MicroRNA-7 inhibits cell proliferation, migration and invasion in human non-small cell lung cancer cells by targeting FAK through ERK/MAPK signaling pathway

doi:10.18632/oncotarget.12684

.2016年11月22日；7(47):77468-77481.

doi:10.18632/目标12684。

MicroRNA-7通过ERK/MAPK信号通路靶向FAK抑制人非小细胞肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭

齐曹¹, 郑道茂¹, 于家石¹, 易晨¹, 孙云（音）¹, 钱章¹, 雷松¹, 李平鹏¹

附属公司

PMID： 27764812
预防性维修识别码：第536598页
内政部： 10.18632/目标12684

MicroRNA-7通过ERK/MAPK信号通路靶向FAK抑制人非小细胞肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭

齐曹等。肿瘤靶点. 2016.

.2016年11月22日；7(47):77468-77481.

doi:10.18632/目标12684。

作者

齐曹¹, 郑道茂¹, 于家石¹, 易晨¹, 孙云（音）¹, 钱章¹, 雷松¹, 李平鹏¹

附属

¹南京医科大学附属常州第二人民医院呼吸内科，常州213003。

PMID： 27764812
预防性维修识别码： PMC5363598型
内政部： 10.18632/目标12684

摘要

目标：通过ERK/MAPK信号通路靶向FAK，研究microRNA-7（miR-7）对非小细胞肺癌NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭的影响。

方法：从160例非小细胞肺癌患者手术后获得非小细胞癌组织及邻近正常组织。获得了NSCLC细胞系（A549、H1299和H1355）和正常人胎肺成纤维细胞系（MRC-5）。将NSCLC细胞分为miR-7抑制剂组、miR-7模拟物组、空白组、miR-7模拟物对照组、miR7抑制剂对照组、FAK siRNA组和miR-7抑制物+FAK siRNA组。用qRT-PCR和Western-Blotting检测miR-7和FAK mRNA在组织和细胞系中的表达。MTT法、划痕法和Transwell法检测细胞增殖、迁移和侵袭。

结果：与邻近正常组织相比，miR-7表达下调，而FAK、ERK和MAPK的mRNA和蛋白表达上调。与空白组和模拟对照组相比，miR-7模拟组和FAK-siRNA组的miR-7显著增加，但FAK、ERK和MAPK表达降低。miR-7模拟物和FAK siRNA组的细胞增殖、迁移和侵袭受到抑制，而miR-7抑制剂组则相反。

结论：miR-7可以通过下调FAK的表达来抑制ERK/MAPK信号通路的激活，从而抑制NSCLC细胞的增殖、迁移和侵袭。miR-7及其靶基因FAK可能是非小细胞肺癌诊断和治疗的新靶点。

关键词：ERK/MAPK信号通路；FAK（传真）；细胞增殖；microRNA-7；非小细胞肺癌。

PubMed免责声明

数字

**图1。非小细胞肺癌组织及邻近正常组织中miR-7的表达及FAK、ERK和MAPK的相对mRNA和蛋白表达；**
**答：。**转移性非小细胞肺癌组织、非转移性非大细胞肺癌组织和邻近正常组织中miR-7的表达及FAK、ERK和MAPK的相对mRNA表达；B。FAK、ERK和MAPK在转移性非小细胞肺癌组织、非转移性非大细胞肺癌组织和邻近正常组织中的蛋白表达。注：*，与邻近正常组织相比，*P（P）*< 0.05; #, 与非转移性非小细胞肺癌组织相比，*P（P）*< 0.05. 非小细胞肺癌；粘着斑激酶；ERK，细胞外调节蛋白激酶；丝裂原活化蛋白激酶。

图2
miR-7在A549、H1299、H1355和MRC5细胞系中的表达；*，与MRC5细胞系相比，*P（P）*< 0.05.

**图3。miR-7的表达**
**答：。**和*FAK（传真）*信使核糖核酸B。在空白组、miR-7模拟对照组、miR-7模拟组、抑制剂对照组、miR-7抑制剂组、FAK siRNA组和miR-7抑制剂+FAK siRNA组的A549和H1299细胞中，通过qRT-PCR检测；*，与模拟对照组相比，*P（P）*< 0.05; #, 与抑制剂对照组相比，*P（P）*< 0.05. 粘着斑激酶；miR-7，microRNA-7。

图4
**微小RNA**org预测*传真/PTK2*是miR-7的靶基因**答：。**双荧光素酶报告基因检测证实*传真/PTK2*是A549细胞和H1299细胞中miR-7的靶基因B。注：*，与miR-7模拟NC组相比，*P（P）*< 0.05. FAK，黏着斑激酶1；蛋白酪氨酸激酶2；NC，阴性对照；miR-7、微小RNA-7

**图5。Western-Blotting检测A549和H1299细胞中FAK、ERK和MAPK蛋白表达的比较**
(**答：。**A549细胞中FAK、ERK和MAPK的蛋白表达；B。Western-Blotting导致A549细胞；**C、。**H1299细胞中FAK、ERK和MAPK的蛋白表达；D。Western-Blotting生成H1299单元格）；*，miR-7模拟组与模拟对照组相比，*P（P）*< 0.05; #, miR-7抑制剂组与抑制剂对照组比较，*P（P）*< 0.05. 粘着斑激酶；ERK，细胞外调节蛋白激酶；丝裂原活化蛋白激酶；miR-7，microRNA-7

**图6。MTT法检测miR-7对A549和H1299细胞增殖的影响；**
注：*，与同一点的模拟对照组相比，*P（P）*< 0.05; #, 与同一时间点的抑制剂对照组相比，*P（P）*< 0.05. MiR-7，microRNA-7；MTT，甲基噻唑四氮唑。

**图7。A549和H1299细胞迁移的结果**
**答：。**各组A549细胞划痕宽度的比较；B。光镜下A549细胞划痕实验结果；**C、。**各组H1299细胞划痕宽度的比较；D。H1299细胞在光学显微镜下的伤口划痕试验结果；*，miR-7模拟组与模拟对照组相比，*P（P）*< 0.05; #, miR-7抑制剂组与抑制剂对照组比较，*P（P）*< 0.05. MiR-7，microRNA-7；MTT，甲基噻唑四氮唑。

**图8。Transwell法检测A549和H1299细胞侵袭能力**
**答：。**比较各组中A549细胞的侵袭细胞数量；B。光镜下A549细胞的Transwell分析结果；**C、。**各组H1299细胞侵袭细胞数的比较；D。光镜下H1299细胞的Transwell分析结果；*，miR-7模拟物组与模拟物对照组相比，P<0.05；#，miR-7抑制剂组与抑制剂对照组比较，P<0.05。

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