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.2018年6月11日;145(11):开发160531。
doi:10.1242/dev.160531。

恒河猴单倍体神经前体细胞的遗传筛选和多向性

附属公司

恒河猴单倍体神经前体细胞的遗传筛选和多向性

王海松等。 开发. .

摘要

单倍体胚胎干细胞(haESCs)已广泛应用于正向和反向遗传筛选。然而,由于在分化过程中自发的二倍体化,很难获得哺乳动物单倍体体细胞系。作为一种非人类灵长类动物,猴子被广泛用于基础和临床前研究,其中单倍体细胞仅限于ESCs。在这里,我们报告了恒河猴haESCs在优化培养基中显示出幼稚的多能性和稳定的单倍体。该模型促进了单倍体神经前体细胞(haNPC)的衍生,haNPC长时间保持单倍体并向神经元和胶质细胞分化的潜能在体外高通量诱捕突变可通过以下途径有效引入haNPC猪背肉转座子。通过概念验证实验证明,该系统在识别神经毒物的基因靶点时很有用。通过CRISPR/Cas9编辑,我们确认B4镀锌6,来自候选基因列表,是A803467(河豚毒素样毒物)的抗性基因。该模型是第一个具有增殖能力、多潜能和完整基因组的非人灵长类单倍体体细胞系,为隐性遗传和潜在药物筛选提供了细胞资源。

关键词:遗传筛选;单倍体NPC;猴子;天真的多能性。

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