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.2018年7月;1863(7):783-793。
doi:10.1016/j.bbalip.2018.04.004。 Epub 2018年4月11日。

细胞内微极化共焦光谱成像实时定量分析脂质储存和脂解途径

附属机构

细胞内微极化共焦光谱成像实时定量分析脂质储存和脂解途径

朱塞佩·毛卢奇等。 Biochim Biophys Acta Mol细胞生物脂质. 2018年7月.

摘要

生物体以脂滴的形式将脂肪酸储存在三酰甘油中,或通过激活脂解或储存途径水解三酰甘油以响应能量需求。这些途径是复杂的序列反应,在不同的细胞类型中受到精细调节。在这里,我们提出了一种基于高时空分辨率的方法,用于量化活细胞中脂肪酸转化为甘油三酯的过程,而不引入样品制备伪影。我们对培养的胰岛素分泌β细胞的细胞内微极性进行共焦光谱成像,以检测微极性随时间和显微镜图像的不同像素发生的变化。然后,在谱相量技术的框架内对采集的数据进行分析。该方法提供了一个代谢参数,用于定量评估脂肪酸-三酰甘油的周转以及脂肪分解和储存途径的激活。此外,它还提供了一个极性剖面,代表了超极性、极性和非极性类脂的贡献。这三种不同的类别可以亚微米分辨率显示在图像上,揭示了生理和病理环境下细胞中脂质的空间定位。这种新方法能够以亚微米分辨率对活细胞中脂肪酸转化为甘油三酯的过程进行精细的实时可视化。它还检测脂质储存和使用之间的不平衡,这可能导致活细胞和生物体内的代谢紊乱。

关键词:β细胞;脂肪酸;脂滴;代谢成像;谱相量;甘油三酯。

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