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.2018年4月;15(4):4592-4598.
doi:10.3892/ol.2018.7885。 Epub 2018年1月26日。

烟酰胺N-甲基转移酶通过激活转化生长因子-β1的表达促进胃癌细胞上皮间质转化

附属公司

烟酰胺N-甲基转移酶通过激活转化生长因子-β1的表达促进胃癌细胞上皮间质转化

梁亮等。 Oncol Lett公司. 2018年4月.

摘要

先前的研究表明,烟酰胺N-甲基转移酶(NNMT)在许多肿瘤中异常表达。本研究表明,胃癌细胞中NNMT的基因和蛋白水平显著升高。此外,NNMT的上调显著增加了间充质标志物的表达,包括α-平滑肌肌动蛋白(SMA)、波形蛋白和纤维连接蛋白,但降低了上皮钙粘蛋白的水平,研究NNMT对BGC-823细胞TGF-β1表达的影响。结果表明,NNMT的过度表达显著诱导TGF-β1的表达。然而,敲除NNMT可抑制TGF-β1的表达,母亲可对抗十脑停搏液同源物(Smad)2和α-SMA。此外,TGF-β1预孵育部分消除了NNMT介导的EMT变化。总之,结果表明,胃癌细胞中NNMT的上调可能会增加TGF-β1的表达,从而激活TGF-α1/Smad信号,进而促进EMT。

关键词:上皮-间充质转化;胃癌;烟酰胺N-甲基转移酶;转化生长因子-β1。

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数字

图1。
图1。
胃癌细胞中NNMT的表达增加。(A) 与正常胃上皮GES-1细胞相比,MKN45、MGC-803、AGS和BGC-823细胞中NNMT mRNA水平显著升高。(B) Western blot分析表明,与正常胃上皮GES-1细胞相比,MKN45、MGC-803、AGS和BGC-823细胞中NNMT的蛋白表达水平显著增加*与GES-1细胞相比,P<0.05和**P<0.01。NNMT,烟酰胺N-甲基转移酶。
图2。
图2。
NNMT促进BGC-823细胞的EMT。(A) NNMT的过度表达导致BGC-823细胞的显著形态学改变,获得了细长的纺锤形表型(放大倍数为×40和×100)。(B) NNMT的上调显著增加了α-SMA、Vi和FN的表达,但降低了E-cad的表达水平。(C) NNMT的上调显著增加了BGC-823细胞在24小时和48小时的迁移,如使用伤口愈合测定所评估的。(D) NNMT的过度表达显著增加了BGC-823细胞的迁移和侵袭能力*与Ad-NC.NNMT、烟酰胺N-甲基转移酶相比,P<0.05、**P<0.01和***P<0.001;上皮-间充质转化;Vi,波形蛋白;纤维连接蛋白;E-cad、E-钙粘蛋白/上皮钙粘蛋白;α-SMA,α-平滑肌肌动蛋白;腺病毒;NC,控制。
图3。
图3。
NNMT增加BGC-823细胞中TGF-β1的表达水平。(A) NNMT过度表达可诱导BGC-823细胞TGF-β1、Smad2和α-SMA的表达。(B) 敲除NNMT显著抑制TGF-β1、Smad2和α-SMA的表达*与对照组相比,P<0.05和**P<0.01。NNMT,烟酰胺N-甲基转移酶;转化生长因子;Smad,母亲反对十脑麻痹同系物;α-SMA,α-平滑肌肌动蛋白;腺病毒;数控、控制;si,siRNA/小干扰RNA。
图4。
图4。
TGF-β1介导的EMT通过沉默BGC-823细胞中的NNMT而部分逆转。(A) TGF-β1显著增加Smad2和α-SMA的表达。si-NNMT治疗部分逆转了EMT标记物表达的变化,这些变化是对TGF-β1治疗的反应。(B) NNMT沉默可部分逆转TGF-β1介导的细胞形态变化(放大倍数为×40、×100和×400)*与对照组相比,P<0.05和**P<0.01。NNMT,烟酰胺N-甲基转移酶;转化生长因子;Smad,母亲反对十脑麻痹同系物;Vi,波形蛋白;纤维连接蛋白;E-cad、E-钙粘蛋白/上皮钙粘蛋白;α-SMA,α-平滑肌肌动蛋白;腺病毒;NC,控制;siRNA/小干扰RNA。

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