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.2018年4月;17(4):5088-5094.
doi:10.3892/mmr.2018.8493。 Epub 2018年1月25日。

黄芩素通过NF-κB信号通路诱导宫颈癌细胞凋亡

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黄芩素通过NF-κB信号通路诱导宫颈癌细胞凋亡

余晓岚等。 分子医学代表. 2018年4月.

摘要

探讨黄芩素诱导人宫颈癌C33A细胞凋亡的机制。黄芩素(200µM)用于治疗C33A细胞。MTT法检测细胞增殖。通过TUNEL分析和caspase‑3活性测定检测细胞凋亡。细胞周期由流式细胞术和相关基因在mRNA和蛋白质水平上的表达测定。核因子(NF)‑κB活性通过荧光素酶分析和western blotting进行评估。黄芩素通过激活胱天蛋白酶-3活性抑制宫颈癌细胞C33A增殖并诱导细胞凋亡。黄芩素通过调节相关基因的表达,阻断G0/G1期细胞周期。黄芩素通过抑制核转位抑制NF‑κB活性。黄芩素通过抑制NF‑κB信号通路抑制C33A增殖并促进细胞凋亡。综上所述,黄芩素通过影响NF-κB活性,抑制宫颈癌细胞增殖,促进细胞凋亡。

关键词:宫颈癌;黄芩素;核因子-κB;细胞周期;细胞凋亡。

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数字

图1。
图1。
黄芩素抑制C33A细胞增殖并诱导细胞凋亡。(A) 集成电路50C33A上的黄芩素。(B) MTT法检测C33A细胞活性。(C) 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3活性通过荧光素酶分析测试。(D) 用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)dUTP缺口标记法评估C33A细胞凋亡。(E) 蛋白质印迹法检测细胞凋亡相关蛋白的表达*与对照组相比,P<0.05。
图2。
图2。
黄芩素阻断C33A细胞周期。(A) 流式细胞术测定C33A细胞周期。(B) 通过蛋白质印迹检测的细胞周期相关蛋白表达。(C) 通过逆转录定量聚合酶链反应检测细胞周期mRNA水平*与对照组相比,P<0.05。Bim,Bcl-2样蛋白11;p-,磷酸化。
图3。
图3。
黄芩素影响C33A中NF-κB信号通路的活性。(A) RT-qPCR检测NF-κB信号通路相关基因表达。(B) RT-qPCR检测宫颈癌相关基因表达。(C) 通过荧光素酶分析评估NF-κB活性。(D) western blotting检测NF-κB核转位*与对照组相比,P<0.05。核因子κB;RT-qPCR、逆转录定量聚合酶链反应;肿瘤坏死因子;干扰素γ;Bcl2a1a,B细胞白血病/淋巴瘤2相关蛋白A1a;类Cfs1蛋白;Birc3,杆状病毒IAP重复序列包含3;COX2,细胞色素c(c)氧化酶2;IL-8、IL-8;FLIP,类FLICE抑制蛋白;XIAP,X连锁凋亡蛋白抑制剂。
图4。
图4。
核因子κB信号通路介导黄芩素诱导C33A凋亡。(A) 蛋白印迹和免疫荧光检测P65磷酸化。(B) MTT法检测细胞活力。(C) 流式细胞术检测细胞凋亡。异硫氰酸荧光素。

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