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.2018年3月1日：24:1258-1267。
doi:10.12659/msm.907718。

肾小管上皮细胞中白蛋白超载和PINK1/Parkin信号相关的二尖瓣作用

金坛 1, 齐燮 1, 宋淑玲 1, 苗玉阳 2, 张强（Qiang Zhang） 1
附属公司

肾小管上皮细胞中白蛋白超载和PINK1/Parkin信号相关的二尖瓣作用

金坛等。 医学科学Monit. .

摘要

背景白蛋白作为一种主要的尿蛋白成分，是慢性肾脏疾病进展的危险因素。线粒体功能障碍是白蛋白诱导近端小管细胞损伤的主要原因之一。线粒体吞噬被认为是消除功能失调线粒体的关键保护机制。本研究的目的是确定白蛋白超载诱导的线粒体功能障碍是否能激活肾小管上皮细胞（TEC）中PINK1/Parkin介导的线粒体吞噬。材料与方法采用免疫荧光法和免疫印迹法检测白蛋白超载对自噬标志蛋白LC3的影响。采用透射电镜和Western blot分析研究白蛋白在线粒体损伤中的作用。蛋白质印迹法、酸性溶酶体共定位法和线粒体法检测白蛋白诱导的有丝分裂活化。最后，我们通过敲低PARK2（Parkin）水平来抑制有丝分裂，从而探讨PINK1/Parkin信号在蛋白诱导的有丝分裂中的作用。结果免疫荧光和Western blot结果显示，LC3-II的表达水平增加，白蛋白处理8h后出现最大增加点。透射电子显微镜结果表明，白蛋白超载引起线粒体损伤，自噬体数量增加。此外，白蛋白组PINK1和细胞溶质细胞色素C的表达增加，线粒体细胞色素C减少。酸性溶酶体和线粒体的共同定位表明，白蛋白超载诱导的线粒体吞噬阳性点数量增加。PARK2 siRNA的瞬时转染结果表明，敲低PARK_2的表达水平可以抑制白蛋白诱导的有丝分裂。结论总之，我们的研究表明，在白蛋白超载条件下，线粒体功能障碍激活肾小管上皮细胞的PINK1/Parkin信号和有丝分裂。

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利益冲突声明

利益冲突

没有。

数字

图1
图1
白蛋白对HK-2细胞LC3表达的影响。用8 mg/ml白蛋白处理细胞4、8、12和24小时(A、 C类)LC3-II水平的Western blot分析。进行密度测定以进行定量，并将LC3-II与GAPDH的比值表示为对照的倍数。(B、 D类)免疫荧光染色和LC3-II的定量变化（绿色）。用DAPI（蓝色）对细胞核进行反染色。（**与0小时组显著不同*P（P）<0.05). 比例尺：10μm。
图2
图2
透射电镜下HK-2细胞有丝分裂液泡的定量变化。(A、 B类)白蛋白组和对照组线粒体吞噬空泡的超微结构图像。(C、 D类)在高倍镜下可以看到典型的线粒体空泡图像。红色箭头表示有丝分裂空泡。（*与控制显著不同*P（P）<0.05）比例尺：1μm。
图3
图3
白蛋白对HK-2细胞线粒体损伤和有丝分裂的影响。用8mg/ml的白蛋白处理HK-2细胞8小时(A类)线粒体细胞色素C的Western blot分析。采用密度测定法进行定量，并将线粒体细胞色素C/COX V的比率表示为对照的倍数。(B类)细胞溶质细胞色素C的Western blot分析。采用密度测定法进行定量，并将细胞溶质的细胞色素C与GAPDH的比值表示为对照的倍数。(C类)PINK1的Western blot分析。进行密度测定以进行定量，PINK1与GAPDH的比值表示为对照的倍数。(D类)使用MitoTracker红和LysoTracker绿染色检测噬菌体，并在合并图像中显示为黄色荧光点。（*与控制显著不同*P（P）<0.05）比例尺：5μm。
图4
图4
PARK2 siRNA的作用。HK-2细胞转染PARK2-siRNA或干扰siRNA，然后暴露于8 mg/ml白蛋白(A、 B、D、E)PARK2 siRNA-转染HK-2细胞中内源性PARK_2（Parkin）表达降低。如图所示，转染后24小时，3#Parkin siRNA成功降至正常水平。(C、 F类)Western blot分析对照组、白蛋白处理组、siRNA组和siRNA+白蛋白组的PARK2（Parkin）、LC3-II或p62水平。进行密度测定以进行定量，并将PARK2（Parkin）、LC3-II或p62与GAPDH的比值表示为对照的倍数。（*与控制显著不同*P（P）<0.05；#与白蛋白组显著不同# P（P）<0.05).
图5
图5
PARK2 siRNA对有丝分裂的影响。用PARK2 siRNA转染HK-2细胞，然后以8 mg/ml的白蛋白暴露(A、 B类)通过使用MitoTracker Green和LysoTracker Red染色检测线粒体自噬，并在合并图像中显示为黄色荧光点。与对照组相比，白蛋白超载治疗组的有丝分裂定量更高。与白蛋白组相比，siRNA+白蛋白组的有丝分裂定量较低。（*与控制显著不同*P（P）<0.05；#与白蛋白组显著不同# P（P）<0.05). 比例尺：10μm。
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    1. Peterson JC、Adler S、Burkart JM等。血压控制、蛋白尿和肾脏疾病的进展。肾脏疾病研究中的饮食调整。《内科实习年鉴》，1995年；123(10):754–62.-公共医学
    1. Solini A，Grossman E.老年糖尿病患者的目标血压应该是什么？糖尿病护理。2016;39（增刊2）：S234–43。-公共医学
    1. Alicic RZ、Rooney MT、Tuttle KR。糖尿病肾病：挑战、进展和可能性。《美国肾脏病临床杂志》。2017;12(12):2032–45.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Gorriz JL，Martinez-Castelao A.蛋白尿：检测和在本地肾脏疾病进展中的作用。移植评论（奥兰多）2012；26(1):3–13.-公共医学
    1. Li D，Ding J.【蛋白尿导致慢性肾脏疾病进展的分子机制】。北京大学医学报。2010;42(5):608–11. [中文]-公共医学