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.2017年7月26日;7(1):6496.
doi:10.1038/s41598-017-06816-6。

尿毒症不影响小鼠新生内膜的形成

附属公司

尿毒症不影响小鼠新生内膜的形成

安娜玛丽·阿鲁普等。 科学代表. .

摘要

动脉粥样硬化性心血管疾病是慢性肾脏病(CKD)的主要并发症。CKD导致尿毒症,从而调节主动脉平滑肌细胞(SMCs)的表型。SMCs的表型调节在加速动脉粥样硬化中起着关键作用。我们研究了尿毒症增强小鼠血管损伤后新生内膜形成的假说。在C57BL/6 wt和载脂蛋白E基因敲除(Apoe-/-)5/6肾切除诱导小鼠尿毒症2周后。导线损伤导致wt和Apoe中编码经典SMC标记物(即心肌钙蛋白、α-平滑肌肌动蛋白、SM22-α和平滑肌肌球蛋白重链)的基因新生内膜形成和下调-/-老鼠。与我们的预期相反,尿毒症不会加剧新生内膜的形成,也不会影响磁共振成像和组织学分析判断的内膜损伤成分。此外,尿毒症对受损颈动脉中SMC标记基因的表达没有影响,这表明尿毒症可能对不同血管床中SMC的影响不同。总之,尿毒症不会加速小鼠颈动脉金属丝损伤后新生内膜的形成。

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作者声明,他们没有相互竞争的利益。

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图1
图1
尿毒症不影响C57BL/6小鼠血管损伤后颈动脉新生内膜的形成。(A类)研究大纲:C57BL/6小鼠分两步(时间点NX1和NX2)接受5/6肾切除术(NX)或假手术,随后进行颈动脉线损伤和磁共振成像(MRI)。(B类)横截面血管壁面积的量化体内MRI(平均每只小鼠4个横截面;n = 5 NX和n = 4个假手术组)和组织学(平均8-12个切片/只小鼠;n = 11 NX和n = 8假手术组)。(C类)颈动脉壁面积的组织学定量。三个解剖位置,系列1–3(S1–S3,2–4节/小鼠/每个系列,n = 11 NX和n = 8假手术组),进行量化。(D类)NX和假小鼠受损和控制颈动脉的典型三色染色图片。比例尺,200μm。(E类)横截面内膜和(F类)NX和假小鼠受伤和对照颈动脉的内侧区(平均8-12节/只,n = 11 NX和n = 8假)。数据以平均值表示±SEM.未配对t检验(B类)带多重比较修正(C类),单因素方差分析,然后是Sidak的多值比较测试(E类,F类). *P(P) < 0.05.
图2
图2
颈动脉磁共振成像。(A类)体内C57BL/6小鼠左颈动脉钢丝损伤后的磁共振成像(MRI)和H&E染色。钢丝损伤后,右颈动脉(对照组)看起来正常,而血栓阻塞了整个左颈动脉(受伤)。(B类)受伤颈动脉横截面积的MRI测量值和组织学测量值之间的相关性。取4个MRI横截面或6-10个组织切片的平均值。n个 = 18.具有统计学意义(p = 0.0045)MRI测量值与组织学衍生值之间存在相关性。
图3
图3
电线损伤(而非尿毒症)影响C57BL/6小鼠平滑肌标记基因的表达。实时PCR分析假手术(sham)和尿毒症(NX)C57BL/6小鼠的颈动脉mRNA(合并2和2),无论是有(损伤)还是无(对照)电线诱导血管损伤。基因表达标准化为CANX。条形表示平均值±扫描电镜(n = 每组6个);单因素方差分析(ANOVA),然后进行Sidak的多变量比较测试,*p < 0.05,**p < 0.1,***p < 0.001,****磅 < 0.0001. a.u.:任意单位;学报2:平滑肌α肌动蛋白;Myocd公司,Myocardin;胶转蛋白,SM22α;我的11,平滑肌肌球蛋白重链。
图4
图4
尿毒症不影响颈动脉血管损伤后新生内膜的形成阿波 −/−老鼠。(A类)研究大纲:阿波 −/−小鼠分两步(时间点NX1和NX2)进行5/6肾切除(NX)或假手术(sham),然后吃西餐,随后进行颈动脉导线损伤。B类NX和假手术组受损颈动脉三色染色的代表性图片阿波 −/−老鼠。比例尺,200μm。(C类)横截面内膜和(D类)NX和假手术损伤颈动脉的内侧区阿波 −/−小鼠(平均每只小鼠8–12节;n = 16个NX,n = 7假手术组),钢丝损伤后四周。水平条表示平均值。改进的t检验。
图5
图5
电线损伤,但不是尿毒症,影响平滑肌标志物基因的表达阿波 −/−老鼠。假手术(sham,n)颈动脉RNA(合并2和2)的实时PCR分析 = 5) 尿毒症(NX,n = 10)阿波 −/−有(受伤)或无(对照)电线诱导血管损伤的小鼠。基因表达标准化为CANX。条形表示平均值±SEM.单因素方差分析,随后是Sidak的多变量比较测试,*p < 0.05,**p < 0.1,***p < 0.001,****磅 < 0.0001. a.u.:任意单位。学报2:平滑肌α肌动蛋白;Myocd公司:肌卡蛋白;胶转蛋白:SM22α;我的11:平滑肌肌球蛋白重链。

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