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.2018年5月；15(5):4477-4484.
doi:10.3892/etm.2018.5946。 Epub 2018年3月9日。

肋骨根颗粒通过调节TGF-β介导PI3K/AKT信号通路改善溃疡性结肠炎

就到王晓红 1, 李丹（Dan Li） 1, 张勇（音） 1, 吴爽（音） 2, 方堂 1
附属公司

肋骨根颗粒通过调节TGF-β介导PI3K/AKT信号通路改善溃疡性结肠炎

就到王晓红等。 实验治疗学. 2018年5月.

摘要

溃疡性结肠炎是一种发生在结肠和直肠的慢性非特异性炎症疾病。Costus root是一种中药，具有抗菌特性，对肠道细菌的再生起抑制作用。然而，Costus根介导的溃疡性结肠炎改善的分子机制尚不清楚。本研究创建了一种Costus根颗粒复合配方，并对其在溃疡性结肠炎大鼠模型中的治疗效果进行了研究。以成分溶于传统水煎剂中作为对照。从实验大鼠分离的结肠上皮细胞中也分析了Costus根颗粒介导的潜在机制。本研究结果表明，Costus根颗粒治疗可抑制结肠组织的炎症反应。肋骨根颗粒治疗还抑制了溃疡性结肠炎大鼠模型结肠上皮细胞的凋亡。对这些作用的潜在机制的分析表明，施用Costus根颗粒可增加转化生长因子β的表达，从而激活结肠上皮细胞中的磷脂酰肌醇3-激酶/RAC-α丝氨酸/苏氨酸-蛋白激酶信号通路。值得注意的是，服用Costus根颗粒可改善溃疡性结肠炎大鼠的胃痛、腹泻和便血，并增加了大鼠的体重。综上所述，这些结果表明，Costus根颗粒显著改善结肠上皮炎症，减少结肠上皮细胞凋亡，改善结肠功能，这表明Costus根粒剂是治疗溃疡性结肠炎的有效药物。

关键词：细胞凋亡；肋根颗粒；炎症；磷脂酰肌醇3-激酶/RAC-α丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶；转化生长因子β；溃疡性结肠炎。

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数字

图1。
图1。
肋骨根颗粒治疗减少溃疡性结肠炎大鼠结肠上皮细胞的炎症。与对照组相比，肋骨根颗粒治疗降低了溃疡性结肠炎大鼠结肠上皮细胞中IL-1β和TNF-α的（A）mRNA和（B）蛋白水平。与对照组相比，肋骨根颗粒上调了溃疡性结肠炎大鼠结肠上皮细胞中IL-6和IL-10的（C）mRNA和（D）蛋白水平**P<0.01。ns，不显著；IDTWD，将成分溶解到传统的水煎剂中；白细胞介素；TNF、肿瘤坏死因子。
图2。
图2。
肋骨根颗粒治疗抑制溃疡性结肠炎大鼠结肠上皮细胞的凋亡。（A） 免疫组织化学分析和凋亡检测表明，与对照组相比，Costus根颗粒治疗抑制了溃疡性结肠炎大鼠模型结肠上皮细胞的凋亡。溃疡性结肠炎大鼠结肠上皮细胞中，Costus根粒治疗（B）降低了促凋亡蛋白裂解caspase-3和BAD的表达，（C）上调了促凋亡蛋白质p53和Bcl-2的表达**P<0.01。ns，不显著；IDTWD，将成分溶解到传统的水煎剂中；BAD，Bcl2-相关细胞死亡激动剂；凋亡调节因子Bcl-2；p53，细胞肿瘤抗原p53。
图3。
图3。
肋骨根颗粒治疗可改善大鼠溃疡性结肠炎的症状。与对照组相比，肋骨根颗粒治疗可改善溃疡性结肠炎大鼠的（A）胃痛、（B）腹泻和（C）便血。（D） 与对照组相比，Costus root治疗组大鼠体重增加**P<0.01。ns，不显著；IDTWD，成分溶于传统水煎剂中。
图4。
图4。
肋骨根颗粒治疗通过增加TGF-β介导的PI3K/AKT信号调节炎症。（A） 与对照组相比，肋骨根颗粒治疗组结肠上皮细胞TGF-β表达增加。与对照组相比，Costus根颗粒处理后结肠上皮细胞中PI3K和AKT的（B）活性和（C）表达增加。与用si-TGF-β和（D）Costus根颗粒或（E）IDTWD处理的细胞相比，TGF-β敲除降低结肠上皮细胞中PI3K和AKT活性。TGF-β敲除抑制经si-TGF-β和（F）IDTWD或（G）Costus根颗粒处理的结肠上皮细胞中PI3K和AKT的表达。TGF-β基因敲除抑制经si-TGF-β、Costus root（H）和IDTWD（I）处理的结肠上皮细胞中TNF-α和IL-1β、6和10的表达**P<0.01。ns，不显著；IDTWD，成分溶于传统水煎剂中；转化生长因子；PI3K，磷脂酰肌醇3-激酶；AKT，RAC-α丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，pAKT，磷酸化AKT；si，小干扰。
图4。
图4。
肋骨根颗粒治疗通过增加TGF-β介导的PI3K/AKT信号调节炎症。（A） 与对照组相比，肋骨根颗粒治疗组结肠上皮细胞TGF-β表达增加。与对照组相比，Costus根颗粒处理后结肠上皮细胞中PI3K和AKT的（B）活性和（C）表达增加。与用si TGF-β和（D）Costus根颗粒或（E）IDTWD处理的细胞相比，TGF-β敲低降低了结肠上皮细胞中的PI3K和AKT活性。TGF-β敲除抑制经si-TGF-β和（F）IDTWD或（G）Costus根颗粒处理的结肠上皮细胞中PI3K和AKT的表达。TGF-β基因敲除抑制经si-TGF-β、Costus root（H）和IDTWD（I）处理的结肠上皮细胞中TNF-α和IL-1β、6和10的表达**P<0.01。ns，不显著；IDTWD，成分溶于传统水煎剂中；转化生长因子；PI3K，磷脂酰肌醇3-激酶；AKT，RAC-α丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，pAKT，磷酸化AKT；si，小干扰。
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