跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息,确保你在联邦政府政府网站。

HTTP服务器

该站点是安全的。
这个https(https)://确保您连接到官方网站,并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2018年3月22日10:53-67。
doi:10.2147/BCTT。S156285。 2018年eCollection。

p53活化的APR-246和磷脂酰丝氨酸靶向抗体的联合有效抑制激素依赖性突变型p53表达的乳腺癌异种移植物的肿瘤发展

附属公司

p53活化的APR-246和磷脂酰丝氨酸靶向抗体的联合有效抑制激素依赖性突变型p53表达的乳腺癌异种移植物的肿瘤发展

梁亚云等。 乳腺癌(鸽子医学出版社). .

摘要

背景:30%到40%的人乳腺癌表达有缺陷的抑癌基因p53。野生型p53抑癌蛋白促进细胞周期阻滞和凋亡,抑制血管内皮生长因子依赖的血管生成,而突变型p53蛋白(mtp53)缺乏这些功能,导致肿瘤细胞存活和转移。因此,恢复p53功能是一种很有希望的药物靶向策略,可用于治疗表达mtp53的乳腺癌。

方法:在本研究中,我们试图确定APR-246(一种恢复p53功能的小分子药物)与2aG4(一种靶向肿瘤血管上的磷脂酰丝氨酸残基并破坏肿瘤血管系统的抗体)联合使用是否能有效抑制晚期激素依赖性乳腺癌肿瘤的生长。

结果:APR-246降低体外表达mtp53的BT-474和T47-D人乳腺癌细胞的细胞活力,并以剂量依赖性的方式显著诱导凋亡。然而,APR-246并没有降低表达野生型p53的MCF-7乳腺癌细胞的细胞活力。接下来,我们使用在雌性裸鼠体内建立的BT-474和T47-D肿瘤异种移植物来检测APR-246的体内抗肿瘤作用。用APR-246和/或2aG4治疗荷瘤小鼠,并随时间观察肿瘤体积。联合治疗比单独使用任何一种药物更有效地抑制肿瘤生长,并且联合治疗完全根除了一些肿瘤。肿瘤组织切片的免疫组织化学分析表明,与单独使用两种药物相比,联合治疗能更有效地诱导肿瘤异种移植物的凋亡和减少细胞增殖。重要的是,与单独使用两种药物相比,联合治疗显著降低了作为肿瘤转移主要途径的血管密度。

结论:根据我们的研究结果,我们认为通过同时靶向mtp53蛋白和表达mtp53的肿瘤血管,可以有效控制乳腺癌的生长。

关键词:246年4月;血管生成;细胞凋亡;血管靶向剂;乳腺癌;第53页。

PubMed免责声明

利益冲突声明

披露作者报告在这项工作中没有利益冲突。

数字

图1
图1
APR-246和2aG4治疗裸鼠肿瘤异种移植物的方案。
图2
图2
APR-246和PRIMA-1降低表达mtp53的乳腺癌细胞的细胞活力。笔记:电池(4–8×10)在含有5%FBS的DMEM/F12培养基中培养,并与载体(O)或增加浓度的APR-246或PRIMA-1孵育24或48小时。使用SRB分析测定细胞活力。数据显示为六次不同测定的平均值±SEM。缩写:胎牛血清;mtp53,突变型p53;SEM,平均值标准误差;SRB,硫代罗丹明B。
图3
图3
APR-246增加BT-474乳腺癌细胞中mtp53的DNA结合。笔记:细胞在补充有5%FBS的DMEM/F12培养基中培养过夜。然后用PBS清洗细胞一次,并用50μM APR-246处理1小时,然后通过刮取和随后制备核提取物进行收获。使用核提取物(2.5μg)进行TransAM分析,每个样品分析三份。将DNA结合能力的激活与载体处理组(对照组)进行比较,后者的值设置为1。表达wtp53的MCF-7细胞的核提取物(随TransAM试剂盒提供)用作阳性对照(阳性-C)。数据显示为三次不同测定的平均值±SEM*与未经治疗的对照组明显不同(P(P)<0.05; 方差分析)。缩写:方差分析;胎牛血清;mtp53,突变型p53;SEM,平均值标准误差。
图4
图4
APR-246诱导BT-474乳腺癌细胞凋亡。注:(A)细胞在含有5%FBS的DMEM/F12培养基中生长24小时,然后用0(载体对照)、5、10或20μM APR-246(A-5、A-10、A-20)处理24小时。细胞用Annexin V-FITC(BioVision)和PI染色,用FACScan流式细胞术定量AnnexinV+PI阳性细胞的百分比(象限R3)。显示了代表性数据;插入值表示所示示例中Annexin V+PI阳性细胞的百分比。条形图显示了三次测定的平均值±SEM*与对照组显著不同(C)(P(P)<0.05; 方差分析)。(B)用0(载体对照;Con)、25或50μM APR-246处理细胞3或12小时。细胞收获后,通过Western blot分析全细胞裂解物(45μg蛋白)的Bax和p21蛋白表达以及来自caspase-3-Pro带的caspase-3裂解(caspase-3Cle)。β-actin作为负荷对照。缩写:方差分析;控制;胎牛血清;异硫氰酸荧光素;PI,碘化丙啶;SEM,平均值标准误差。
图5
图5
APR-246和2aG4对裸鼠BT-474肿瘤异种移植瘤生长具有加性抑制作用。笔记:裸鼠(n=8–10/组)在注射5×10的雌激素颗粒前48小时接种雌激素颗粒6BT-474细胞进入两侧。每3天用数字卡尺测量肿瘤体积。(A)左侧面板,肿瘤生长曲线,各点代表各组小鼠的平均肿瘤体积±SEM*与对照组显著不同**与对照组和2aG4组有显著差异(P(P)<0.05; 方差分析)。右上图,实验结束时完全根除的肿瘤数量。被根除的肿瘤数量被转换为肿瘤总数的百分比,并显示在图表中的每个条形图上方。右下面板,治疗期间的动物体重。箭头表示治疗的起点和终点。数值代表平均值±SEM。(B)实验结束时各组肿瘤大小的代表性图像。缩写:方差分析;SEM,平均值标准误差。
图6
图6
APR-246和2aG4对裸鼠T47-D肿瘤异种移植瘤生长具有加性抑制作用。笔记:裸鼠(n=8–10/组)在注射5×10雌激素颗粒前48小时接种雌激素颗粒6T47-D细胞进入两侧。每3天用数字卡尺测量肿瘤体积。(A)左侧面板,肿瘤生长曲线,各点代表各组小鼠的平均肿瘤体积±SEM*与对照组显著不同**与对照组、APR-246组和2aG4组显著不同(P(P)<0.05; 方差分析)。右上角,实验结束时根除的肿瘤数量。被根除的肿瘤数量被转换为肿瘤总数的百分比,并显示在图表中的每个条形图上方。右下面板,治疗期间的动物体重。箭头表示治疗的起点和终点。数值代表平均值±SEM。(B)实验结束时各组肿瘤大小的代表性图像。缩写:方差分析;SEM,平均值标准误差。
图7
图7
APR-246和2aG4联合治疗降低裸鼠乳腺癌异种移植瘤中Ki67增殖标记物的表达。笔记:实验结束时,对肿瘤组织切片进行Ki67免疫染色,并对信号进行量化。左,免疫组化染色的代表性图像。右侧,条形图表示量化的Ki67信号,显示为平均值±SEM*与对照组显著不同**与APR-246和2aG4组显著不同(P(P)<0.05; 方差分析)。插入表示负控件。缩写:方差分析;SEM,平均值标准误差。
图8
图8
APR-246和2aG4联合治疗诱导裸鼠乳腺癌异种移植瘤细胞凋亡。笔记:实验结束时,对肿瘤组织切片进行TUNEL分析,并对信号进行量化。左,TUNEL染色的代表性图像。右侧,条形图表示量化的TUNEL信号,显示为平均值±SEM。插入表示负控件*与对照组显著不同**与对照组和2aG4组有显著差异(P(P)<0.05; 方差分析)。缩写:方差分析;SEM,平均值标准误差;TUNEL,末端dUTP介导的缺口末端标记。
图9
图9
APR-246和2aG4联合治疗降低裸鼠乳腺癌异种移植瘤中的血管生成标记物。笔记:实验结束时,对肿瘤组织切片进行免疫染色(A)血管内皮生长因子和(B)CD31,并对信号进行定量。左,免疫染色的代表性图像。右,条形图表示量化(A)VEGF信号或(B)血管密度显示为平均值±SEM。用CD31染色法计数血管数并测定血管密度。插入表示负控件*与对照组显著不同**与对照组、2aG4组和APR-246组显著不同(P(P)<0.05; 方差分析)。缩写:方差分析;SEM,平均值标准误差;血管内皮生长因子。

类似文章

引用人

工具书类

    1. DeSantis C,Ma J,Bryan L,Jemal A.乳腺癌统计,2013年。CA癌症临床杂志。2014;64:52–62.-公共医学
    1. Garritano S、Inga A、Gemignani F、Landi S。突变型p53的更多靶点、更多途径和更多线索。肿瘤发生。2013;2:e54。-项目管理咨询公司-公共医学
    1. 癌症基因组图谱网络人类乳腺肿瘤的全面分子图谱。自然。2012;490:61–70.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Turner N、Moretti E、Siclari O等。靶向三阴性乳腺癌:p53是答案吗?《癌症治疗》2013年修订版;39:541–550.-公共医学
    1. Shapira I,Lee A,Vora R,Budman DR.三阴性乳腺癌中的p53突变上调表皮生长因子受体(EGFR)的内体再循环,增加其致癌性。Oncol Hematol评论。2013;88:284–292.-公共医学