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。2017年12月；14(6):6969-6975.
doi:10.3892/ol.2017.7021。 Epub 2017年9月21日。

MicroRNA-154/ADAM9轴抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭

秦成伟 1 2, 赵燕明 三, 春之宫 2, 杨振林 4
附属公司

微小RNA-154/ADAM9轴抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭

秦成伟等。 Oncol Lett公司。 2017年12月。

摘要

乳腺癌是女性癌症相关死亡率的主要原因。尽管近年来乳腺癌患者的早期诊断和系统治疗取得了很大进展，但复发或远处转移仍然是乳腺癌成功治疗的主要障碍。因此，充分了解乳腺癌进展的分子机制对于制定有效的乳腺癌治疗策略至关重要。本研究旨在探讨microRNA-154（miR-154）在人类乳腺癌中的表达、功能和分子机制。研究表明，miR-154在乳腺癌组织和细胞系中显著下调。miR-154表达的恢复抑制了乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭。ADAM金属肽酶结构域9（ADAM9）被确定为乳腺癌miR-154的新的直接靶点。已经证明miR-154通过靶向ADAM9在乳腺癌中起到肿瘤抑制作用。本研究结果表明，恢复miR-154的表达可能是未来乳腺癌治疗的有效策略。

关键词：ADAM金属肽酶结构域9；乳腺癌；生长；转移；microRNA-154。

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数字

图1。
图1。
miR-154在乳腺癌中表达下调。（A） 使用RT-qPCR测定miR-154在乳腺癌组织和相应的非肿瘤乳腺组织样本中的相对表达水平*与非肿瘤组织相比P<0.05。（B） 采用RT-qPCR方法分析miR-154在乳腺癌细胞系（MCF-7、SKBR3和MDA-MB-231）和MCF-10A正常乳腺上皮细胞系中的相对表达水平*与MCF-10A细胞相比P<0.05。miR，microRNA；RT-qPCR，逆转录定量聚合酶链反应。
图2。
图2。
miR-154抑制乳腺癌细胞的增殖。（A） 用miR-154模拟物或NC转染后，通过RT-qPCR检测MCF-7和MDA-MB-231细胞中miR-54的水平。（B）增殖试验显示，与NC转染细胞相比，用miR-54模拟物转染的细胞的增殖受到显著抑制。*与NC.miR，microRNA相比，P<0.05；RT-qPCR、逆转录定量聚合酶链反应；NC，阴性对照。
图3。
图3。
miR-154抑制乳腺癌细胞的迁移和侵袭。使用miR-154模拟物或NC转染MCF-7和MDA-MB-231细胞（放大倍数×200）后，进行跨孔迁移和侵袭试验，以评估迁移和侵袭能力*与NC.miR、microRNA相比P<0.05；NC，阴性对照。
图4。
图4。
ADAM9是miR-154的直接靶基因。（A） ADAM9的3′UTR中推测的miR-154结合位点示意图。（B） 荧光素酶报告子分析显示，用miR-154模拟物转染后，PmirGLO-ADAM9-3′UTR Wt的相对荧光素酶活性降低。（C） 反转录定量聚合酶链反应分析转染miR-154模拟物或NC的MCF-7和MDA-MB-231细胞中ADAM9 mRNA表达水平，ADAM金属肽酶结构域9；miR，microRNA；3′UTR，3′-非翻译区；Wt，野生型；哑巴，突变体。
图5。
图5。
ADAM9表达的恢复消除了miR-154对乳腺癌细胞的抑制作用。（A） Western blot分析转染ADAM9载体或空白载体对照的MCF-7和MDA-MB-231细胞中ADAM9蛋白表达水平*与空白载体相比P<0.05。（B） ADAM9过表达消除了转染miR-154模拟物的MCF-7和MDA-MB-231细胞的增殖抑制*与miR-154模拟物相比，P<0.05。（C） ADAM9逆转了转染miR-154模拟物（放大倍数×200）的MCF-7和MDA-MB-231细胞的迁移和侵袭抑制。ADAM9，ADAM金属肽酶结构域9；miR，microRNA；NC，阴性对照。
图5。
图5。
ADAM9表达的恢复消除了miR-154对乳腺癌细胞的抑制作用。（A） Western blot分析转染ADAM9载体或空白载体对照的MCF-7和MDA-MB-231细胞中ADAM9蛋白表达水平*与空白载体相比P＜0.05。（B） ADAM9过表达消除了转染miR-154模拟物的MCF-7和MDA-MB-231细胞的增殖抑制*与miR-154模拟物相比，P<0.05。（C） ADAM9逆转了转染miR-154模拟物（放大倍数×200）的MCF-7和MDA-MB-231细胞的迁移和侵袭抑制。ADAM9，ADAM金属肽酶结构域9；miR，microRNA；NC，阴性对照。
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