跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https（https）：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2017年9月25日：8:611。
doi:10.3389/fphys.2017.00611。 2017年电子收集。

渗透素通过AdipoR1/PI3K/AKT信号通路保护H9c2细胞免受模拟缺血再灌注损伤

刘建华 1, 华穗 2, 赵建林 2, Yan Wang（王燕） 1
附属公司

渗透素通过AdipoR1/PI3K/AKT信号通路保护H9c2细胞免受模拟缺血再灌注损伤

刘建华等。 前生理学. .

摘要

目标：本研究旨在探讨渗透素对心肌缺血/再灌注（I/R）的影响及其机制。方法：体外通过缺氧缺糖再灌注（OGD/R）建立大鼠心肌成肌细胞H9c2 I/R损伤模型。细胞接种渗透素，并转染特异性靶向脂联素受体1或2（AdipoR1/2）的小干扰RNA（siRNA）。此外，在OGD/R条件下，用或不用LY294002作为磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）抑制剂培养细胞。分析细胞活力、凋亡、凋亡相关蛋白和炎症因子的表达。结果：结果表明，与用载体处理的细胞相比，渗透素显著提高了H9c2细胞的存活率(P（P）<0.05），并通过调节凋亡相关蛋白的表达降低H9c2细胞的凋亡。此外，我们观察到渗透素在统计学上减少了H9c2细胞中促炎因子的释放，并增加了抗炎因子的释放(P（P）< 0.05). 然而，这些作用被AdipoR1沉默而非AdipoR2显著逆转。此外，渗透素显著上调PI3K、AKT、ERK的磷酸化水平，下调NF-κB的磷酸化程度(P（P）< 0.05). 而服用LY294002会降低细胞活性，增加细胞凋亡，并加重炎症反应(P（P）< 0.05).结论：我们的结果表明，渗透素对模拟OGD/R损伤的H9c2细胞的保护作用可能与AdipoR1/PI3K/AKT信号通路有关。

关键词：AKT信号通路；AdipoR1/PI3K信号通路；急性心肌梗死；缺血再灌注损伤；渗透素。

PubMed免责声明

数字

图1
图1
OGD/R暴露和渗透素给药（有或无LY294002治疗）的时间轴。OGD/R、氧糖剥夺/再灌注；脂联素受体；小干扰RNA；半定量实时逆转录聚合酶链式反应；乳酸脱氢酶；活性氧，反应性氧化应激；MTT，3-（4,5-二甲基噻唑基）-2,5-二苯基-2-H-四唑溴化铵。
图2
图2
渗透素结合AdipoRs沉默对H9c2细胞活性的影响。用OGD/R预处理H9c2细胞，然后用渗透素给药和/或转染AdipoR1或AdipoR2的特异性siRNA。（A）渗透素对细胞活力的影响(n个= 5);（B–D）用半定量RT-PCR测定了siRNAs对AdipoR1和AdipoR2的转染效率(n个=5）和western blot分析。GAPDH充当内部控制；（E）渗透素和/或与AdipoR1或AdipoR2 siRNAs联合转染对细胞活力的影响(n个= 5).（F）相应给药后H9c2细胞的相对LDH释放(n个= 5).*P（P）与相应对照组相比<0.05；ns，与渗透素组相比无显著性差异。OGD/R、氧糖剥夺/再灌注；脂联素受体；NC，阴性对照；小干扰RNA；半定量实时逆转录聚合酶链反应；乳酸脱氢酶。
图3
图3
渗透素和AdipoRs沉默对H9c2细胞凋亡的影响。用OGD/R预处理H9c2细胞，然后用渗透素给药和/或转染AdipoR1或AdipoR2的特异性siRNA。（A）渗透素和AdipoRs沉默对凋亡细胞百分率的影响(n个= 5);（B）Wearer blot检测凋亡相关蛋白的表达。（C–E）凋亡相关蛋白的相对蛋白表达水平(n个= 5).（F）渗透压素和AdipoRs沉默对ROS阳性细胞数量的影响(n个= 5).*P（P）与相应对照组相比<0.05；ns，与渗透素组相比无显著性差异。OGD/R、氧糖剥夺/再灌注；脂联素受体；Bcl、B细胞淋巴瘤；小干扰RNA；活性氧，反应性氧化应激；ns，无显著性。
图4
图4
渗透素和AdipoRs沉默对H9c2细胞中促炎因子表达的影响。用OGD/R预处理H9c2细胞，然后用渗透素给药和/或转染AdipoR1或AdipoR2的特异性siRNA。（A）western blot检测包括IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α在内的促炎因子的表达。（B–E）、促炎因子IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α的相对蛋白表达水平(n个= 5).*P（P）与相应对照组相比<0.05；ns，与渗透素组相比无显著性差异。OGD/R、氧糖剥夺/再灌注；脂联素受体；白细胞介素；肿瘤坏死因子；核因子-κB；小干扰RNA；ns，无显著性。
图5
图5
渗透素和AdipoRs沉默对H9c2细胞炎症因子的影响。用OGD/R预处理H9c2细胞，然后用渗透素给药和/或转染AdipoR1或AdipoR2的特异性siRNA。（A–D）用ELISA法测定促炎因子IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α的相对含量(n个= 5).（E）western blot检测抗炎因子IL-4、IL-10和IL-13的蛋白表达。*P（P）与相应的对照组相比<0.05；ns，与渗透素组相比无显著性差异。OGD/R、氧糖剥夺/再灌注；脂联素受体；白细胞介素；肿瘤坏死因子；小干扰RNA；ns，无显著性。
图6
图6
渗透素和AdipoRs沉默对H9c2细胞PI3K、AKT、NF-κB和ERK表达的影响。用OGD/R预处理H9c2细胞，然后用渗透素给药和/或转染AdipoR1或AdipoR2的特异性siRNA。（A）western blot检测相应给药后H9c2细胞中p/t-PI3K和p/t-AKT的表达。（B）p/t PI3K比率(n个= 5).（C）p/t AKT比率(n个= 5).（D）western blot检测相应给药后H9c2细胞中p/t-NF-κB和p/t-ERK1/2的表达。（E）p/t NF-κB的比值。（F）p/t ERK1/2的比率*P（P）与相应对照组相比<0.05；ns，与渗透压素组相比没有显著性差异。OGD/R、氧糖剥夺/再灌注；脂联素受体；磷脂酰肌醇3-激酶；核因子κB；小干扰RNA；ns，无显著性。
图7
图7
渗透素和LY294002给药对H9c2细胞活力和凋亡的影响。H9c2细胞用OGD/R预处理，然后用渗透素和/或LY294002作为PI3K抑制剂给药。（A）渗透压素和/或LY294002给药对细胞活力的影响(n个= 5);（B）给药H9c2细胞的LDH相对释放(n个= 5).（C）渗透素和LY294002对细胞凋亡的影响(n个= 5).（D）western bolt检测凋亡相关因子的表达。GAPDH公司作为内部控制。（E–G）凋亡相关因子的相对表达水平(n个= 5).（H）渗透素和/或LY294002给药对ROS阳性细胞数量的影响(n个= 5).*P（P）与相应对照组相比<0.05。OGD/R、氧糖剥夺/再灌注；磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）抑制剂LY294002；乳酸脱氢酶；活性氧，反应性氧化应激；LY294002，磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）抑制剂。
图8
图8
渗透压素和LY294002给药对H9c2细胞中促炎因子表达的影响。H9c2细胞用OGD/R预处理，然后用渗透素和/或LY294002作为PI3K抑制剂给药。（A）western blot检测给药后H9c2细胞中IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α的表达。（B–E）IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α的相对表达水平(n个= 5).*P（P）与相应对照组相比<0.05。OGD/R、氧糖剥夺/再灌注；磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）抑制剂LY294002；白细胞介素；TNF、肿瘤坏死因子。
图9
图9
渗透素和LY294002对H9c2细胞炎症因子含量的影响。H9c2细胞用OGD/R预处理，然后用渗透素和/或LY294002作为PI3K抑制剂给药。（A–D）ELISA检测促炎因子IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α含量的结果(n个= 5).（E）western blot检测抗炎因子IL-4、IL-10和IL-13的蛋白表达*P（P）与相应对照组相比<0.05。OGD/R、氧糖剥夺/再灌注；脂联素受体；磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）抑制剂LY294002；白细胞介素；TNF、肿瘤坏死因子。
请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

查看所有类似文章

引用人

查看所有“被引用”文章

工具书类

    1. Ali T.、Yoon G.H.、Shah S.A.、Lee H.Y.、Kim M.O.（2015）。渗透素可减轻淀粉样β诱导的记忆损伤、tau磷酸化和小鼠海马的神经变性。科学。报告5:11708。10.1038/srep11708-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Anil K.S.、Hima K.P.、Shravan K.G.、Mohanalatha C.、Kavi Kishor P.B.（2015）。渗透素：一种植物哨兵和哺乳动物脂联素的可能激动剂。前面。植物科学。6:163 10.3389/fpls.2015.00163-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Arslan F.、Lai R.C.、Smeets M.B.、Akeroyd L.、Choo A.、Aguor E.N.E.等人。(2013). 间充质干细胞源性外泌体增加ATP水平，减少氧化应激，激活PI3K/Akt通路，以提高心肌存活率，防止心肌缺血/再灌注损伤后的不良重塑。干细胞研究10，301–312。2016年10月10日/j.scr.2013.01.002-内政部-公共医学
    1. Badshah H.、Ali T.、Kim M.O.（2016年）。渗透素通过TLR4/NFκB信号通路减轻LPS诱导的神经炎症和记忆损伤。科学。代表6:24493。10.1038/代表24493-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Baumgarten G.（2001）。内毒素给药后成人心脏内炎症介质的体内表达：toll样受体-4的作用。《信息疾病杂志》。183, 1617–1624. 10.1086/320712-内政部-公共医学