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.2017;43(5):1767-1776.
doi:10.1159/000484063。 Epub 2017年10月19日。

Mir-29b通过靶向卵巢癌细胞SIRT1调节氧化应激

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Mir-29b通过靶向卵巢癌细胞SIRT1调节氧化应激

孟厚等。 细胞生理生化. 2017.
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摘要

背景:代谢异常在多种恶性肿瘤中常见,包括上皮性卵巢癌(EOC),其中活性氧(ROS)的生成和消除失衡在EOC的发生和发展中起着关键作用。在这里,我们研究了miR-29b的作用,这是一种成熟的肿瘤抑制miRNA在EOC细胞代谢调节中的作用。

方法:通过CCK8和Annexin V-FITC/PI分析评估miR-29b抑制和过度表达的EOC细胞的细胞活力和凋亡。用q-PCR检测H2O2培养的EOC细胞中miR-29b的变化。在不同EOC培养物中也检测到相对ROS水平,包括改良的miR-29b和SIRT1水平以及H2O2培养。采用荧光素酶报告分析检测miR-29b与SIRT1 3’UTR的直接结合。在SIRT1敲除的EOC细胞中评估细胞活力和ROS水平的变化。

结果:miR-29b表达与EOC细胞活性降低和凋亡增加相关。H2O2以时间和剂量依赖的方式下调miR-29b。miR-29b表达与活性氧水平呈负相关,而SIRT1显著刺激活性氧的形成。荧光素酶报告子分析证实miR-29b通过直接靶向其mRNA 3'-UTR下调SIRT1。SIRT1沉默可挽救H2O2处理细胞的细胞活力。此外,SIRT1抑制抑制H2O2诱导的细胞凋亡,并降低细胞内ROS水平。

结论:总之,我们的研究结果表明,miR-29b/SIRT1轴对H2O2诱导的细胞活性损伤和氧化应激具有保护作用,并可能为基于miR-29b的EOC治疗方法提供新的选择。

关键词:微小RNA;卵巢癌;活性氧;SIRT1(无声交配型信息调节2同源物1)。

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