跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息,确保你在联邦政府政府网站。

HTTP服务器

该站点是安全的。
这个https(https)://确保您连接到官方网站,并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2016年10月14日;36(5):e00396。
doi:10.1042/BSR20160139。 2016年10月印刷。

MicroRNA-195通过靶向GABARAPL1调节内皮祖细胞的增殖、迁移、血管生成和自噬

附属公司

MicroRNA-195通过靶向GABARAPL1调节内皮祖细胞的增殖、迁移、血管生成和自噬

莫建文等。 Biosci代表. .

摘要

深静脉血栓形成(DVT)是一种常见的静脉血栓形成类型。成功解决DVT相关血栓对DVT的治疗至关重要。内皮祖细胞(EPCs)已成为解决DVT相关血栓的一种有希望的治疗选择;然而,内皮祖细胞的临床应用面临许多挑战。在本研究中,使用定量实时PCR分析(qRT-PCR)检测了缺氧或常压条件下miR-582、miR-195和miR-532的表达,结果表明,缺氧条件下人类内皮细胞(hEPCs)中miR-195s的增加倍数最高。然后研究miR-195在改善内皮祖细胞功能中的作用及其调控机制。为了研究miR-195抑制对hEPC自噬的影响,采用western blotting检测自噬相关基因LC3B和beclin1的表达,并用TEM观察自噬体的形成。结果表明,抑制miR-195的表达可以促进hEPC的自噬。此外,我们还研究了miR-195在缺氧条件下对hEPC增殖、迁移和血管生成的作用。结果显示,miR-195的抑制作用可促进缺氧条件下hEPCs的细胞增殖、迁移和血管生成。此外,GABA A型受体相关蛋白样1(GABARAPL1)被确定为miR-195的定向靶点,GABARAP1沉默可以降低miR-195-敲除对缺氧条件下hEPC的细胞增殖、迁移、血管生成和自噬的影响。总之,这些结果表明miR-195通过靶向GABARAPL1调节hEPC的细胞增殖、迁移、血管生成和自噬。

关键词:GABARAPL1;自噬;内皮祖细胞;miR-195。

PubMed免责声明

数字

图1
图1。的表达式miR-582型,miR-195型miR-532qRT-PCR检测的常氧和低氧条件下(*P(P)<0.05)
图2
图2。击倒miR-195型促进缺氧条件下hEPC的自噬
(A类)的表达式级别miR-195型之后miR-195型qRT-PCR检测到的抑制剂或NC转染。(B类)western blotting检测自噬相关基因LC3B和beclin1的蛋白表达水平。左边是代表性图像,右边是LC3B-I到LC3B-II(LC3B-II/LC3B-I)的转换的量化,以及随着倍数的增加在条形图中呈现的各组中的beclin1表达。(C类)每组的典型TEM图像,其中细胞在缺氧条件下培养24小时*P(P)与NC相比,<0.05。
图3
图3。抑制miR-195型在缺氧条件下通过自噬过程促进hEPC的细胞增殖、迁移和血管生成
(A类)miR-195型抑制剂或miR-195基因转染1、2和3天后,通过细胞增殖试验检测抑制剂加3-MA对缺氧条件下细胞增殖的影响。(B类)显示了所示实验组中每个场迁移细胞的平均数量。(C类)显示了EPC迁移的典型图像。(D类)显示了所示实验组每个场的平均管数。(E类)显示了毛细管形成的典型图像。
图4
图4。GABARAPL1是miR-195型
(A类)野生型或突变型GABARAPL1 3′UTR与miR-195基因. (B类)野生型(3′UTR-野生型)或突变型(3’UTR-突变型)含GABARAPL1 3′UTR报告子的荧光素酶活性,在293T细胞中转染miR-195型模拟或NC(C类)基因转染hEPCs中GABARAPL1 mRNA的qRT-PCRmiR-195型将数据归一化为GAPDH mRNA(D类)转染a基因的hEPC中GABARAPL1的Western blotmiR-195型GAPDH蛋白被用作内部负荷控制。左侧为代表性图像,右侧为条形图中各组GABARAPL1表达的量化,以倍增的形式呈现。数据表示为平均值±S.D*P(P)<0.05.
图5
图5。GABARAPL1沉默降低了miR-195型缺氧条件下hEPC自噬的敲除
(A类)转染si-GABARAPL1后,GABARAPL1的mRNA表达水平成功降低。(B类)转染si-GABARAPL1后,GABARAPL1的蛋白表达水平成功降低。左侧为代表性图像,右侧为条形图中各组GABARAPL1表达的量化,以倍增的形式呈现。(C类)si-GABARAPL1plus转染后LC3B和beclin1的表达水平miR-195型抑制剂或si-NC plusmiR-195基因左为代表性图像,右为LC3B-I到LC3B-II(LC3B-II/LC3B-I)转换的量化,每组beclin1表达以折叠式增加的条形图表示。(D类)si-GABARAPL1plus转染后自噬体的形成miR-195型抑制剂或si-NC plusmiR-195型使用TEM观察到的抑制剂*P(P)<0.05.
图6
图6。GABARAPL1沉默降低了miR-195型低氧条件下hEPCs对细胞增殖、迁移和血管生成的抑制作用
(A类)si-GABARAPL1+的作用miR-195型抑制剂或si-NC plusmiR-195型转染1、2、3d后用细胞增殖试验检测缺氧条件下细胞增殖抑制因子。(B类)显示了所示实验组每个场中迁移细胞的平均数量。(C类)显示了EPC迁移的典型图像。(D类)显示了所示实验组中每个场的平均管数。(E类)显示了毛细管形成的典型图像。

类似文章

引用人

工具书类

    1. Zampetaki A.,Kirton J.P.,Xu Q.内皮祖细胞修复血管。心血管疾病。2008年决议;78:413–421. doi:10.1093/cvr/cvn081。-内政部-公共医学
    1. Wysowski D.K.、Nourjah P.、Swartz L.使用华法林导致的出血并发症:导致监管行动的普遍不良影响。架构(architecture)。实习生。2007年医学会;167:1414–1419. doi:10.1001/archinte.67.13.1414。-内政部-公共医学
    1. Alban S.肝素的不良反应。实验药理学。2012;207:211–263。doi:10.1007/978-3642-23056-1。-内政部-公共医学
    1. Miller-Kasprzak E.,Jagodzinski P.P.内皮祖细胞是一种有助于血管修复的新制剂。架构(architecture)。免疫学。Ther公司。2007年到期;55:247–259. doi:10.1007/s00005-007-0027-5。-内政部-公共医学
    1. Balistreri C.R.、Buffa S.、Pisano C.、Lio D.、Ruvolo G.、Mazzesi G.内皮祖细胞是心血管疾病的真正解决方案吗?关注争议和观点。生物识别。2015年国际研究报告;835934:5.-项目管理咨询公司-公共医学

出版物类型

MeSH术语