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.2016年10月;14(4):3179-83.
doi:10.3892/mmr.2016.5591。 Epub 2016年8月4日。

天然化合物长圆形叶素C抑制人胆管癌QBC939细胞自噬流量,诱导细胞凋亡和线粒体功能障碍

附属公司

天然化合物长圆形叶素C抑制人胆管癌QBC939细胞自噬流量,诱导细胞凋亡和线粒体功能障碍

张爱青等。 摩尔医学代表. 2016年10月.

摘要

这些从天然植物或微生物中获得的化合物可能会成为治疗胆管癌的潜在策略之一。香豆素C(OC)是从云南藤黄中提取纯化的一种天然小分子化合物,能激活人宫颈癌细胞的线粒体凋亡途径。然而,OC对胆管癌细胞的直接作用尚不明确。通过甲基噻唑四氮唑分析、线粒体膜电位、ATP含量和蛋白质印迹分析,研究了OC对培养的QBC939细胞凋亡的影响及其潜在机制。本研究报告称,体外治疗不同浓度(5、10、20和40µM)OC的人胆管癌QBC939细胞会降低细胞活力,并以剂量依赖的方式诱导细胞凋亡。本研究的结果还表明,OC‑诱导的QBC939细胞凋亡是通过抑制自噬和线粒体功能障碍(MtD)介导的。此外,抑制自噬增加了OC诱导的细胞凋亡和MtD,而暴露于自噬诱导剂雷帕霉素会减弱这些变化。总之,据我们所知,本研究的结果是首次通过调节自噬和MtD,在体外确定OC是一种对抗人类胆管癌QBC939细胞的化疗药物。

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数字

图1
图1
用OC处理QBC939细胞会抑制细胞活性,并以剂量依赖的方式诱导细胞死亡。(A) OC的化学结构。(B) OC对QBC939细胞活性的剂量依赖性影响。(C) OC对QBC939细胞的凋亡作用。数值表示为六个独立实验的平均值±标准偏差。#与对照组相比,P<0.05。OC,长圆形C。
图2
图2
OC以剂量依赖的方式抑制QBC939细胞的自噬通量。(A) 采用Western blot分析法检测未经或经不同浓度OC(0、5、10、20和40)处理的QBC939细胞中LC3II/LC3I、p62和β-actin的蛋白表达μM) 如图所示,持续48小时。(B) 图示显示了用β-肌动蛋白标准化后LC3II/LC3I和p62的相对丰度。数据表示为三个独立实验平均值的平均值±标准误差。#与对照组相比,P<0.05。OC,长圆形C;LC3,微管相关蛋白轻链3。
图3
图3
OC以剂量依赖的方式抑制QBC939细胞的线粒体功能障碍。将汇合的QBC939细胞暴露于载体(培养基)或不同浓度的OC(0、5、10、20和40μM) 48小时。(A)测定线粒体膜电位和(B)ATP含量。数值表示为平均值±标准偏差(n=6)。#与对照组相比,P<0.05。OC,长圆形C;三磷酸腺苷。
图4
图4
自噬影响OC诱导的QBC939细胞凋亡和线粒体功能障碍。将汇合的QBC939细胞暴露于载体(培养基)或10μM OC在加入或不加入3-MA或RP的条件下24 h。(A)Western blot分析显示LC3II/LC3I、p62和β-actin的蛋白表达。(B) 图示显示了用β-肌动蛋白标准化后LC3II/LC3I和p62的相对丰度。(C) 检测线粒体膜电位、(D)ATP含量和(E)细胞凋亡。数值表示为平均值±标准偏差(n=6)。#与对照组相比P<0.05;*与OC相比,P<0.05。OC、oblongifolin C;三磷酸腺苷;3-甲基腺嘌呤;RP,雷帕霉素。

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