跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

点政府

政府意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息,确保你在联邦政府政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https(https)://确保您连接到官方网站,并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2018年2月7日;9(2):172.
doi:10.1038/s41419-017-0229-7。

bFGF通过抑制大鼠短暂性全脑缺血后过度自噬和凋亡发挥神经保护作用

附属公司

bFGF通过抑制大鼠短暂性全脑缺血后过度自噬和凋亡发挥神经保护作用

孙大伟等。 细胞死亡病. .

摘要

短暂性全脑缺血(tGCI)是一种脑血管疾病,可导致凋亡性神经元损伤和功能缺陷。据报道,碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在中枢神经系统(CNS)中高度表达,并对不同的CNS疾病发挥神经保护作用。然而,bFGF对tGCI的影响尚未深入研究。本研究旨在研究bFGF在tGCI动物模型中的作用及其潜在机制。侧脑室(i.c.v.)注射bFGF后,观察到功能改善,缺血易受影响的海马CA1区的存活神经元数量增加。tGCI后可诱导细胞凋亡,bFGF可通过抑制p53线粒体易位而减轻细胞凋亡。此外,自噬在这一过程中被激活,bFGF可以通过mTOR途径抑制自噬的激活。雷帕霉素是一种自噬激活剂,用于探讨bFGF、凋亡和自噬之间的关系。雷帕霉素治疗后细胞凋亡恶化,提示过度自噬可能参与了细胞凋亡过程。总之,这些结果表明,bFGF可以通过mTOR途径抑制过度自噬,并通过防止p53线粒体易位抑制细胞凋亡,从而在海马CA1区发挥神经保护作用。此外,我们的结果表明,bFGF可能是治疗tGCI的一种很有前景的治疗剂,以应对主要不良事件,包括心跳骤停、休克、体外循环、创伤性出血和窒息。

PubMed免责声明

利益冲突声明

提交人声明他们没有利益冲突。

数字

图1
图1。tGCI后自噬和细胞凋亡的时间变化。
凋亡相关蛋白的免疫印迹裂解Caspase-3和Bcl-2。使用海马的总细胞裂解物,并使用β-肌动蛋白作为内部对照。b条p53、Bax和细胞色素的免疫印迹c(c)在细胞溶质和线粒体部分。GAPDH被用作细胞溶质蛋白的负载控制,COX IV被用作线粒体蛋白的加载控制。c(c)自噬相关蛋白LC3B和Beclin-1的免疫印迹。使用海马的总细胞裂解物。d日——k个密度分析(平均值±扫描电镜,n个 = 每组3只动物)的蛋白质(b条c(c))归一化为相应的加载控制。*P(P) < 0.05与假手术 + 车辆,**P(P) < 0.01与假手术 + 车辆,***P(P) < 0.001与假手术 + 车辆
图2
图2。在全脑I/R后,bFGF治疗在海马CA1区产生了显著的神经保护作用。
海马CA1区TUNEL染色的代表性图像24I/R后h。b条整个海马和CA1区的代表性甲酚紫染色72I/R后h,海马体中的白色方框表示CA1区的详细区域。图片中的插图是箭头所示区域的放大神经元。c(c)——d日定量数据(平均值±扫描电镜,n个 = 每组5–6只动物)的TUNEL阳性细胞和每200μm长度的内侧CA1区的活神经元。***P(P) < 0.001与假手术 + 车辆,#P(P) < 0.05与I/R + 车辆
图3
图3。bFGF治疗后通过抑制p53易位降低细胞凋亡。
从海马组织总细胞裂解液中分离的Caspase-3、Bcl-2和bFGF的免疫印迹24I/R.β-actin用作内部对照。b条采集的样本细胞溶质和线粒体部分中p53、Puma和Bax的免疫印迹24I/R后h,β-肌动蛋白用作胞浆蛋白的负载对照,COX IV用作线粒体蛋白的负载对照。c(c)——小时密度分析(平均值±扫描电镜,n个 = 每组3只动物)的蛋白质(b条)根据各自的负载控制标准化。**P(P) < 0.01与假手术 + 车辆;#P(P) < 0.05时,##P(P) < 0.01与I/R + 车辆组;$P(P) < 0.05时,$$P(P) < 0.01与I/R + 碱性成纤维细胞生长因子 + 雷帕霉素组
图4
图4
行为测试的研究设计和时间表。b条恐惧条件反射协议的示意图
图5
图5。bFGF处理对旷野和恐惧条件反射测试中表现的影响。
——c(c)野外测试的统计结果。手术后2天进行旷野测试,以评估自发运动活动(例如总距离、交叉线数)和探索活动(例如饲养)。数据表示为平均值±扫描电镜(n个 = 每组12只动物)。d日大鼠接受情境恐惧条件反射(手术后3天)的时间冻结百分比,反映了海马依赖性记忆。数据表示为平均值±扫描电镜(n个 = 每组12只动物)。***P(P) < 0.001与假手术 + 车辆。#P(P) < 0.05与I/R + 车辆。e(电子)接受线索恐惧条件反射(手术后3天)的大鼠的冻结时间百分比。第一个120s被用作与后者360进行比较的基线听觉线索刺激下的s;这反映了海马非依赖性记忆。数据以平均值表示±扫描电镜(n个 = 每组12只动物)。***P(P) < 0.001与假手术 + 车辆。#P(P) < 0.05与I/R
图6
图6。bFGF在全脑I/R后的神经保护作用是通过mTOR通路抑制过度自噬。
以β-actin作为负荷对照,评估LC3、p62、Beclin-1、mTOR和p-mTOR的免疫印迹。b至e密度分析(平均值±扫描电镜,n = 每组3只动物),将来自(A)的蛋白质归一化为相应的负荷控制。(f)内侧CA1区24 LC3(绿色)和DAPI(蓝色)双重染色的代表性免疫荧光图像I/R后h。每个细胞LC3B点的定量分析。每种情况包括30多个细胞。数据表示为平均值±扫描电镜。***P(P) < 0.001与假手术 + 车辆;#P(P) < 0.05时,##P(P) < 0.01,###P(P) < 0.001与I/R + 车辆组;$P(P) < 0.05时,$$P(P) < 0.01,$$$P(P) < 0.001与I/R + 碱性成纤维细胞生长因子 + 雷帕霉素组
图7
图7。bFGF抑制了p53向线粒体的移位。
海马CA1区DAPI(蓝色)、p53(绿色)和COX IV(红色)染色的典型共焦图像。COX IV用作线粒体标记物,细胞核用DAPI进行复染。在合并的显微照片中,黄色斑点表示p53和线粒体的共同定位。b条Manders重叠系数表示p53和COX IV共同定位的量化。从每组中随机选择至少10个细胞。***P(P) < 0.001与假手术 + 车辆;##P(P) < 0.01与I/R + 车辆组

类似文章

引用人

工具书类

    1. Ham P.B.和Raju R.缺氧缺血性损伤中的线粒体功能和衰老的影响。掠夺。《神经生物学》第157、92–116页(2017年)。-项目管理咨询公司-公共医学
    1. 写作组M等,《心脏病和中风统计数据——2016年更新:美国心脏协会的报告》。循环。2016;133:e38–e360。doi:10.1161/CIR.0000000000350。-内政部-公共医学
    1. Petito CK,Feldmann E,Pulsinelli WA,Plum F.心脏呼吸暂停后人类海马的延迟损伤。神经病学。1987;37:1281–1286. doi:10.1212/WNL.37.8.1281。-内政部-公共医学
    1. Sun HS等。海马TRPM7蛋白的抑制可防止脑缺血中迟发性神经元死亡。自然神经科学。2009;12:1300–1307. doi:10.1038/nn.2395。-内政部-公共医学
    1. Zechel S、Werner S、Unsicker K、von Bohlen和Halbach O。海马结构中成纤维细胞生长因子2(FGF-2)的表达和功能。神经科学。2010;16:357–373. doi:10.1177/1073858410371513。-内政部-公共医学

出版物类型

MeSH术语