Ginsenoside Rg1 inhibits inflammatory responses via modulation of the nuclear factor‑κB pathway and inhibition of inflammasome activation in alcoholic hepatitis

doi:10.3892/ijmm.2017.3297

.2018年2月；41(2):899-907.

doi:10.3892/ijmm.2017.3297。 Epub 2017年11月29日。

人参皂苷Rg1通过调节核因子‑κB通路和抑制炎症小体激活抑制酒精性肝炎的炎症反应

李佳军¹, 程阳¹, 舒张（Shu Zhang）², 舒柳（Shu Liu）¹, 赵罗乐¹, 欢洛¹, 陈亚堂¹, 黄文祥¹

附属公司

PMID： 29207044
预防性维修识别码：项目编号：5752168
内政部： 10.3892/ijmm.2017.3297

人参皂苷Rg1通过调节核因子-κB通路和抑制酒精性肝炎炎症小体激活抑制炎症反应

李佳军等。国际分子医学杂志. 2018年2月.

.2018年2月；41(2):899-907.

doi:10.3892/ijmm.2017.3297。 Epub 2017年11月29日。

作者

李佳军¹, 程阳¹, 舒张（Shu Zhang）², 舒柳（Shu Liu）¹, 赵罗乐¹, 环罗¹, 陈亚堂¹, 黄文祥¹

附属公司

¹重庆医科大学第一附属医院感染科，重庆400016。
²重庆医科大学第一附属医院肝胆外科，重庆400016。

PMID： 29207044
预防性维修识别码：项目编号：5752168
内政部： 10.3892/ijmm.2017.3297

摘要

人参皂苷Rg1（G‑Rg1）是人参的活性成分，此前有报道称其可减轻酒精诱导的肝损伤；然而，其潜在机制在很大程度上仍不清楚。本研究旨在研究G‑Rg1对体外酒精诱导的细胞损伤和体内酒精性肝炎大鼠模型的保护作用。对于体外模型，在存在或不存在G‑Rg1的情况下，用乙醇培养L‑O2细胞。对于体内模型，大鼠通过胃内注射乙醇，并以G‑Rg1或地塞米松作为对照。结果表明，血清生化指标包括丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶和总胆红素，以及核因子（NF）‑κB途径相关炎性细胞因子白细胞介素（IL）‑6、肿瘤坏死因子‑α和IL‑1β的表达，酒精升高；然而，G‑Rg1处理显著降低了它们。此外，G‑Rg1治疗可降低NF‑κB通路的激活。G‑Rg1还通过抑制细胞色素P450 2E1的表达和活性氧的产生，以及促进谷胱甘肽过氧化物酶的表达，降低氧化应激。此外，G‑Rg1抑制caspase‑3和‑8的表达水平，这可能与减少肝细胞凋亡有关。这些数据表明，G‑Rg1可能通过防止过度炎症和肝细胞凋亡，保护肝细胞免受酒精诱导的损伤。

PubMed免责声明

数字

图1
G-Rg1修复乙醇诱导的肝细胞超微结构损伤。将L-O2细胞暴露于40%乙醇中，并用0、0.5、1.0和1.5 mg/ml G-Rg1处理；电镜观察超微结构。正常对照组由未经处理的细胞组成。比例尺，2µm。给出了三个独立实验的代表性数据。G-Rg1，人参皂苷Rg1。

图2
G-Rg1降低乙醇诱导的生化参数升高。（A） L-O2细胞在含有乙醇的培养基中培养，并用G-Rg1处理。培养48小时后，使用测定试剂盒测量上清液中的AST和ALT。（B和C）大鼠灌胃乙醇12周建立酒精性肝损伤模型，并用G-Rg1或DEX治疗。治疗后，处死大鼠。（B）通过苏木精和伊红染色，进行肝脏活检以评估乙醇诱导的组织病理学改变。（C）使用检测试剂盒分析血清AST、ALT和TBIL水平。比例尺，50µm。数据表示为平均值的平均值±标准误差。^###与对照组相比，P<0.001；^*P<0.05，^**P<0.01和^***与模型组/乙醇组相比，P<0.001。给出了至少两个独立实验的数据。ALT、丙氨酸氨基转移酶；天冬氨酸转氨酶；地塞米松；ET、乙醇；G-Rg1、人参皂苷Rg1；NC，正常控制；R0.5/1.0/1.5，0.5/1.0/1.5 mg/ml G-Rg1；TBIL，总胆红素。

图3
G-Rg1抑制乙醇诱导的促炎细胞因子上调。（A） ELISA法检测经或不经G-Rg1处理的乙醇暴露L-O2细胞培养上清中的IL-6、TNF-α和IL-1β。（B）在未经治疗、G-Rg1或DEX治疗的酒精性肝炎大鼠的血清中检测到IL-6和TNF-α。数据表示为平均值的平均值±标准误差。^###与对照组/生理盐水组相比，P<0.001；^**P<0.01和^***与模型组/乙醇组相比，P<0.001。显示了三个独立实验的代表性数据。地塞米松；人参皂苷Rg1；白细胞介素；Rg1；报告1_0.5/1.0/1.50.5/1.0/1.5 mg/ml G-Rg1；肿瘤坏死因子-α.

图4
G-Rg1抑制NF-κB通路的激活。（A）用乙醇、乙醇+G-Rg1（0.5、1.0和1.5 mg/ml）或生理盐水处理L-O2细胞，通过western blot分析测定NF-κB的蛋白表达水平，以β-actin作为负荷对照。（B）采用聚合酶链反应检测正常对照大鼠和经或不经G-Rg1或DEX治疗的酒精性肝炎大鼠肝组织中NF-κB p65的表达。GAPDH被用作内部控制。（C）大鼠肝组织NF-κB表达的Western blot分析和（D）免疫组织化学染色。比例尺，50µm。数据以平均值±平均值的标准误差表示。^##P<0.01和^###与对照组/生理盐水组相比，P<0.001；^*P<0.05，^**P<0.01和^***与模型组/乙醇组相比，P<0.001。显示了至少三个独立实验的数据。地塞米松；G-Rg1、人参皂苷Rg1；核因子-κB

图5
G-Rg1通过调节氧化应激和炎症小体激活来保护肝细胞。（A）将L-O2细胞暴露于乙醇中，并用或不用G-Rg1（0、0.5、1.0和1.5 mg/ml）处理。通过western blotting分析CYP2E1的表达。（B）在L-O2细胞上清液中也检测到GSH-Px和（C）ROS。数据表示为平均值的平均值±标准误差###与对照/NS组相比P<0.001；^*P<0.05，^**P<0.01和^***与模型/ET组相比，P<0.001。（D） L-O2细胞中caspase-1表达的Western blot分析。显示了三个具有类似结果的独立实验。ET、乙醇；G-Rg1、人参皂苷Rg1；谷胱甘肽过氧化物酶；NS，生理盐水；R（右）_0.5/1.0/1.50.5/1.0/1.5 mg/ml G-Rg1；活性氧。

图6
G-Rg1抑制肝细胞凋亡。将L-O2细胞暴露于乙醇中，并用或不用G-Rg1处理。（A）流式细胞术检测酒精暴露后L-O2细胞的凋亡。（B） L-O2细胞中caspase-3和-8表达的Western blot分析。（C-E）给予酒精性肝炎大鼠G-Rg1或DEX治疗，通过（C）蛋白质印迹和（D）免疫组织化学检测肝组织中胱天蛋白酶-3和-8的表达。（E）用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法检测肝细胞凋亡。比例尺，50µm。数据表示为平均值±平均值标准误差。^###与对照组/生理盐水组相比，P<0.001；^*P<0.05，^**P<0.01和^***与模型组/乙醇组相比，P<0.001。结果来自三个独立的实验。地塞米松；G-Rg1、人参皂苷Rg1

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