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.2017年2月;13(2):738-746.
doi:10.3892/ol.2016.5478。 Epub 2016年12月9日。

fascaplysin的生物碱是有效的常规化疗药物,可抑制C6胶质瘤细胞的增殖并导致其死亡在体外

附属公司

fascaplysin的生物碱是有效的常规化疗药物,可抑制C6胶质瘤细胞的增殖并导致其死亡在体外

伊戈尔·布柳霍韦茨基等。 Oncol Lett公司. 2017年2月.

摘要

多形性胶质母细胞瘤是一种侵袭性恶性胶质脑肿瘤,患者预后较差。导致治疗耐药的主要原因与肿瘤细胞浸润脑实质和肿瘤干细胞的特殊性质有关。医学的一个重要研究领域是寻找能够作用于这些靶点的有效药物。法卡普赖氨酸生物碱具有较强的抗肿瘤活性。现代靶向给药方法揭示了这些化合物在临床应用方面的广泛可能性。本研究的目的是确定抑制胶质瘤生长和杀伤细胞的fascaplysin的有效浓度,并对fascaplosin与其他化疗药物的疗效进行比较分析。C6胶质瘤细胞被用作胶质母细胞瘤的最佳模型。已确定,0.5µM的fascaplysin具有强烈的细胞毒性作用,随着药物暴露时间的延长,其随后被通过凋亡导致的肿瘤细胞死亡所取代。Fascaplysin以高于0.5µM的剂量杀死胶质瘤细胞。fascaplysin的效率显著高于替莫唑胺。因此,fascaplysin的一个重要特征是它能够抑制多潜能肿瘤细胞的生长和杀伤。

关键词:C6胶质瘤细胞;化疗药物;fascaplysin;多形性胶质母细胞瘤;肿瘤细胞。

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数字

图1。
图1。
C6胶质瘤细胞的免疫细胞化学。(A) 细胞用巢蛋白抗体染色。细胞核用DAPI复染。放大倍数,×10。(B) 细胞用p53抗体染色。细胞核用DAPI复染。放大倍数,×40。(C) 细胞用胶质纤维酸性蛋白抗体染色。细胞核用DAPI复染。放大倍数,×40。
图2。
图2。
在2、1.5、1、0.5、0.05和0.005µM浓度下暴露48 h后C6胶质瘤细胞总数的生长动力学。2、1.5和1µM的Fascaplysin强烈抑制胶质瘤细胞的增殖。在Cell-IQ系统中进行自动计数(观察期48小时)*与对照组相比P<0.05。
图3。
图3。
暴露于0.5、0.05和0.005µM浓度的fascaplysin后C6胶质瘤细胞的增殖。(A) 通过细胞计数评估C6胶质瘤细胞的生长动力学(观察期96h)。浓度为0.5µM的Fascaplysin显著抑制细胞增殖*与对照组相比P<0.05。
图4。
图4。
暴露于0.005和0.5µM的fascaplysin后C6胶质瘤细胞和成纤维细胞总数(观察期,72和120 h)的生长动力学***比较不同时间间隔胶质瘤C6细胞和成纤维细胞中不同浓度的fascaplysin,P<0.05。
图5。
图5。
在C6细胞培养中暴露于0.5µM fascaplysin 6 h后,采用末端脱氧核苷酸转移酶dUTP缺口末端标记法进行染色。(A) 肿瘤细胞核碎裂的最初征象,伴有大量荧光凋亡细胞,这表明寡核苷酸DNA降解(绿色)。(B) 对照(阳性)细胞。染色前,用DNAse预处理细胞以诱导凋亡。(C) 未经fascaplysin治疗的对照(阴性)胶质瘤C6细胞。
图6。
图6。
暴露于fascaplysin 6小时后C6胶质瘤细胞凋亡的直方图。(A) C6胶质瘤细胞在培养基中培养(阴性对照)。(B) C6胶质瘤细胞暴露于0.5µM fascaplysin 6小时后。(C) C6胶质瘤细胞暴露于0.05µM浓度的fascaplysin 6小时后。横坐标表示碘化物YO-PRO-1的荧光强度(λ=533±30 nm),纵坐标表示丙酸PI的荧光强度。活细胞的“V”群未被任何染料染色早期Ap'细胞仅用YO-PRO-1碘化物染色,这与凋亡的早期阶段相对应Ap/N'死亡细胞用这两种染料均呈阳性染色,这对应于凋亡和坏死的后期阶段。结果表示为所分析细胞总数的百分比。(D) C6胶质瘤细胞在培养基中培养(阴性对照)。(E) C6胶质瘤细胞暴露于0.5µM fascaplysin 6小时后。(F) C6胶质瘤细胞暴露于0.05µM fascaplysin 6小时后。横坐标显示FDA的荧光强度(λ=533±30 nm),纵坐标显示PI的荧光强度(λ>670 nm)V’代表活细胞的数量,FDA对其进行了强烈染色FDA染色显示Ap'细胞较弱,PI阴性,这与凋亡的早期阶段相对应Ap/N'死亡细胞被FDA弱染色,并强烈合并PI,这与凋亡和坏死的后期阶段相对应。结果表示为所分析细胞总数的百分比。FDA,二醋酸荧光素;PI,碘化丙啶。
图7。
图7。
比较评估0.5µM fascaplysin、0.5µM地塞米松和0.5μM替莫唑胺对C6胶质瘤细胞的抗肿瘤作用。浓度为0.5µM的Fascaplysin更有效地抑制细胞增殖并导致细胞死亡。

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引用人

工具书类

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