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.2017年12月;31(12):1519-1526.
doi:10.1177/0269881117715597。 Epub 2017年6月28日。

与精神分裂症相关的II组代谢型谷氨酸受体3(mGlu3,GRM3)亚型与典型的mGlu2相互作用并减少配体结合

附属公司

与精神分裂症相关的II组代谢型谷氨酸受体3(mGlu3,GRM3)亚型与典型的mGlu2相互作用并减少配体结合

Aintzane García-Bea公司等。 心理药理学杂志. 2017年12月.

摘要

II型代谢型谷氨酸受体3(GRM3,mGlu3)基因除了以全长转录物的形式表达外,还以缺乏外显子4(GRM3Δ4)的mRNA异构体的形式表达,并被预测编码一种具有新C末端的蛋白质(称为mGlu3Δ4)。这种变异可能有助于GRM3作为精神分裂症风险基因的作用机制。然而,对mGlu3Δ4的性质或功能知之甚少。这里,使用瞬时转染的HEK293T/17细胞,我们确认GRM3Δ4 cDNA被翻译,mGlu3Δ4作为同二聚体和单体存在,主要定位于细胞膜,包括质膜。共免疫沉淀显示mGlu3Δ4与标准mGlu3。mGlu3Δ4不结合mGlu2/3拮抗剂[H] LY341495,但mGlu3Δ4的存在降低了[H] LY341495至mGlu3,与膜相关mGlu3.丰度减少平行。这些实验表明,mGlu3Δ4可能对mGlu2产生负调节,从而影响GRM3/mGlu3在精神分裂症中的作用以及作为治疗靶点的作用。

关键词:G蛋白偶联受体;代谢型谷氨酸受体;选择性拼接;亚型;精神分裂症。

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利益冲突声明

利益冲突声明:作者声明,与本文的研究、作者身份和/或出版没有潜在的利益冲突。

数字

图1。
图1。
mGlu3Δ4示意图及其与规范mGlu3.的关系。(a) GRM3轨迹示意图。全长受体来自一个六外显子转录本(GRM3),七个跨膜结构域区域由外显子IV编码。起始密码子位于外显子II,终止密码子位于第VI外显子。GRM3Δ4是一个缺少外显子4的转录本,导致移码导致新的C末端。(b) 全长mGlu3,显示大的细胞外N末端区域(蓝色)、跨膜结构域(红色,带黑色矩形)和细胞内C末端(黑色)。配体结合域位于细胞外区域,由25-508个氨基酸组成。mGlu3Δ4具有相同的N末端441氨基酸,但缺少细胞外结构域和跨膜结构域的其余部分,并且具有较短的新C末端(绿色)。Sartorius等人(2006年)报道了新C末端的氨基酸序列。
图2。
图2。
免疫印迹显示mGlu3Δ4在膜部分富集,并以二聚体和单体的形式存在。泳道1:mGlu3Δ4,膜分数。通道2:mGlu3Δ4,细胞溶质分数。通道3:GAPDH,膜分数。通道4:GAPDH,细胞溶质部分。通道5:N-钙粘蛋白,膜分数。通道6:N-钙粘蛋白,细胞溶质部分。车道1、3和5以及车道2、4和6来自同一样本。
图3。
图3。
免疫荧光显示mGlu3和mGlu3-Δ4的主要膜定位。(a) –(c)GRM3的转染,显示mGlu3(a)、微管蛋白(b)和合并图像(c)的免疫反应性。(d) –(f)转染GRM3Δ4-V5,显示mGlu3Δ4(d)、微管蛋白(e)和融合图像(f)的免疫反应性。(g) –(i)共转染GRM3和GRM3Δ4-V5,显示mGlu3(g)、微管蛋白(h)和融合图像(i)的免疫反应性。DAPI染色(蓝色)如(c)、(f)和(i)所示。棒材:10µm(注意(d)–(f)中的不同放大倍数)。
图4。
图4。
共免疫沉淀显示mGlu3和mGlu3-Δ4的相互作用。通道1:将转染GRM3或GRM3Δ4-V5的细胞混合在一起,然后用mGlu2/3抗体进行免疫沉淀,并用V5标签抗体进行探测。通道2:细胞共同转染GRM3和GRM3Δ4-V5,然后用mGlu2/3抗体进行免疫沉淀,并用V5标签抗体进行探测。
图5。
图5。
mGlu3Δ4对[H] LY341495与mGlu3结合并具有丰富的mGlu3。(a) 饱和度曲线显示[H] LY341495在单独转染全长GRM3(圆形)、转染GRM3和空载体(方形)以及共同转染GRM2和GRM3Δ4(三角形)后。(b)[H] 全长GRM3(FL)、共同转染的GRM3和GRM3Δ4(FL:Δ4)以及带有空载体的全长GRM3(FL:空载体)的LY341495 Bmax***第页<0.001. (c) 用mGlu3 c末端抗体检测膜蛋白的蛋白质印迹(表1)。通道1:全长GRM3单独转染。通道2:GRM3和GRM3Δ4的联合转染。注意,与1相比,2的免疫反应性较低。车道3和4是车道1和车道2的较长曝光,以提高~95kDa单体带的可视性。(d) :GRM3和GRM3Δ4共转染后的western blots相对定量显示,与单独转染GRM3后的免疫反应相比,mGlu3二聚体和单体的免疫反应性降低***第页<0.001. prot:蛋白质

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    1. Collier DA、Eastwood BJ、Malki K等人(2016)《精神分裂症遗传学进展:药物发现的网络和途径视角》。《科学年鉴》1366:61-75。-公共医学
    1. Egan MF、Straub RE、Goldberg TE等(2004)GRM3变异影响认知、前额叶谷氨酸和精神分裂症风险。美国国家科学院院刊101:12604-12609。-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Einstein R,Jordan H,Zhou W,et al.(2008)人类气道平滑肌G蛋白偶联受体超家族的选择性剪接使受体的补体多样化美国国家科学院院刊105:5230–5235。-项目管理咨询公司-公共医学
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