲除抑制宫颈癌细胞在体内外的生长和转移

附属公司

纤维蛋白-3敲除抑制宫颈癌细胞在体内外的生长和转移

作者

附属公司

缩回

摘要

利益冲突声明

数字

类似文章

引用人

工具书类

出版物类型

MeSH术语

物质

收回物品

缩回

摘要

利益冲突声明

数字

类似文章

引用人

工具书类

出版物类型

MeSH术语

物质

相关信息