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.2017年;41(1):79-90.
doi:10.1159/000455953。 Epub 2017年1月17日。

雷帕霉素在缺氧复氧前激活自噬降低肺泡上皮细胞内质网应激

雷帕霉素在缺氧复氧前激活自噬降低肺泡上皮细胞内质网应激

陶凡等。 细胞生理生化. 2017.

摘要

背景:确定自噬激活对缺氧再氧(H/R)诱导的大鼠肺泡上皮细胞系损伤的潜在影响。

方法:CCL149细胞在h/R处理2 h、4 h和6 h之前,接受自噬激动剂(雷帕霉素,Rap)、自噬抑制剂(3-甲基腺嘌呤,3-MA)或PBS处理1 h。通过MTT分析得出Rap(150 nM、200 nM和250 nM)或3-MA(5 mM、10 mM和15 mM)的最佳浓度。通过eRFP-LC3阳性细胞的荧光显微镜、自噬体的透射电镜、LC3、AMPK、Beclin-1、HDAC6和p62蛋白的western blot检测自噬。western blot检测BIP、XBP-1和CHOP的表达,显示内质网应激。

结果:H/R治疗前250 nM浓度的Rap增加了自噬形成,eRFP-LC3阳性细胞增多,LC3-II、Beclin-1、HDAC6和p62表达增加,但H/R处理的CCL149中BIP、XBP-1和CHOP表达降低。H/R暴露6h后,这种效果似乎仍很明显。而用5mM 3-MA处理则得到相反的结果。

结论:Rap可能是机械通气或再灌注前预防缺氧相关肺部疾病再损伤的一种有希望的药物。

关键词:肺泡缺氧再氧;自噬;内质网应激;雷帕霉素;未折叠蛋白反应。

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