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.2018年2月8日;8(1):2619.
doi:10.1038/s41598-018-20938-5。

溃疡性结肠炎和家族性腺瘤性息肉病患者的回肠袋表现出自噬标记物的调节

附属公司

溃疡性结肠炎和家族性腺瘤性息肉病患者的回肠袋表现出自噬标记物的调节

尼尔塞·玛丽亚·佩娃等。 科学代表. .

摘要

对于临床治疗难以治愈的溃疡性结肠炎(UC)患者,全结肠切除术伴回肠袋-肛门吻合术(IPAA)是首选手术。胆囊炎是该手术后最常见的并发症之一。炎症性肠病中有自噬缺陷的报道。然而,目前还没有关于IP的研究。因此,我们研究了UC和FAP患者IP粘膜中的自噬标记物,并将其与正常回肠远端的对照组进行了比较。对16例IP呈“J”形、无症状和内镜下IP正常的患者进行了评估。对照组由8名结肠镜检查正常的患者组成。FAP组ATG5、MAP1LC3A和BAX的转录水平显著降低。与对照组相比,UC和FAP中Beclin-1的蛋白质水平也有所下降。尽管UC组的免疫印迹LC3II水平较高,但与对照组相比,UC和FAP的免疫荧光分析中LC3/p62共定位较低。通过免疫印迹证实这些结果,UC组的p62增加。这些发现表明IP中的宏自噬标记物发生了调节,这可能解释了粘膜炎症倾向。

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作者声明没有相互竞争的利益。

数字

图1
图1
对具有代表性的家族性腺瘤性息肉病(FAP)和溃疡性结肠炎(UC)患者的回肠袋粘膜活检进行血红素和曙红(H&E)染色。(A类)回肠袋粘膜为正常对照组(CTR组)。(B类)FAP患者回肠袋粘膜(FAP组)。(C类)UC患者回肠袋粘膜(UC组)。(D类)多形核白细胞数固有层在CTR、FAP和UC组中。各组间无统计学差异。核反染:迈耶苏木精。原始放大倍数X20。
图2
图2
家族性腺瘤性息肉病(FAP)和溃疡性结肠炎(UC)患者回肠袋粘膜自噬和凋亡相关基因表达的评估。转录分析显示FAP患者回肠袋粘膜中的自噬标记物调控。mRNA水平(qRT-PCR)ULK1系列(A类),BECN1公司(B类),ATG16L1型(C类),自动液位计5(D类),地图1LC3A(E类),行李(F类)和BCL2级(G公司)对照组(CTR组)、FAP组(FAP组)和UC组(UC组)的回肠袋粘膜。对于FAP,n = 8; 对于UC,n = 8; 对于CTR,n = 8; *第页 < 0.05,**p < 0.01和***p < 0.001.
图3
图3
家族性腺瘤性息肉病(FAP)和溃疡性结肠炎(UC)患者回肠袋传入肢体粘膜自噬基因表达的评估。转录分析显示与对照组相比没有差异。mRNA水平(qRT-PCR)ULK1系列(A类),BECN1公司(B类),ATG16L1型(C类),自动液位计5(D类)、和地图1LC3A(E类)对照组(CTR组)、FAP组(FAP-AF组)和UC组(UC-AF组)的回肠袋传入肢体粘膜。对于FAP-AF,n = 8; 对于UC-AF,n = 8; 对于CTR,n = 8; *第页 < 0.05,**p < 0.01和***p < 0.001.
图4
图4
家族性腺瘤性息肉病(FAP)和溃疡性结肠炎(UC)患者的回肠袋粘膜显示自噬蛋白标记物调节。Beclin-1的Western blot分析(A类),LC3(B类),第62页(C类)和HSC-70(D类)与对照组(CTR组)相比,在FAP和UC患者的回肠袋(FAP和UC组)及其传入肢体粘膜(FAP-AF和UC-AF组)中。每个带代表一名患者。对于FAP,n = 8; 对于UC,n = 8; 对于CTR,n = 8; 对于FAP-AF,n = 8; 对于UC-AF,n = 8; *第页 < 0.05,**p < 0.01和***p < 0.001. ASU:任意扫描单元。
图5
图5
家族性腺瘤性息肉病(FAP)和溃疡性结肠炎(UC)患者回肠袋粘膜LC3和p62共同定位的免疫荧光染色。(A类)在FAP、UC和对照组(CTR)中共定位的LC3和p62的免疫荧光染色的定量分析。(B类)CTR组、FAP组和UC组固定石蜡包埋回肠粘膜的代表性染色显示,FAP组、UC组的阳性细胞数量低于CTR组。阳性细胞显示为橙色(由PI和FITC共同标记;重叠图像)或相同胞浆中的红色和绿色(由Alexa Fluor®488和Cy3®共同标记)。细胞核用DAPI(蓝色荧光)染色。箭头显示阳性细胞。使用40倍物镜获得图像。对于FAP,n = 8; 对于UC,n = 8; 对于CTR,n = 8; *第页 < 0.05,**p < 0.01和***p < 0.001.

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