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.2018年6月;163(6):1469-1478.
doi:10.1007/s00705-018-3746-5。 Epub 2018年2月12日。

马动脉炎病毒抗原捕获ELISA检测方法的建立

附属机构

马动脉炎病毒抗原捕获ELISA检测方法的建立

婷琪等。 Arch Virol公司. 2018年6月.

摘要

病毒粒子的定量是病毒学研究的重要指标之一。为了建立一种灵敏、快速的马动脉炎病毒(EAV)定量检测方法,利用本研究制备的两种EAV核蛋白单克隆抗体2B9和2B3,建立了抗原捕获酶联免疫吸附试验(AC-ELISA)。条件优化后,以单抗2B9为捕获抗体,HRP标记的2B3为检测抗体。以比塞洛斯EAV株病毒颗粒作为参考标准时,AC-ELISA具有良好的标准曲线。比塞洛斯EAV株的检测限为36 PFU,该方法在72-2297 PFU之间具有良好的线性关系。AC-ELISA能够特异性检测比塞洛斯EAV株,并且与其他马用病毒无交叉反应。AC-ELISA的灵敏度远高于western blotting法,但低于实时PCR法。然而,作为一种定量抗原检测方法,AC-ELISA的灵敏度大约是western印迹法的300倍。此外,AC-ELISA试验可成功用于体外感染试验(如EAV的一步生长曲线)和转染试验(如从EAV的感染性cDNA克隆中拯救病毒)中病毒含量的量化。这些结果表明,本研究建立的AC-ELISA是一种很好的EAV抗原检测替代方法,是一种简单、方便、定量检测EAV抗原的方法。

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引用人

  • 冠状病毒检测方法的现状与展望。
    卜J,邓Z,刘H,李J,王D,杨Y,钟S。 Bu J等人。 塔兰塔。2021年4月1日;225:121977. doi:10.1016/j.talanta.2020.121977。Epub 2020年12月31日。 塔兰塔。2021 采购管理信息:33592725 免费PMC文章。 审查。

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