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.2018年7月1日;33(7):1270-1280.
doi:10.1093/humrep/dey119。

GnRH拮抗剂方案IVF周期植入期AIF-1介导的TNF-α表达增加

附属公司

GnRH拮抗剂方案IVF周期植入期AIF-1介导的TNF-α表达增加

徐步芳等。 人类生殖. .

摘要

研究问题:在促性腺激素释放激素(GnRH)拮抗剂方案的体外受精(IVF)周期中,与炎症和移植排斥相关的细胞因子移植物炎症因子-1(AIF-1)异常升高是否会对子宫内膜容受性产生潜在影响?

总结答案:我们的研究结果表明,在采用GnRH拮抗剂方案的IVF周期中,AIF-1增加,并在着床期介导更大的TNF-α表达,这可能对胚胎着床不利。

已知内容:研究表明,GnRH拮抗剂方案周期的植入率和临床妊娠率低于GnRH-激动剂长方案周期。子宫内膜容受性而非胚胎质量是导致这一现象的关键因素;然而,其机制仍然未知。

研究设计、规模、持续时间:在2012年至2014年期间,对238名接受第一周期IVF/ICSI的患者的植入率和妊娠率进行了研究。其中40名患者选择不进行新鲜胚胎替换,并被分为两组:(i)GnRH拮抗剂方案和(ii)GnRH激动剂长方案,第3组包括20名未经治疗的输卵管因素不孕妇女。在同一时间段内,从18名患有输卵管因素的不孕妇女的月经周期早期增殖期、晚期增殖期和中期分泌期中取出子宫内膜组织(n=6/组)。

参与者/材料、设置、方法:采用微阵列分析、RT-qPCR、蛋白质印迹分析、免疫组织化学等方法检测AIF-1及其相关细胞因子(TNF-α、IL1β、IL1RA、IL6、IL12、IL15和IL18)的表达水平。AIF-1对子宫容受性的影响通过体外粘附实验(JAR细胞和石川细胞的共培养)进行建模。

主要结果和机会的作用:AIF-1的表达在早期增殖期最高,随后在晚期增殖期下降,在中期分泌期几乎消失,表明低AIF-1表达可能对植入期胚胎着床很重要。微阵列结果显示,与对照组(折叠变化[FC]=3.75)和激动剂组(FC=2.20)相比,拮抗剂组的AIF-1上调。原始微阵列数据和完整的基因表达表以GSE107914的登录号上传到GEO。拮抗剂组AIF-1和TNF-α的mRNA和蛋白表达水平均高于其他两组(P<0.05),但差异无显著性(P>0.05)。转染AIF-1表达载体后96 h,石川细胞和原代子宫内膜细胞中的TNF-α蛋白水平均显著升高(P<0.05),表明TNF-β是由AIF-1介导的子宫内膜细胞。石川细胞中AIF-1的过度表达抑制了JAR细胞对其的粘附。因此,增加AIF-1可能通过增加TNF-α抑制植入期间的粘附。

谨慎的限制理由:微阵列的样本量较小,这可能会削弱我们结果的准确性;然而,RT-qPCR和Western blotting分析的样本量足以弥补我们研究中的这一不足。此外,AIF-1和TNF-α的异常表达可能是限制植入成功的诸多因素之一。因此,需要进一步广泛的体外机制和体内动物研究来评估该途径的实际功能影响。

调查结果的更广泛含义:抗TNF-α治疗可能减轻GnRH拮抗剂对子宫内膜容受性的不良影响,并提高GnRH-拮抗剂方案在体外受精中的着床率。

研究经费/竞争利益:这项工作得到了国家自然科学基金的资助,资助号分别为81771656和81370763;中华医学会临床研究专项基金,批准号16020480664;上海交通大学医药工程基金,批准号YG2017ZD11、YG2017-MS57;以及默克-塞罗诺中国生育研究基金协议。P.C.K.L.由加拿大卫生研究院基金会计划拨款143317支持。所有作者都没有任何利益冲突。

PubMed免责声明

数字

图1
图1
生育妇女月经周期不同阶段子宫内膜组织中AIF-1的典型图像和定量(n个=每组6个)。所有数据均以平均值±SEM.EP表示,即早期增殖期;LP,晚期增殖期;MS,分泌中期。各组之间的差异通过Kruskal–Wallis检验进行分析,然后使用Mann–Whitney进行多重比较U型-测试。数据被认为具有统计意义,如果P(P)< 0.05.
图2
图2
AIF-1微阵列的表达和验证(n个=每组3人)。(A类B类)差异表达基因(DEG)的功能富集结果,包括京都基因和基因组百科全书(KEGG)途径和基因本体论(GO)。P(P)-每个术语的值和基因计数分别显示为条形图和直线。红色文本表明AIF-1是已鉴定的基因之一。(C类)蛋白质和蛋白质相互作用网络。红色节点表示上调蛋白质,绿色节点表示下调蛋白质。结的大小与相关基因的数量呈正相关,较大的模块与免疫激活相关,并含有AIF-1(红色箭头)。(D类)使用微阵列在对照组、GnRH激动剂(GnRH-ago)组和GnRH-拮抗剂(Gn RH-ant)组之间表达AIF-1 mRNAFC'指折叠变化。这个-轴为对数2标度,上晶须、方框上侧、方框内粗线、方框下侧和下晶须分别对应最大值、上75%分位数、中位数、下25%分位数和最小值。(E类)使用微阵列和RT-qPCR分析GnRH激动剂/对照、GnRH-ant/对照和GnRH-ant/GnRH拮抗剂中AIF-1 mRNA的表达。误差线表示为SEM。
图3
图3
对照组、促性腺激素释放激素激动剂组和促性腺素释放激素拮抗剂组AIF-1表达水平。(A类)图显示了通过RT-qPCR检测的三组中AIF-1的相对mRNA水平。用方差分析进行分析,然后进行Bonferroni检验。(B类)三组中AIF-1蛋白的代表性蛋白质印迹图像和定量。(C类)通过免疫组织化学评估三组中AIF-1的代表性图像和定量。所有数据均以平均值±SEM表示。各组之间的差异通过Kruskal–Wallis检验进行分析,然后使用Mann–Whitney进行多重比较U型-B组和C组的测试。如果P(P)< 0.05.
图4
图4
AIF-1强制表达后细胞因子水平的变化。(A类)用AIF-1表达载体转染后0、24、48、72和96 h用RT-qPCR检测TNF-α、IL1β、IL1RA、IL6、IL12、IL15和IL18 mRNA水平。所有细胞因子均显著增加(P(P)<0.05或P(P)<0.01),IL6除外。(B类)用AIF-1表达载体(0.5或1μg)转染72 h后,TNF-α、IL1β、IL1RA、IL12、IL15和IL18 mRNA的水平。TNF-α、IL1β和IL1RA mRNA水平显著高于对照组(P(P)< 0.01). (C类)转染AIF-1表达质粒后96 h,通过Western blotting分析石川细胞中TNF-α、IL1β和IL1RA蛋白水平的变化。只有TNF-α显著增加(P(P)< 0.05). (D类)用AIF-1表达质粒转染原代内皮细胞和基质细胞后96 h,通过Western blotting分析TNF-α蛋白水平的变化。AIF-1质粒转染后TNF-α显著增加(P(P)< 0.05). 所有数据均以平均值±SEM表示。所有数据组之间的差异通过ANOVA进行分析,然后使用Bonferroni检验进行多重比较(图4B中AIF-1的表达除外,该表达通过Kruskal–Wallis检验进行分析,随后使用Mann–Whitney进行多重比较U型-测试)。数据被认为具有统计意义,如果P(P)< 0.05.
图5
图5
对照组、促性腺激素释放激素激动剂组和促性腺素释放激素拮抗剂组细胞因子的表达。(A类)图显示了通过RT-qPCR检测的三组中TNF-α、IL1RA、IL1β、IL6、IL12、IL15、IL18的相对mRNA水平。(B类)三组中具有代表性的western blotting图像和TNF-α蛋白定量。(C类)通过免疫组织化学评估三组中TNF-α的代表性图像和定量。所有数据均以平均值±SEM表示。TNF-α组和IL18组之间的差异通过Kruskal-Wallis检验进行分析,然后使用Mann-Whitney进行多重比较U型-用方差分析法分析IL1RA、IL1β、IL6、IL12、IL15组间的差异。数据在P(P)< 0.05.
图6
图6
AIF-1对JAR细胞与石川细胞粘附的影响。用阴性或AIF-1表达慢病毒处理石川细胞。计算荧光标记的JAR细胞,并表示为阴性组的倍数。所有数据均以平均值±SEM表示。各组之间的差异通过独立样本进行分析T型-测试。数据被认为具有统计意义,如果P(P)< 0.05.

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    1. Al Inany HG、Abou Setta AM、Aboulghar M.促性腺激素释放激素拮抗剂用于辅助受孕:Cochrane综述。2007年在线转载生物识别;14:640–649.-公共医学
    1. Al-Inany HG、Youssef MA、Ayeleke RO、Brown J、Lam WS、Broekmans FJ。辅助生殖技术用促性腺激素释放激素拮抗剂。2016年Cochrane数据库系统修订版;4:Cd001750。-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Cota AM、Oliveira JB、Petersen CG、Mauri AL、Massaro FC、Silva LF、Nicoletti A、Cavagna M、Baruffi RL、Franco JG Jr.促性腺激素释放激素激动剂与促性腺素释放激素拮抗剂在辅助生殖周期中的比较:卵母细胞形态学。Reprod生物内分泌2012;10:33.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Debrock S、De Strooper B、Vander Perre S、Hill JA、D’Hooghe TM。在定量体外模型中,肿瘤坏死因子α、白细胞介素-6和白细胞介素-8不会促进人子宫内膜上皮细胞与间皮细胞的粘附。Hum Reprod 2006;21:605–609.-公共医学
    1. Dimitriadis E,White CA,Jones RL,Salamansen LA。与着床相关的子宫内膜细胞因子、趋化因子和生长因子。2005年人类繁殖更新;11:613–630.-公共医学

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