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.2017年10月；96（43）：e8166。
doi:10.1097/MD.000000000008166。

TRPC1对慢性阻塞性肺疾病患者气道上皮-间质转化的影响

冯旭 1, 刘晓春, 李丽, 朝南玛, 张亚军
附属公司

TRPC1对慢性阻塞性肺疾病患者气道上皮-间质转化的影响

冯旭等。 医学（巴尔的摩）. 2017年10月.

摘要

背景：我们研究了TRPC1对慢性阻塞性肺病（COPD）患者气道上皮-间质转化（EMT）的影响。

方法：共选择94例接受肺叶切除术的患者，并将其分为COPD组（49例）和对照组（45例）。免疫组织化学检测E-cadherin、vimentin和TRPC1的表达。分析了慢性阻塞性肺病（COPD）患者TRPC1表达与E-钙粘蛋白和波形蛋白表达的相关性，以及肺功能指标与TRPC1、E-钙黏蛋白和波状蛋白表达的关系。人气道上皮细胞（16HBE）用于细胞实验；利用TRPC1重组质粒和siRNA，采用香烟烟雾提取物（CSE）建立COPD模型，将细胞分为对照组、CSE组、CSE+载体组、CSE+TRPC1组、CSE_si-NC组和CSE+si-TRPC1组。采用定量实时聚合酶链反应（qRT-PCR）和Western blot检测TRPC1、E-cadherin和vimentin的表达。

结果：与对照组相比，COPD组TRPC1和vimentin的表达显著增加，而E-cadherin的表达减少，TRPC1的蛋白表达与vimentin蛋白表达呈正相关，而与E-cadherin蛋白表达呈负相关。与TRPC1阴性表达的患者相比，TRPC1阳性表达的患者FEV1、FEV1%Pred和FEV1/FVC较低。与对照组相比，CSE、CSE+载体、CSE+TRPC1和CSE+si-NC组中TRPC1与vimentin的表达增加，而E-cadherin的表达减少。与CSE和CSE+载体组相比，CSE+TRPC1组TRPC1和vimentin的表达增加，而E-cadherin的表达减少。与CSE和CSE+si-NC组相比，CSE+si-TRPC1组TRPC1和vimentin的表达减少，而E-cadherin的表达增加。CSE、CSE+载体和CSE+si-NC组之间未观察到显著差异。

结论：TRPC1在COPD促进EMT过程中的过度表达和TRPC1可能是未来COPD新治疗的一个新的热点。

PubMed免责声明

利益冲突声明

作者声明没有利益冲突。

数字

图1
图1
TRPC1、波形蛋白和E-钙粘蛋白的相关性以及mRNA和蛋白表达。注：（A）TRPC1、波形蛋白和E-钙粘蛋白表达的免疫组织化学图像（×400）；（B） 用RT-PCR检测TRPC1、波形蛋白和E-钙粘蛋白的mRNA表达。COPD=慢性阻塞性肺疾病，EMT=上皮-间质转化，RT-PCR=逆转录-聚合酶链反应，TRPC1=瞬时受体电位标准1。
图2
图2
CSE对16HBE细胞形态、E-cadherin和vimentin的影响。注：（A）不同时间段倒置显微镜下观察CSE对16HBE细胞形态的影响（放大200倍观察）；（B） Western blot检测不同时间段CSE对16HBE细胞E-cadherin和vimentin的影响，并与0 小时，P（P） < .05，与24相比 h时间段，P（P） < 0.05，与48相比 h时间段，P（P） < .05.CSE=吸烟提取物，GAPDH=甘油醛-3-磷酸脱氢酶，TRPC1=瞬时受体电位标准1。
图3
图3
转染后的细胞形态和TRPC1的表达。注：（A）倒置显微镜下观察转染后细胞形态（放大200倍观察）；（B） 通过蛋白质印迹测定法测定细胞中的蛋白质表达；（C） 各组转染后蛋白表达水平的直方图；（D） 转染后各组mRNA表达水平的直方图。*，与对照组相比，P（P） < .05;#与CSE、CSE相比 + 向量和CSE + si-NC基团，P（P） < .05.CSE=吸烟提取物，GAPDH=甘油醛-3-磷酸脱氢酶，TRPC1=瞬时受体电位标准1。
图4
图4
Western blot分析和RT-PCR转染后检测各组E-cadherin和vimentin的蛋白表达。注：（A）转染后E-钙粘蛋白和波形蛋白的蛋白表达；（B） 转染后E-cadherin和vimentin蛋白表达直方图；（C） 转染后通过RT-PCR测定E-钙粘蛋白和波形蛋白的mRNA表达的直方图。∗与对照组相比，P（P） < .05;#与CSE相比 + 矢量和CSE + si-NC基团，P（P） < .05.CSE=香烟烟雾提取物，GAPDH=甘油醛-3-磷酸脱氢酶，RT-PCR=逆转录聚合酶链反应，TRPC1=瞬时受体电位标准1。
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