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.2016:2016:9160540.
doi:10.1155/2016/9160540。 Epub 2016年8月8日。

交联肥大细胞特异性神经节苷脂刺激新形成的脂质介质和新合成的细胞因子的释放

附属公司

交联肥大细胞特异性神经节苷脂刺激新形成的脂质介质和新合成的细胞因子的释放

Edismauro Garcia Freitas Filho公司等。 调解人炎症. 2016.

摘要

肥大细胞是参与炎症过程的免疫调节细胞。mAbAA4介导的肥大细胞特异性GD1b衍生神经节苷脂的交叉链接导致肥大细胞的部分激活,而不释放预先形成的介质。本研究考察了神经节苷脂交联后新形成和新合成介质的释放。神经节苷脂与单抗AA4交叉连接后,释放新形成的脂质介质前列腺素D2和E2,而不释放白三烯B4和C4。然后研究交联这些神经节苷脂对花生四烯酸级联反应中酶活性的影响。神经节苷脂交联导致胞浆磷脂酶A2磷酸化,并增加环氧合酶-2的表达。神经节苷脂交联不会诱导5-脂氧合酶从胞浆转移到细胞核。GD1b衍生神经节苷脂的交叉链接也导致新合成的介质白介素-4、白介素-6和TNF-α的释放。然后研究神经节苷脂交联对MAP激酶通路的影响。神经节苷脂的交联诱导ERK1/2、JNK1/2和p38的磷酸化,并以Syk依赖的方式激活NFκB和NFAT。因此,交联肥大细胞特异性GD1b衍生神经节苷脂导致信号通路激活,最终释放新形成和新合成的介质。

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数字

图1
图1
mAbAA4诱导的交叉连接GD1b衍生神经节苷脂依赖Syk释放PGD2和PGE2.通过Fc刺激ε用IgE抗TNP致敏RI、RBL-2H3细胞和C4A2 Syk阴性细胞,并用DNP刺激48-HSA(50纳克/毫升)。对于FcεRI非依赖性刺激,细胞与钙离子载体(0.1μg/mL)。为了交联GD1b衍生的神经节苷脂,用mAbAA4(1、2.5、5和10)培养细胞μg/mL)。非刺激性(NS)细胞作为阴性对照。30天后收集培养上清液孵育分钟以评估立即释放(a和c)或将细胞孵育1h,再冲洗培养3次收集h和培养上清液以评估延迟释放(b和d)。第页2(a和b)和PGE2通过EIA测定培养上清液中的(c和d)。数据表示为三个独立实验的平均值±SD。 P(P)实验样品与非刺激(NS)细胞之间的差异<0.05。# P(P)实验样品与Fc之间<0.05εRI刺激RBL-2H3细胞。
图2
图2
mAbAA4产生的交叉链接GD1b衍生神经节苷脂增加cPLA2磷酸化和诱导COX-2表达。通过Fc刺激RBL-2H3肥大细胞εRI,通过IgE抗TNP致敏细胞和DNP刺激细胞48-HSA(50ng/mL),或用mAbAA4(1、2.5、5和10)培养细胞μg/mL),适用于5最小值(cPLA2磷酸化)或1h,然后冲洗并培养额外的3个h(COX-2表达)。用抗p-cPLA抗体对总细胞裂解物进行免疫印迹2,cPLA2、COX-2和α/β-测定微管蛋白(管家蛋白)和条带的平均光密度。蛋白质表达和磷酸化变化的密度测定得到了校正α/β-微管蛋白。数据表示为非刺激(NS)细胞的倍数。(a) 磷酸化cPLA比率2/总cPLA2; (b) 来自(a)的代表性印迹;(c) COX-2比值/α/β-微管蛋白;(d) 来自(c)的代表性斑点。数据表示为三个独立实验的平均值±SD。 P(P)实验样品和非刺激(NS)细胞之间的差异<0.05。# P(P)实验样品和Fc之间<0.05εRI刺激细胞。
图3
图3
GD1b衍生的神经节苷脂与mAbAA4的交叉链接可诱导IL-4、IL-6和TNF的释放-α以依赖Syk的方式。通过Fc刺激ε用IgE抗TNP致敏RI、RBL-2H3细胞和C4A2 Syk阴性细胞,并用DNP刺激48-HSA(50纳克/毫升)。对于FcεRI非依赖性刺激,将细胞与钙离子载体(0.1μg/mL)。为了交联GD1b衍生的神经节苷脂,用mAbAA4(1、2.5、5和10)培养细胞μg/mL)。非刺激性(NS)细胞作为阴性对照。收集培养上清液1刺激后h,将细胞冲洗并培养11个h评估细胞因子释放。IL-4(a)、IL-6(b)和TNF-α(c) 用ELISA法在培养上清液中测定。数据表示为三个独立实验的平均值±SD。 P(P)实验样品和非刺激(NS)细胞之间的差异<0.05。# P(P)实验样品与Fc之间<0.05εRI刺激RBL-2H3细胞。
图4
图4
与mAbAA4交叉连接的GD1b衍生神经节苷脂诱导肥大细胞MAP激酶磷酸化。RBL-2H3细胞通过Fc刺激εRI,其中细胞用IgE抗TNP致敏,并用DNP刺激48-HSA(50ng/mL)或与mAbAA4(1、2.5、5和10)孵育μg/mL),适用于10用抗磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)、ERK1/2、磷酸化JNK1/2(p-JNK1/2)、JNK1/1、磷酸化p38(p-p38)、p38和α/β-测定微管蛋白(管家蛋白)和条带的平均光密度。蛋白质表达和磷酸化变化的密度测定得到了校正α/β-微管蛋白。数据表示为非刺激(NS)细胞的倍数。(a) 磷酸化ERK1/2/总ERK1/2的比率;(b) 来自(a)的代表性印迹;(c) 磷酸化JNK1/2/总JNK1/2的比率;(d) 来自(c)的代表性印迹;(e) 磷酸化p38占总p38的比例;(f) (e)的代表性污点。数据表示为三个独立实验的平均值±SD。 P(P)实验样品和非刺激(NS)细胞之间的差异<0.05。# P(P)实验样品与Fc之间<0.05εRI刺激细胞。
图5
图5
mAbAA4介导的GD1b衍生神经节苷脂交联诱导转录因子NF活化κB和NFAT。法国试验标准κ用IgE抗TNP致敏B2细胞、VB9细胞、IC2细胞和IH10细胞,并用DNP刺激48-HSA(50纳克/毫升)h,再冲洗培养5次h(a);法国试验标准κB) 或15h(b);NFAT)。对于FcεRI非依赖性刺激,细胞与钙离子载体(0.1μg/mL)。为了交联GD1b衍生的神经节苷脂,用mAbAA4(1、2.5、5和10)培养细胞μg/mL)。流式细胞术分析GFP的表达。数据表示为三个独立实验的平均值±SD。 P(P)实验样品和非刺激(NS)细胞之间的差异<0.05。# P(P)实验样品与Fc之间<0.05εRI刺激细胞。

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工具书类

    1. Silveira e Souza A.M.M.、Jamur M.C.和Oliver C.神经节苷脂在肥大细胞生物学中的重要性。作者:佐佐木D.,编辑。糖脂:新研究。美国纽约州纽约市:Nova Science;2008年,第53-78页。
    1. Yu R.K.、Tsai Y.-T.、Ariga T.、Yanagisawa M.神经节苷脂的结构、生物合成和功能概述。Oleo科学杂志。2011;60(10):537–544. doi:10.5650/jos.60.537。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Daniotti J.L.、Lardone R.D.、Vilcaes A.A.肿瘤细胞糖脂表达失调:从抗肿瘤免疫的负调节剂到开发治疗药物的潜在靶点。肿瘤学前沿。2016;第300条doi:10.3389/fonc.2015.00300。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. da Silva E.Z.M.,Jamur M.C.,Oliver C.肥大细胞功能:旧细胞的新视角。组织化学和细胞化学杂志。2014;62(10):698–738. doi:10.1369/0022155414545334。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Galli S.J.肥大细胞IgE悖论:从体内平衡到过敏反应。美国病理学杂志。2016;186(2):212–224。doi:10.1016/j.ajpath.2015.07.025。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

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