The Antioxidant Machinery of Young and Senescent Human Umbilical Vein Endothelial Cells and Their Microvesicles

doi:10.1155/2017/7094781

.2017:2017:7094781.

doi:10.1155/2017/7094781。 Epub 2017年5月31日。

年轻和衰老人脐静脉内皮细胞及其微泡的抗氧化机制

吉列尔莫·博迪加¹, 马蒂尔德别名², 卢德斯·博霍尔奎斯（Lourdes Bohórquez）², 塞尔吉奥·西奥迪亚^三, 玛丽亚·梅纳^三, 曼纽尔·拉米雷斯²

附属公司

¹西班牙马德里阿尔卡拉大学生物医药与生物技术部，邮编28871。
²西班牙马德里阿尔卡拉大学生物科学系，邮编28871。
^三蛋白质组学设施，西班牙马德里28049 Cantoblanco校区国家生物技术中心/CSIC。

PMID： 28642812
预防性维修识别码：项目经理5470024
内政部： 10.1155/2017/7094781

年轻和衰老人脐静脉内皮细胞及其微泡的抗氧化机制

吉列尔莫·博德加等。氧化介质细胞Longev. 2017.

.2017:2017:7094781.

doi:10.1155/2017/7094781。 Epub 2017年5月31日。

作者

吉列尔莫·博迪加¹, 马蒂尔德别名², 卢德斯·博霍尔奎斯（Lourdes Bohórquez）², 塞尔吉奥·西奥迪亚^三, 玛丽亚·梅纳^三, 曼纽尔·拉米雷斯²

附属公司

¹西班牙马德里阿尔卡拉大学生物医药与生物技术部，邮编28871。
²西班牙马德里阿尔卡拉大学生物科学系，邮编28871。
^三蛋白质组学设施，西班牙马德里28049 Cantoblanco校区国家生物技术中心/CSIC。

PMID： 28642812
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内政部： 10.1155/2017/7094781

摘要

我们检测了年轻和衰老的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）及其微泡（MV）的抗氧化作用。蛋白质组学和蛋白质印迹研究表明，年轻的HUVEC具有完整且发育良好的抗氧化系统。它们的MV还含有抗氧化剂分子，尽管其范围较小且更为特异，但通过硫氧还蛋白-过氧化还蛋白系统专门降解过氧化氢和超氧阴离子。研究表明，衰老与HUVEC及其MV中抗氧化剂机械的尺寸大幅增加有关。这些反应可能有助于HUVEC及其MV处理在较老细胞中发现的更多氧化条件。功能分析证实MV的抗氧化机制是活跃的，并且随着衰老而增大。MV中未检测到谷胱甘肽或非肽类抗氧化剂（抗坏血酸和维生素E）活性。内皮细胞和MV似乎通过增加其抗氧化机制来适应衰老过程中较高的ROS浓度，尽管这不足以从衰老诱导的ROS增加中完全恢复。此外，MV可能作为ROS清除剂参与调节血浆氧化还原状态。

PubMed免责声明

数字

图1
图中显示了涉及肽的抗氧化剂机械的主要成分。CAT：过氧化氢酶；GPX：谷胱甘肽过氧化物酶；GRX：谷胱甘肽；GSR：谷胱甘肽还原酶；GST：谷胱甘肽S-转移酶（K:kappa；O:omega；P:pi；T:theta）；HMOX：血红素加氧酶；mGST：微粒体谷胱甘肽S-转移酶；PRDX：过氧化物酶原；SOD：超氧化物歧化酶；TMX：硫氧还蛋白相关跨膜蛋白；TRX：硫氧还蛋白；TRXR：硫氧还蛋白还原酶。NADPH合成酶：G6PD：葡萄糖-6-磷酸脱氢酶；GLUD：谷氨酸脱氢酶；IDH：异柠檬酸脱氢酶；PGD:6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶。

图2
HUVEC（a–e）和MV（g）中SOD1、SOD2、SOD3、过氧化氢酶和TRX的Western blot分析。使用特定试剂盒（f）分析GSH（总含量）；左侧面板显示标准曲线，右侧面板显示总谷胱甘肽含量。Y：年轻；S：衰老。HUVEC蛋白质数据根据β-肌动蛋白（a–d）或GAPDH（e）；然而，GSH数据（f）根据样品的蛋白质含量进行了标准化。MVs的蛋白质数据根据红色Ponceau染色的强度进行标准化。条形代表平均值 ± 标准偏差(n个＝3个池）。^∗第页< 0.05,^∗∗第页< 0.01,^∗∗∗第页< 0.001.

图3
在斑点模式下分析的年轻MV显微分析图像（a）。该斑点的微观分析图（b）。硅、铝和钛是盖玻片的成分。

图4
HUVEC的DHE分析。肌动蛋白被标记为绿色荧光团（上图），DHE发出红色荧光（下图）。Y：幼细胞；S：衰老细胞。所示图像代表每个细胞年龄的60个细胞。比例尺：100 μ米。^∗∗第页< 0.05.

图5
DCF荧光发射。培养基包括50 mM过氧化氢。条形图显示了用年轻MV（Ty）或衰老MV（T）预处理培养基的效果。^∗第页<0.05，T与H₂O（运行）₂在年轻细胞中。

图6
DPPH测试。在添加年轻（Y）或衰老（S）MV之前（C：对照）和之后，对溶液的颜色强度进行量化。

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