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.2018年7月6日;38(4):英国标准20180544。
doi:10.1042/BSR20180544。 2018年8月31日印刷。

氧化损伤下白藜芦醇通过PI3K/Akt途径激活自噬促进髓核细胞基质合成

附属公司

氧化损伤下白藜芦醇通过PI3K/Akt途径激活自噬促进髓核细胞基质合成

金楼高等。 Biosci代表. .

摘要

髓核基质生成减少是椎间盘退变的典型特征。据报道,白藜芦醇(RSV)在多种病理因素下发挥保护作用。本研究旨在研究RSV对氧化损伤下NP基质稳态的影响及其潜在机制。大鼠NP细胞暴露于H2O(运行)2产生氧化损伤的解决方案。在培养基中加入RSV和3-甲基腺嘌呤(3-MA),分别研究RSV和细胞自噬的作用。通过大分子(聚集聚糖和II型胶原)的表达和糖胺聚糖(GAG)的含量来评估NP基质的合成。通过几个分子标记的表达评估细胞自噬的激活。此外,还评估了PI3K/Akt通路的活性,以研究其潜在作用。与对照组(用H处理的NP细胞2O(运行)2)RSV显著上调基质大分子(聚集蛋白聚糖和胶原)的表达,促进GAG的生成,并增加自噬相关标记物(Beclin-1和LC-3)的表达。进一步分析表明,3-MA对自噬的抑制部分减弱了NP基质的生成。此外,与对照NP细胞相比,RSV增加了PI3K/Akt通路的活性,但不受3-MA的影响。RSV在氧化损伤下对增强NP基质合成起保护作用。从机制上讲,通过PI3K/Akt途径激活细胞自噬可能参与这一过程。RSV可能是减轻氧化应激诱导的椎间盘退变的有效药物。

关键词:自噬;椎间盘退变;髓核;白藜芦醇。

PubMed免责声明

利益冲突声明

作者声明,手稿不存在相互竞争的利益。

数字

图1
图1。基质大分子在NP细胞中的表达
(A类)聚集蛋白聚糖和II型胶原mRNA表达的实时PCR分析。(B类)聚集蛋白聚糖和II型胶原蛋白表达的Western blot分析。数据表示为平均值±S.D。,n个=3.*显著差异(P(P)<0.05)。
图2
图2。自噬相关分子在NP细胞中的表达
(A类)Beclin-1和LC3 mRNA表达的实时PCR分析。(B类)Beclin-蛋白表达和LC3-II/LC3-I比率的Western blot分析。数据表示为平均值±S.D。,n个=3.*显著差异(P(P)<0.05)。
图3
图3。NP细胞基质大分子的ICC染色
(A类)聚集蛋白聚糖的免疫染色和染色强度分析。(B类)II型胶原免疫染色及染色强度分析。放大倍数:200×;刻度=100μM;n个=3.数据表示为平均值±S.D.*显著差异(P(P)<0.05)。
图4
图4。NP细胞中GAG含量的测量
数据表示为平均值±S.D。,n个=3.*显著差异(P(P)<0.05)。
图5
图5。NP细胞中PI3K/Akt通路的活性
PI3K/Akt通路的活性表示为p-Akt表达与总Akt表示的比率。数据表示为平均值±S.D。,n个=3.*显著差异(P(P)<0.05)。

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