Chronic hyperuricemia impairs blood flow recovery in the ischemic hindlimb through suppression of endothelial progenitor cells

doi:10.18632/oncotarget.24290

.2018年1月22日；9(10):9285-9298.

doi:10.18632/目标24290。 eCollection 2018年2月6日。

慢性高尿酸血症通过抑制内皮祖细胞损害缺血后肢的血流恢复

陈一春¹, 金松国^1 2, 吴志诚^三 4 5 6, 萧亚才¹, 池佩林^7 8, 李素元（Szu Yuan Li）^1 9, 吕幸周^1 三 10, 黄柏勋^1 三 10, Jaw-Wen Chen先生^{三 10 11 12}, 林成钟^{1 三 10 11 13}

附属公司

¹国立杨明大学临床医学研究所，台北，台湾。
²台北退伍军人总医院内科内分泌代谢科，台北，台湾。
^三国立杨明大学心血管研究中心，台北，台湾。
⁴国立清华大学生物医学工程研究所，台湾新竹。
⁵国立台湾大学医院，医学院，台北，台湾。
⁶台湾新竹市国立台湾大学医院新竹分院心血管中心。
⁷台湾台北市台北市退伍军人总医院病理及检验科。
⁸国立杨明大学医学生物技术与实验室科学系和医学生物技术研究所，台湾台北。
⁹台北退伍军人总医院内科肾脏科，台北，台湾。
¹⁰台湾台北市台北市退伍军人总医院内科心脏科。
¹¹台北退伍军人总医院医学研究部，台北，台湾。
¹²国立杨明大学药理学研究所和系，台北，台湾。
¹³台北医科大学，台北，台湾。

PMID： 29507690
预防性维修识别码：项目编号5823617
内政部： 10.18632/目标24290

慢性高尿酸血症通过抑制内皮祖细胞损害缺血后肢的血流恢复

陈一春等。肿瘤靶点. 2018.

.2018年1月22日；9(10):9285-9298.

doi:10.18632/oncotarget.24290。 eCollection 2018年2月6日。

作者

陈一春¹, 金松国^1 2, 吴志诚^三 4 5 6, 萧亚才¹, 池佩林^7 8, 李素元（Szu Yuan Li）^1 9, 周若欣^1 三 10, 黄柏勋^1 三 10, Jaw-Wen Chen先生^{三 10 11 12}, 林成钟^{1 三 10 11 13}

附属公司

¹国立杨明大学临床医学研究所，台北，台湾。
²台北退伍军人总医院内科内分泌代谢科，台北，台湾。
^三国立杨明大学心血管研究中心，台北，台湾。
⁴国立清华大学生物医学工程研究所，台湾新竹。
⁵国立台湾大学医院，医学院，台湾台北。
⁶国立台湾大学医院心血管中心，新竹分院，台湾新竹。
⁷台湾台北市台北市退伍军人总医院病理及检验科。
⁸国立杨明大学医学生物技术与实验室科学系和医学生物技术研究所，台湾台北。
⁹台北退伍军人总医院内科肾脏科，台北，台湾。
¹⁰台湾台北市台北市退伍军人总医院内科心脏科。
¹¹台北退伍军人总医院医学研究部，台北，台湾。
¹²国立杨明大学药理学研究所和系，台湾台北。
¹³台北医科大学，台北，台湾。

PMID： 29507690
预防性维修识别码：项目编号5823617
内政部： 10.18632/目标24290

摘要

目标：慢性高尿酸血症与心血管疾病有关，但其对内皮祖细胞（EPC）和缺血诱导新生血管的影响尚不清楚。在此，我们研究了慢性高尿酸血症是否可以通过抑制EPC来阻止组织缺血时的血流恢复。

方法：分离人EPC并在高浓度尿酸培养基中培养以进行功能测试。检测细胞增殖、一氧化氮（NO）生成和凋亡检测。通过氧化钾治疗和/或高尿酸饮食建立慢性高尿酸血症小鼠模型，以评估慢性高尿酸对缺血诱导血流恢复的作用。药物治疗4周后，对对照组和高尿酸血症小鼠进行后肢缺血手术。每周用激光多普勒灌注成像系统对缺血手术前后的血流恢复情况进行随访。用流式细胞术（Sca-1）测定外周血循环EPC数⁺/法兰-1⁺).

结果：用高浓度尿酸培养基（10 mg/dL）培养显著抑制EPC增殖，减少NO生成，并减少Akt和eNOS的磷酸化。此外，高浓度尿酸处理EPC可增加活性氧生成，促进细胞凋亡和衰老，并抑制EPC管的形成。后肢缺血手术四周后，与对照组小鼠相比，慢性高尿酸血症小鼠显著减少了缺血后肢的组织再灌注、EPC动员和新生血管受损。

结论：慢性高尿酸血症损害组织缺血时的血流恢复和EPC动员，这些影响可能是通过抑制EPC产生的。

关键词：内皮祖细胞；高尿酸血症；缺血；新生血管。

PubMed免责声明

利益冲突声明

利益冲突作者声明他们没有利益冲突。

数字

**图1。外周血晚期内皮祖细胞的鉴定**
细胞的特征在于免疫荧光检测**（A）**Dil-AcLDL（红色），**（B）**凝集素，**（C）**CD34，**（D）**KDR、，**（E）**CD31，**（F）**CD133，**（G）**VWF（红色），**（H）**VE-卡德林，以及**（一）**电子NOS。用4'，6-二氨基-2-苯基吲哚（DAPI）对细胞进行核（蓝色）复染。比例尺：50μm。

**图2。尿酸对EPC活性、凋亡、NO生成、eNOS和Akt磷酸化的影响**
**（A）**采用MTT法分析EPC活性。比较在不同尿酸浓度（0、5、10和20 mg/dL）下培养24小时以及在高尿酸浓度下（10 mg/dL。**（B）**采用流式细胞术检测膜联蛋白V法检测EPC细胞凋亡。比较不同尿酸浓度（0、5、10 mg/dL）下EPC细胞凋亡。**（C）**sirT1和p16蛋白水平的表达。**（D）**磷酸化eNOS的表达。**（E）**和磷酸化Akt蛋白水平。**（F）**通过NO荧光指示剂（DAF-FM）染色评估NO生成。通过SNP的存在评估高水平尿酸中NO的生成。SNP：S-亚硝基-N-乙酰-D，L-青霉胺，一种NO-受体。数据为平均值±SEM；n=4；^* *P（P）*与对照组相比<0.05；^# *P（P）*与高尿酸（UA）相比，<0.05。

**图3。尿酸通过JNK途径诱导ROS和活性caspase 3，9**
在不同尿酸浓度（0、5、10 mg/dL）下，在没有或存在SNP（NO供体）、NAC（抗氧化剂）和SP（SP600125，JNK抑制剂）的情况下培养和分析细胞。**（A、B）**通过DCFH-DA染色评估EPC的ROS生成。**（C、D）**通过western blot分析评估JNK磷酸化蛋白的表达水平。**（E、F、G、H）**通过western blot分析评估活性caspase-9和caspase-3蛋白水平的表达。数据为平均值±SEM；n=4；^* *P（P）*与对照组相比<0.05；^# *P（P）*与高尿酸（10 mg/dL）相比，<0.05。

图4。在高尿酸浓度（10 mg/dL）下，在没有或存在SNP（NO供体）、NAC（抗氧化剂）和SP（SP600125，JNK抑制剂）的情况下，高浓度尿酸对EPCC细胞衰老、迁移和血管生成功能的影响
**（A）**通过衰老相关酸性-β-半乳糖苷酶活性测定分析EPC的衰老。**（B）**采用划痕损伤模型对EPC的迁移进行了分析。**（C）**用血管生成分析试剂盒分析EPC的试管形成。数据为平均值±SEM；n=6；^* *P（P）*与对照组相比<0.05；^# *P（P）*与高尿酸（10 mg/dL）相比，<0.05。

**图5。对照组和高尿酸血症小鼠后肢手术后的血液灌流和EPC动员**
**（A）**高尿酸血症模型中后肢缺血的流程图。用自动临床化学分析仪测量3组（对照组、中度和重度高尿酸血症组）小鼠血清中的尿酸水平。**（B）**根据激光多普勒成像测定，高尿酸血症小鼠的血流恢复明显受损（每组n=6）。通过激光多普勒灌注成像比率（缺血/正常后肢）对不同组随时间的灌注恢复进行定量分析。**（C）**抗CD31免疫染色显示高尿酸血症小鼠侧支血管和毛细血管形成较少。**（D）**EPC-样细胞的定量（定义为Sca-1⁺/法兰-1⁺通过流式细胞术测定后肢手术前后的细胞动员情况。**（E）**别嘌呤醇治疗重度高尿酸血症组的血清尿酸水平。**（F）**别嘌呤醇治疗的严重高尿酸血症小鼠的血流恢复得到改善。通过激光多普勒灌注成像比率（缺血/正常后肢）对不同组随时间的灌注恢复进行定量分析。**（G）**小鼠血清ROS生成，以及**（H）**分别用试剂盒测定外周血NO生成量。结果为平均值±SEM；n=6；^* *P（P）*与对照组相比<0.05；^# *P（P）*<0.05与中度高尿酸血症；^** *P（P）*与HI前相比<0.05；^{* #} *P（P）*与HI前对照组和中度高尿酸血症相比<0.05；比例尺：50μm。

**图6。概述尿酸诱导内皮祖细胞（EPC）损伤的可能机制的示意图**
尿酸通过下调Akt/eNOS/NO通路和通过JNK通路上调caspase 3和caspase 9，导致EPC功能受损。

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1. Richette P，Gout Bardin T.《柳叶刀》。2010;375:318–328.-公共医学
1. Tuttle KR、Short RA、Johnson RJ。尿酸的性别差异和冠状动脉疾病的危险因素。Am J Cardiol公司。2001年；87:1411–1414.-公共医学
1. Cannon PJ、Stason WB、Demartini FE、Sommers SC、Laragh JH。原发性高血压和肾性高血压患者的高尿酸血症。《新英格兰医学杂志》1966；275:457–464.-公共医学
1. Schretlen DJ、Inscore AB、Vannorsdall TD、Kraut M、Pearlson GD、Gordon B、Jinnah HA。正常老年人血清尿酸与脑缺血。神经病学。2007;69:1418–1423.-公共医学
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[3] Tuttle KR、Short RA、Johnson RJ。尿酸的性别差异和冠状动脉疾病的危险因素。Am J Cardiol公司。2001年；87:1411–1414.-公共医学

[4] Tuttle KR、Short RA、Johnson RJ。尿酸的性别差异和冠状动脉疾病的危险因素。Am J Cardiol公司。2001年；87:1411–1414.-公共医学

[5] Cannon PJ、Stason WB、Demartini FE、Sommers SC、Laragh JH。原发性高血压和肾性高血压患者的高尿酸血症。《新英格兰医学杂志》1966；275:457–464.-公共医学

[6] Cannon PJ、Stason WB、Demartini FE、Sommers SC、Laragh JH。原发性高血压和肾性高血压患者的高尿酸血症。《新英格兰医学杂志》1966；275:457–464.-公共医学

[7] Schretlen DJ、Inscore AB、Vannorsdall TD、Kraut M、Pearlson GD、Gordon B、Jinnah HA。正常老年人血清尿酸与脑缺血。神经病学。2007;69:1418–1423.-公共医学

[8] Schretlen DJ、Inscore AB、Vannorsdall TD、Kraut M、Pearlson GD、Gordon B、Jinnah HA。正常老年人血清尿酸与脑缺血。神经病学。2007;69:1418–1423.-公共医学

[9] Chiu CC，Chen YT，Hsu CY，Chang CC，Huang CC，Leu HB，Li SY，Kuo SC，Hung PH，Chen JW，Lin SJ。既往痛风发作史与深静脉血栓形成风险之间的关系——一项全国性人群队列研究。2016年科学报告；6:26541.-项目管理咨询公司-公共医学

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