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.2017年11月30日;10(2):193-217.
doi:10.15283/ijsc17036。

小分子化学刺激神经前分化过程中人脂肪源干细胞的蛋白质组学分析

附属公司

小分子化学刺激神经前分化过程中人脂肪源干细胞的蛋白质组学分析

杰兰·桑托斯等。 国际J干细胞. .

摘要

背景:脂肪源性干细胞(ADSC)是从腹部抽脂中获得的,每毫升产生的干细胞比骨髓中多1000倍。对于ADSC是否能够向神经元表型进行经皮分化,目前存在很大的研究空白。之前的研究已经调查了化学鸡尾酒的使用,但没有得出不同的结论。

方法:用化学兴奋剂β-巯基乙醇处理人类ADSC,以在24小时内将其导向神经样谱系。然后使用iTRAQ进行定量蛋白质组学,以确定ADSC、经β-巯基乙醇处理的ADSC和胶质母细胞瘤细胞系之间的蛋白质丰度差异。

结果:分化12小时和24小时的ADSCs的可溶性蛋白质组与基础ADSCs和对照细胞显著不同,表达许多重塑、神经保护和神经增殖蛋白。然而,在随后的时间点,应激和休克相关蛋白被观察到上调,而结构蛋白则大幅下调。细胞因子谱支持大的细胞重塑转变,也指示细胞的窘迫。

结论:较早的时间点表示分化的开始。在后一个时间点,治疗期间细胞数量大量减少。24小时时细胞因子谱急剧下降,应激蛋白过度表达,这表明暴露于β-巯基乙醇超过24小时可能不适合临床应用,因为我们的结果表明细胞处于创伤中,同时产生神经样形态。更短的治疗时间是有希望的,这表明还原剂具有启动ADSCs神经元分化的快速作用潜力。

关键词:脂肪;成体干细胞;细胞因子;神经元;蛋白质组学。

PubMed免责声明

利益冲突声明

潜在利益冲突

作者没有相互冲突的经济利益。

数字

图1
图1
非诱导ADSC和化学诱导ADSC的形态学比较。(A) 分化前作为对照培养的基底人类ADSC呈现标准的扁平成纤维细胞形态。(B~D)hADSC分别在诱导3小时、12小时和24小时后用神经分化培养基进行诱导,在24小时内进行结构重塑。10倍放大。
图2
图2
火山图。(A~C)显示p值与蛋白质折叠变化(对数2)ADSC和比较。具有统计学意义的p值<0.05和log的量化标准截止值2折叠变化截止值<−0.2或>0.2。蓝色节点表示大于0的对数倍变化,即上调蛋白和小于0的对数倍数变化下调蛋白。灰色节点表示p值大于0.05且在折叠变化截止值范围内的未发生显著变化的蛋白质。D显示了所有样本中统计变化的蛋白质与基础ADSC的比率。蓝色条表示非统计显著变化的蛋白质,红色条表示统计显著上调的蛋白质,绿色条表示统计明显下调的蛋白质。
图3
图3
上调和下调蛋白质的三向维恩图。图表包括12小时分化、24小时分化的hADSCs和显示独特和共享蛋白质的GBCs。(A) 显示了调节蛋白,显示了29、26、357个独特的蛋白,每个相应的测试细胞系之间有11、32和25个共享蛋白,以及所有三个相对于基础hADSC的共享蛋白。(B) 显示了下调的蛋白质,表明每个相应的测试细胞系之间有36、26、364个独特的蛋白质,19、27和50个共享蛋白质,以及所有三个与基础hADSC相关的共享蛋白质66个。
图4
图4
(A) 在55 kDa时,在ADSC、BME分化和GBC中观察到BT3阳性的Western blot。(B) 在48 kDa的GBCs中检测到GFAP阳性。(C) NF200在GBC中以200kDa阳性鉴定,在ADSC中非常微弱。(D) NeuN在BME分化和GBC中呈极低阳性VE是不相关细胞系的全细胞裂解物的阴性对照。
图5
图5
ADSC BME治疗过程中每个时间点的平均细胞总数(带平均误差线)。平均细胞计数显示每个时间点的细胞总数,最后两个时间点细胞数量急剧减少。
图6
图6
随着时间的推移,BME治疗的ADSC的Bioplex 27-plex细胞因子阵列。基底ADSC白细胞介素和细胞因子分泌的生物复合物比较以及与BME神经分化介质的时间分化。层次聚类软件和欧氏检验Red:中位数以上的表达;绿色:中位数以下;黑色:样本的中间表达。

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    1. Arvidson K、Abdallah BM、Applegate LA、Baldini N、Cenni E、Gomez-Barrena E、Granchi D、Kassem M、Konttinen YT、Mustafa K、Pioletti DP、Sillat T、Finne Wistrand A。骨再生和干细胞。细胞分子医学杂志2011;15:718–746. doi:10.1111/j.152-4934.2010.1224.x。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Moraleda JM、Blanker M、Bleda P、Iniesta P、Ruiz F、Bonilla S、Cabanes C、Tabares L、Martinez S。成人干细胞治疗:梦想还是现实?转导免疫。2006;17:74–77. doi:10.1016/j.trim.2006.09.030。-内政部-公共医学
    1. Lu P,Blesch A,Tuszynski MH.骨髓基质细胞向神经元的诱导:分化、转分化还是伪影?神经科学研究杂志2004;77:174–191. doi:10.1002/jnr.20148。-内政部-公共医学
    1. Woodbury D、Schwarz EJ、Prockop DJ、Black IB。成年大鼠和人骨髓基质细胞分化为神经元。神经科学研究杂志2000;61:364–370. doi:10.1002/1097-4547(20000815)61:4<364::AID-JNR2>3.0.订单;2-摄氏度。-内政部-公共医学
    1. Zuk PA、Zhu M、Ashjian P、De Ugarte DA、Huang JI、Mizuno H、Alfonso ZC、Fraser JK、Benhaim P、Hedrick MH。人类脂肪组织是多能干细胞的来源。分子生物学细胞。2002;13:4279–4295. doi:10.1091/mbc。E02-02-0105。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

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