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.2018年7月；18(1):308-314.
doi:10.3892/mmr.2018.9005。 Epub 2018年5月9日。

人类HLA‑F邻近转录物10促进膀胱癌癌细胞起始细胞的形成和顺铂耐药

陈丽 1, 王振帆 2, 宁汉峰 三, Jian Dong（建东） 三, 邓晓燕 三, 尹跃（音） 三, 郭月红 三, 侯建全 1
附属公司

人类HLA‑F相邻转录物10促进膀胱癌癌起始细胞的形成和顺铂耐药性

陈丽等。 分子医学代表. 2018年7月.

缩回

摘要

上皮-间充质转化（EMT）在肿瘤侵袭、转移、肿瘤起始细胞（CICs）的形成和耐药性中起着重要作用。HLA‑F邻近转录物10（FAT10）被认为是膀胱癌的癌基因。然而，FAT10在膀胱癌中对EMT和CICs形成的功能贡献尚不清楚。本研究报告，膀胱癌细胞系中FAT10蛋白表达上调，FAT10的过度表达促进膀胱癌UMUC-3细胞中EMT和CICs的形成。此外，在中国膀胱癌患者中，肿瘤组织中FAT10表达增加与总生存期较短和无进展生存期相关。FAT10的过度表达促进了顺铂耐药性膀胱癌的形成。这些结果表明FAT10可能是治疗膀胱癌的新靶点。

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图1。
图1。
FAT10在膀胱癌细胞系中失调，FAT10过度表达促进UMUC-3细胞的EMT。（A） NBEs样品和膀胱癌细胞系（T24、HT-1376、J82、RT4、UMUC-3和TCCSUP）中FAT10蛋白的Western blot分析。（B） 用空载体（pcDNA3.1；mock）或FAT10表达质粒（pcDNA2.1-FAT10）转染UMUC-3细胞中FAT10蛋白的Western blot分析。（C） 用空载体（pcDNA3.1，mock）或FAT10表达质粒（pcDNA2.1-FAT10）转染UMUC-3细胞。转染72小时后获得细胞形态照片（比例尺，50µm）。（D） Western blot分析转染空载体（pcDNA3.1；mock）或FAT10表达质粒（pcDNA2.1-FAT10）的UMUC-3细胞中的Vimentin、E-cadherin和N-cadherin蛋白。（E） 用空载体（pcDNA3.1；模拟）或FAT10表达质粒（pcDNA2.1-FAT10）转染的UMUC-3细胞中的波形蛋白免疫荧光分析。n=3（比例尺，20µm）。FAT10、HLA-F邻近转录本10；EMT，上皮细胞向间充质细胞转化；NBE，正常膀胱上皮；DAPI，4′6-二氨基-2-苯基吲哚。
图2。
图2。
FAT10的过度表达促进UMUC-3细胞的运动。（A） 用空载体（pcDNA3.1；模拟）或FAT10表达质粒（pcDNA2.1-FAT10）转染UMUC-3细胞的伤口愈合试验。转染72小时后获得细胞形态照片（比例尺，100µm）。（B） 转染UMUC-3细胞的侵袭和迁移分析（比例尺，10µm）。如图所示，P<0.05（n=3）。FAT10，HLA-F相邻转录本10。
图3。
图3。
FAT10的过度表达与肿瘤起始细胞的形成增加有关。（A） 转染空载体（pcDNA3.1；模拟）或FAT10表达质粒（pcDNA2.1-FAT10）的UMUC-3细胞的球形生长试验。比例尺，20µm。（B） 用空载体（pcDNA3.1；mock）或FAT10表达质粒（pcDNA2.1-FAT10）转染UMUC-3细胞中ALDH1A1蛋白的Western blot分析。如图所示，P<0.01（n=3）。FAT10、HLA-F邻近转录本10；ALDH1A1、乙醛脱氢酶1家族成员A1。
图4。
图4。
FAT10的过度表达与中国患者的不良生存结果有关。（A） IHC用于FAT10，低FAT10表达组（放大倍率，×40）。（B） IHC用于FAT10，FAT10高表达组（放大倍率，×40）。（C） Kaplan-Meier的总体生存曲线。（D） 无进展生存曲线的Kaplan-Meier。FAT10低表示患者FAT10蛋白表达低，FAT10高表示患者FAT10蛋白表达高。（E） 膀胱癌及邻近正常组织中FAT10蛋白表达的Western blot分析。（F） 膀胱癌和邻近正常组织中FAT10 mRNA的逆转录定量聚合酶链反应。如图所示，P<0.01（n=20）。FAT10、HLA-F邻近转录本10；IHC、免疫组织化学；HR、危害比；CI，置信区间；C组，膀胱癌；N组，邻近正常组织。
图4。
图4。
FAT10的过度表达与中国患者的不良生存结果相关。（A） IHC用于FAT10，低FAT10表达组（放大倍率，×40）。（B） IHC用于FAT10，FAT10高表达组（放大倍率，×40）。（C） Kaplan-Meier表示总体生存曲线。（D） 无进展生存曲线的Kaplan-Meier。FAT10低表示患者FAT10蛋白表达低，FAT10高表示患者FAT10蛋白表达高。（E） 膀胱癌及邻近正常组织中FAT10蛋白表达的Western blot分析。（F） 膀胱癌和邻近正常组织中FAT10 mRNA的逆转录定量聚合酶链反应。如图所示，P<0.01（n=20）。FAT10、HLA-F邻近转录本10；IHC、免疫组织化学；HR、危害比；CI，置信区间；C组，膀胱癌；N组，邻近正常组织。
图5。
图5。
FAT10的过度表达促进了UMUC-3细胞对顺铂的耐药性。（A） MTT检测UMUC-3细胞的细胞活力。用空载体（pcDNA3.1；mock）或表达FAT10的质粒（pcDNA3.1-FAT10）转染的UMUC-3细胞用不同剂量的顺铂处理**与UMUC-3-Mock相比，P<0.01。（B） 用空载体（pcDNA3.1；mock）或FAT10表达质粒（pcDNA2.1-FAT10）转染的UMUC-3细胞中miR-200的逆转录定量聚合酶链反应。P＜0.01（n＝3）。FAT10、HLA-F邻近转录本10；miR，microRNA。
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