跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息,确保你在联邦政府政府网站。

HTTP服务器

该站点是安全的。
这个https(https)://确保您连接到官方网站,并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2018年4月;39(4):1671-1681.
doi:10.3892/或.2018.6252。 Epub 2018年2月7日。

Yap通过SIRT1/Mfn2/有丝分裂调节胃癌生存和迁移

附属公司

Yap通过SIRT1/Mfn2/有丝分裂调节胃癌生存和迁移

红竹岩等。 及国际医学权威期刊. 2018年4月.

摘要

胃癌是世界上第五大常见癌症,Hippo-Yap是一种新的信号通路,在胃癌的发生发展中起着重要作用。然而,迄今为止,关于Yes相关蛋白(Yap)在胃癌中的具体作用,几乎没有什么见解。在本研究中,我们确定了Yap维持胃癌生存和迁移的机制。Yap在胃癌细胞中显著上调,其表达促进了细胞迁移和存活。功能研究发现,敲除Yap降低了有丝分裂活性,从而导致线粒体凋亡和细胞氧化应激。后者损害粘附蛋白的表达,减轻F-actin的表达,减缓跛足形成,导致癌细胞运动受到抑制。Yap在机制上保留了Sirtuin 1(SIRT1)的活性,该活性控制着丝裂原融合蛋白2(Mfn2)的表达和随后的有丝分裂。Yap的缺失降低了SIRT1的表达并抑制了Mfn2介导的有丝分裂。总之,我们的结果确定Hippo-Yap是胃癌中的肿瘤促进剂,通过激活SIRT1/Mfn2/有丝分裂轴介导,在涉及癌症生存和迁移的胃癌治疗中具有潜在应用。

PubMed免责声明

数字

图1。
图1。
Yap在胃癌中上调并维持有丝分裂活性。(A和B)Yap在正常胃粘膜细胞系GES-1和胃癌细胞系AGS中的表达。与正常细胞相比,胃癌中Yap上调。同时,用siRNA敲低胃癌组织中Yap的表达,进行Yap的功能丧失检测。通过western blot分析检测敲除效率。(C-G)线粒体内含有LC3II、Beclin1、p62和Atg5等吞噬标记物的表达变化。Yap缺失与有丝分裂抑制相关。同时,用有丝分裂激活剂FCCP进行有丝分裂功能丧失试验。(H) 线粒体和溶酶体的共同染色。线粒体和溶酶体重叠表明有丝分裂,橙色荧光显示。(一) MTT法检测细胞活力。(J) 胱天蛋白酶-3活性的变化。(K和L)创伤愈合试验用于检测细胞动员。24小时后,测量距离并表示为未迁移距离*与对照组相比P<0.05,#与siRNA-Yap组相比,P<0.05。Yap,Yes相关蛋白;Atg5,自噬蛋白5。
图2。
图2。
通过抑制caspase-9凋亡途径,有丝分裂与胃癌的生存能力有关。(A和B)通过TUNEL分析检测细胞死亡。计算TUNEL阳性细胞的数量。(C-G)凋亡蛋白如caspase-3、caspase-9、Bax和C-IAP1的表达变化。Yap的缺失增加了促凋亡蛋白的表达,并降低了c-IAP1,这可以通过FCCP的有丝分裂激活来逆转。(H) 细胞色素c(cyt-c)渗漏试验。(I和J)氧化心磷脂染色。NAO与非氧化性心磷脂相互作用,呈现绿色荧光。然而,心磷脂被氧化后,NAO无法与心磷脂相互作用,因此绿色荧光降低。(K和L)细胞氧化应激的变化。Yap的丢失与活性氧的过度产生有关,FCCP的有丝分裂活化减少了活性氧的爆发*与对照组相比P<0.05,#与siRNA-Yap组相比,P<0.05。Yap,Yes相关蛋白;NAO,10-N-壬基吖啶橙;活性氧。
图3。
图3。
有丝分裂调节F-actin的体内平衡和癌症的迁移。(A和B)癌细胞跛足的变化。细胞膜染料DiO用于标记细胞膜中的跛足。同时采集黑白图像并放大,观察跛足的长度。(C和D)通过Transwell分析的细胞迁移变化。(E和F)跛足足由F-actin形成。用F-actin抗体观察F-actin强度的变化。(G-I)FAK、整合素β1和Talin-1粘附蛋白mRNA的变化。(J-M)蛋白质水平上FAK、整合素β1和Talin-1的变化*与对照组相比P<0.05,#与siRNA-Yap组相比,P<0.05。是的,是相关蛋白。
图4。
图4。
Yap通过SIRT1/Mfn2途径调节有丝分裂。(A-C)SIRT1和Mfn2表达的变化。Yap降低了SIRT1的表达,从而减轻了Mfn2的含量。SRT(SRT1720)是SIRT1的激活剂,用于逆转SIRT1表达以应对Yap缺乏。SIRT1的恢复逆转了Mfn2的表达。(D) SIRT1和Mfn2的联合染色。Yap缺乏导致SIRT1缺失是Mfn2失活的原因。(E-G)SIRT1/Mfn2通路的恢复增强了线粒体自噬标记物mito-LC3II、Atg5和p62的表达*与对照组相比P<0.05,#与siRNA-Yap组相比,P<0.05。Yap,Yes相关蛋白;丝裂原融合蛋白2;SIRT1、Sirtuin 1;Atg5,自噬蛋白5。
图5。
图5。
SIRT1/Mfn2通路参与线粒体稳态。(A) 细胞ATP含量的变化。Yap缺失导致ATP缺乏,而ATP缺乏通过SIRT1激活被抑制。(B和D)线粒体膜电位的变化。(C) mPTP打开率。(E和F)细胞氧化标记物的变化。(H) 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3活性用于证明细胞活性*与对照组相比P<0.05,#与siRNA-Yap组相比,P<0.05。Yap,Yes相关蛋白;丝裂原融合蛋白2;SIRT1、Sirtuin 1。
图6。
图6。
Yap通过有丝分裂维持胃癌的迁移和生存能力。Yap激活SIRT1,SIRT1增强有丝分裂受体Mfn2的表达,强烈维持有丝分裂活性。线粒体自噬阻断胱天蛋白酶-9凋亡途径,减少细胞氧化并阻止线粒体功能。Yap/SIRT1/Mfn2的这些保护作用有助于细胞存活和迁移。Yap,Yes相关蛋白;丝裂原融合蛋白2;SIRT1,Sirtuin 1号机组

类似文章

引用人

工具书类

    1. Procaccio L、Schiripa M、Fassan M、Vecchione L、Bergamo F、Prete AA、Intini R、Manai C、Dadduzio V、Boscolo A等。胃肠道肿瘤的免疫治疗。生物识别研究国际2017;2017:4346576. doi:10.1155/2017/4346576。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Garattini SK、Basile D、Cattaneo M、Fanotto V、Ongaro E、Bonotto M、Negri FV、Berenato R、Ermacora P、Cardellino GG等。胃癌的分子分类:新见解和可能的未来应用。世界胃肠病杂志。2017;9:194–208. doi:10.4251/wjgo.v9.i5.194。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. McLean MH,El-Omar EM。胃癌遗传学。Nat Rev胃肠肝素。2014;11:664–674. doi:10.1038/nrgool.2014.143。-内政部-公共医学
    1. Lee YC、Chiang TH、Chou CK、Tu YK、Liao WC、Wu MS、Graham DY。根除幽门螺杆菌与胃癌发病率之间的关系:一项系统回顾和荟萃分析。胃肠病学。2016;150:1113–1124电子5。doi:10.1016/S0016-5085(16)33759-3。-内政部-公共医学
    1. Veitch AM,Uedo N,Yao K,East JE。优化内镜下早期上消化道癌症检测。Nat Rev胃肠肝素。2015;12:660–667. doi:10.1038/nrgool.2015.128。-内政部-公共医学

MeSH术语