跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https（https）：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2017年10月16日；7（2）：e1382790。
doi:10.1080/2162402X.2017.1382790。 2018年eCollection。

胶质瘤诱导的小胶质细胞hMOF组蛋白H4赖氨酸16乙酰转移酶SIRT1依赖性激活促进肿瘤支持表型

达勒·赛迪 1 2, 马蒂尔德·切瑞 1 2, 艾哈迈德·奥斯曼 三 4, 瓦西里斯·斯特拉图利亚斯 1 2, 奥尔勒·林德伯格 1 2, 沈贤丽（Xianli Shen） 2, 布劳姆格林 三 4, 伯特兰·约瑟夫 1 2
附属公司

胶质瘤诱导的小胶质细胞hMOF组蛋白H4赖氨酸16乙酰转移酶SIRT1依赖性激活促进肿瘤支持表型

达勒·赛迪等。 肿瘤免疫学. .

摘要

高级别胶质瘤是恶性侵袭性原发性脑肿瘤，治疗选择有限，患者预后不佳。小胶质细胞是大脑的常驻免疫细胞，它被胶质瘤细胞招募并重新编程为肿瘤支持细胞，进而积极影响肿瘤的扩展和向周围脑组织的浸润。在这里，我们报告了胶质瘤诱导的小胶质细胞转化与小胶质细胞组蛋白H4赖氨酸16（H4K16）乙酰化水平的增加有关，这是通过去乙酰化酶SIRT1的核定位增加，这反过来导致H4K16乙酰转移酶hMOF脱乙酰化，并招募到小胶质细胞靶基因启动子区的染色质。此外，我们证明，利用SIRT1和hMOF固有的H4K16脱乙酰酶或乙酰转移酶活性，操纵小胶质细胞的H4K16乙酰化水平，调节小胶质细胞支持肿瘤的功能。本研究提供了证据，组蛋白的翻译后修饰和控制组蛋白的组蛋白修饰酶，如hMOF和SIRT1调节的H4K16乙酰化，是胶质瘤细胞启动的小胶质原癌激活途径的一部分，并代表了潜在的新治疗靶点。

关键词：H4K16乙酰化；SIRT1；胶质瘤；hMOF（MYST1/KAT8）；小胶质细胞。

PubMed免责声明

数字

图1。
图1。
胶质瘤诱导的小胶质瘤支持表型与H4K16乙酰化增加相关。（A） qPCR分析Il1β、Il6、Mmp14、Ccl22、Chil3和2个单个培养或与C6胶质瘤细胞分离共培养的BV2小胶质细胞中的mRNA表达（关键）；结果显示为相对于每个单培养的结果，设为1。（B） BV2小胶质细胞单细胞培养4h或与C6胶质瘤细胞分离共培养4h后，MMP14和β-actin（右缘，分子量，千道尔顿（kDa））的免疫印迹分析及定量（C）；结果是相对于BV2小胶质细胞单培养的结果，设为1。（D） 用BV2小胶质细胞或C6共同培养的BV2微胶质细胞定量研究C6胶质瘤细胞在Transwells中的迁移；结果显示为相对于C6细胞的结果，设置为1。（E和F）BV2小胶质细胞对照组（0 h）中H4K16ac和β-actin（右边缘，分子大小，单位为千道尔顿（kDa））（E）的免疫印迹分析，或培养2 h、4 h或6 h作为单细胞培养，或与C6胶质瘤细胞作为分离共培养；结果与BV2小胶质细胞对照组（0h）的结果相对照，设为1。（G） BV2小胶质细胞单独培养4h或与C6胶质瘤细胞分离共培养4h的共聚焦显微镜下，对H4K16ac和Hoechst细胞核进行免疫染色。比例尺，10μm。ns，无显著性，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001和***P<0.001（双尾Student t检验）。数据来自三个独立的实验（A到D）或五个独立的试验（E和F）（平均值和标准差）。
图2。
图2。
在小鼠胶质母细胞瘤肿瘤模型的小胶质细胞中观察到H4K16乙酰化表达水平升高。（A和B）注射GFP-GL261细胞1周后在小鼠大脑中形成的肿瘤的共聚焦显微镜，H4K16ac和Iba1（小胶质细胞标记物，以白色表示）的免疫染色和Hoechst核复染。比例尺，20µm（A），10µm（B）。在距肿瘤边界2 mm处拍摄肿瘤部位外所示小胶质细胞的照片。在所描绘的图像中，一些小胶质细胞用黄色箭头指向。数据代表了对三只小鼠进行的一项独立实验。（C） 如A.***P<0.001（双尾Student t检验）所示，注射细胞后1周，肿瘤部位或与肿瘤部位不同的小胶质细胞H4K16ac信号强度的量化。数据来自每只小鼠100多个小胶质细胞。每个点代表一只小鼠小胶质细胞的平均值，线条表示每组的中值。
图3。
图3。
胶质瘤共培养后观察到小胶质细胞SIRT1的核重定位。（A至D）BV2小胶质细胞对照组（0 h）中SIRT1（A）或hMOF（C）和β-actin（A和C）的免疫印迹分析，定量（B和D），或培养2 h、4 h或6 h作为单培养或与C6胶质瘤细胞作为分离共培养；结果是相对于BV2小胶质细胞对照组（0h）的结果，设为1。（E） BV2小胶质细胞亚细胞组分中SIRT1、肌动蛋白和层粘连蛋白β1裂解物的免疫印迹分析，作为单细胞培养物或与C6细胞作为分离共培养物生长4h。（F） e亚细胞组分中SIRT1的定量分析；结果是相对于BV2单培养的结果，设为1。（G） BV2小胶质细胞作为单细胞培养物或与C6细胞作为分离共培养物生长4h的共聚焦显微镜，对SIRT1和Hoechst细胞核进行免疫染色。最后一行描述的图片是合并的共焦图像的更高放大率。比例尺，20µm*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001（双尾学生t检验）。数据来自三个独立的实验（A、B、C、D和G）或四个独立的试验（E和F）（平均值和标准差）。
图4。
图4。
在小鼠胶质母细胞瘤肿瘤模型的小胶质细胞中观察到SIRT1表达增加。（A和B）注射GFP-GL261细胞1周后小鼠脑内形成的肿瘤的共焦显微镜，对SIRT1和Iba1（小胶质细胞标记物，用白色表示）进行免疫染色，并对Hoechst核进行复染。比例尺，20微米（A），10微米（B）。在距离肿瘤边界6 mm处拍摄肿瘤部位外所示小胶质细胞的照片。在所描绘的图像中，一些小胶质细胞用黄色箭头指向。数据代表了对三只小鼠进行的一项独立实验。
图5。
图5。
SIRT1与hMOF相互作用并使其脱乙酰。（A） 在与SIRT1或免疫球蛋白G（IgG；对照）的抗体免疫沉淀后，对以单培养方式培养4小时或以分离共培养方式培养C6神经胶质瘤细胞的BV2小胶质细胞中SIRT1和hMOF的免疫印迹分析进行评估。IgG带用星号表示，而感兴趣的蛋白质用箭头表示。（B）现场用SIRT1-hMOF相互作用的定量（C）对BV2小胶质细胞作为单细胞培养物或与C6细胞作为分离共培养物生长4h的邻近连接分析（PLA）；结果是相对于设置为1的BV2单一栽培的结果来呈现的。（D） 用乙酰赖氨酸抗体（acK）或免疫球蛋白G（IgG；对照）免疫沉淀后评估BV2小胶质细胞单培养4h或与C6胶质瘤细胞分离共培养4h的hMOF免疫印迹分析。（E）现场以单细胞培养或与C6细胞分离共培养培养4h的BV2小胶质细胞中acK-hMOF相互作用定量（F）的邻近连接分析（PLA）；结果是相对于设置为1的BV2单一栽培的结果来呈现的**P<0.01和***P<0.001（双尾学生t检验）。数据来自三个独立的实验（平均值和标准差）。
图6。
图6。
H4K16 HAT hMOF被招募到小胶质细胞上调基因。BV2小胶质细胞作为单细胞培养物或与C6胶质瘤细胞作为分离共培养物培养4h，并与hMOF（A、C、E、G和I）或H4K16ac（B、D、F、h和J）抗体免疫沉淀。基因转录起始位点下游1kb区域的hMOF和H4K16ac-ChIP信号Il1β、Il6、Mmp14、Ccl22和智利3使用qPCR进行分析，并将其归一化为输入DNA的水平。作为单一培养物生长的BV2小胶质细胞作为对照，设置为1*P<0.05和**P<0.01（双尾学生t检验）。数据来自三个(第22号合同和智利3)或五个(Il1β，Il6和百万像素14）独立实验（平均值和标准差）。
图7。
图7。
H4K16ac状态的调节对小胶质瘤支持表型的影响。（A和C）用EX527（SIRT1活性抑制剂）或SRT1720（SIRTI活性激活剂）作为单细胞培养物或C6胶质瘤细胞作为分离共培养物培养4h后预处理的BV2小胶质细胞中H4K16ac和H3的免疫印迹分析。（B和D）用EX527或SRT1720预处理的BV2小胶质细胞在Transwells中定量C6胶质瘤细胞的迁移；结果是相对于暴露于BV2小胶质细胞对照（ctrl）的C6细胞的结果，设定为1。（E和G）BV2小胶质细胞中H4K16ac和H3以及SIRT1（E）和hMOF（G。（F和H）定量转染siRNA SIRT1、siRNA hMOF或siRNA Ctrl的BV2小胶质细胞在Transwells中C6胶质瘤细胞的迁移；结果是相对于暴露于用siRNACtrl转染的BV2小胶质细胞的C6细胞的结果，设定为1*P<0.05、**P<0.01、***P<0.001和***P<0.0001（双尾学生t检验）。数据来自三个独立的实验（D和G）和六个独立的试验（B和F）（平均值和标准差）。
图8。
图8。
建议的途径。示意图显示，在小胶质细胞接触胶质瘤细胞后，SIRT1可以重新定位到与hMOF相互作用并脱乙酰化的细胞核，从而促进H4K16组蛋白乙酰转移酶在胶质瘤诱导的小胶质细胞调节基因启动子区域的染色质募集。
请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

查看所有类似文章

引用人

查看所有“被引用”文章

工具书类

    1. Batchelor T.患者信息：成人高密度胶质瘤（基础知识之外）最新进展：Wolters Kluwer；2015;https://www.uptodate.com/contents/high-grade-glioma-inadults-beyond-the-。。。
    1. Hambardzumyan D，Gutmann DH，Kettenmann H。小胶质细胞和巨噬细胞在胶质瘤维持和进展中的作用。自然神经科学。2015;19:20-27. doi:10.1038/nn.4185。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Markovic DS、Vinnakota K、Chirasani S、Synowitz M、Raguet H、Stock K、Sliwa M、Lehmann S、Kälin R、van Rooijen N等。胶质瘤诱导和利用小胶质细胞MT1-MMP表达促进肿瘤扩大。美国国家科学院院刊2009；106:12530-35. doi:10.1073/pnas.0804273106。PMID:19617536。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Muller A、Brandenburg S、Turkowski K、Muller S、Vajkoczy P。常驻小胶质细胞而非外周巨噬细胞是脑肿瘤单核细胞的主要来源。国际癌症杂志。2015; 137:278-88. doi:10.1002/ijc.29379。PMID:25477239。-内政部-公共医学
    1. Saijo K，Glass CK。健康和疾病中的小胶质细胞起源和表型。Nat Rev免疫学。2011;11:775-87。doi:10.1038/nri3086。PMID:22025055。-内政部-公共医学

出版物类型