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.2017年12月;14(6):7207-7210.
doi:10.3892/ol.2017.7172。 Epub 2017年10月11日。

miR-10b调控鼻咽癌细胞上皮-间质转化、侵袭和迁移的机制研究

附属公司

miR-10b调控鼻咽癌细胞上皮-间质转化、侵袭和迁移的机制研究

王伟一(Weiyi Wang). Oncol Lett公司. 2017年12月.

摘要

本研究的目的是研究miR-10b对上皮-间充质转化(EMT)的调节机制及其对鼻咽癌细胞增殖和迁移的影响。采用RT-qPCR方法检测miR-10b在CNE1鼻咽癌细胞系中的表达。用NP69鼻咽粘膜细胞系检测慢病毒感染后miR-10b的表达。使用细胞计数试剂盒-8检测miR-10b对NP69增殖的影响。用划痕法检测miR-10b对NP69迁移的影响。Western blot分析检测miR-10b对上皮细胞标记物E-cadherin和β-catenin以及间充质细胞标记物纤维连接蛋白、N-cadherin、波形蛋白和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。本研究表明,miR-10b在CNE1细胞中高度表达。miR-10b的稳定表达促进NP69细胞的增殖和迁移,下调上皮细胞标记物E-cadherin和β-catenin的表达,上调间充质细胞标记物纤维连接蛋白、N-cadherin、波形蛋白和MMP-9的表达,导致细胞EMT。总之,miR-10b促进鼻咽癌细胞的增殖和迁移,诱导鼻咽癌的EMT,从而有可能成为鼻咽癌治疗的新靶点。

关键词:上皮-间充质转化;入侵;miR-10b;迁移;鼻咽癌。

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数字

图1。
图1。
miR-10b在细胞中的表达水平。通过RT-qPCR测定miR-10b在CNE1和NP69细胞中的表达水平*P<0.01。
图2。
图2。
慢病毒感染NP69细胞后miR-10b的表达水平。用RT-qPCR检测慢病毒感染NP69细胞后第1、2、3、4、5和6天miR-10b的表达水平。空白pLP-VSVG为无病毒对照*P<0.01。
图3。
图3。
慢病毒感染后NP69细胞的增殖。慢病毒感染后第1、2、3、4和5天用CCK-8法检测NP69细胞的增殖情况。NP69细胞感染miR-10b慢病毒,空白pLP-VSVG为无病毒对照*P<0.05**P<0.01;CCK-8,细胞计数套件-8。
图4。
图4。
感染miR-10b慢病毒的NP69细胞划痕试验。在NP69细胞感染慢病毒后的第1天、第2天和第3天,用细胞划痕法检测miR-10b对细胞迁移能力的影响。(A) 用慢病毒-miR-10b感染的NP69细胞,(B)用空白慢病毒感染的NP69细胞,和(C)非病毒感染的CNE1细胞。
图5。
图5。
上皮细胞和基质细胞标记物的表达水平。western blot分析检测上皮细胞和基质细胞标记物的表达水平,CNE1细胞作为对照。

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引用人

工具书类

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