Grape seed proanthocyanidin extract protects the retina against early diabetic injury by activating the Nrf2 pathway

doi:10.3892/etm.2016.3033

.2016年4月；11（4）：1253-1258。

doi:10.3892/etm.2016.3033。 Epub 2016年1月29日。

葡萄籽原花青素提取物通过激活Nrf2通路保护视网膜免受早期糖尿病损伤

孙燕¹, 蔡美秀², 刘伟¹, 袁涛¹, 王建荣¹, Y I区³

附属公司

¹济南市第二人民医院眼科，山东济南250001。
²中华人民共和国山东省烟台市青岛大学医学院附属烟台玉皇顶医院眼科264000。
³山东大学齐鲁医院眼科，山东济南250012。

PMID： 27073432
预防性维修识别码：项目经理4812468
内政部： 10.3892/等2016.3033

葡萄籽原花青素提取物通过激活Nrf2通路保护视网膜免受早期糖尿病损伤

孙燕等。实验治疗学. 2016年4月.

.2016年4月；11(4):1253-1258.

doi:10.3892/etm.2016.3033。 Epub 2016年1月29日。

作者

孙燕¹, 蔡美秀², 刘伟¹, 袁涛¹, 王建荣¹, Y I区³

附属公司

¹济南市第二人民医院眼科，山东济南250001。
²中国山东省烟台市青岛大学医学院附属烟台玉皇顶医院眼科，264000。
³山东大学齐鲁医院眼科，山东济南250012。

PMID： 27073432
预防性维修识别码：项目经理4812468
内政部： 10.3892年3月16日/3033

摘要

本研究旨在研究葡萄籽原花青素提取物（GSPE）是否对糖尿病视网膜功能具有保护作用。共30只Wistar大鼠被随机分为三个相等的组，包括对照组、糖尿病组和GSPE治疗糖尿病组。采集视网膜组织，然后用苏木精和伊红染色。使用相应的检测试剂盒评估超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和甲烷二羧酸醛（MDA）水平；而核红细胞2相关因子2（Nrf2）和血红素加氧酶（HO）-1的表达水平则通过免疫组织化学和western blot分析进行评估。用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口标记法检测视网膜细胞凋亡。结果表明，与对照组大鼠相比，糖尿病大鼠视网膜结构受损。值得注意的是，与糖尿病组相比，经GSPE治疗的糖尿病组的视网膜结构有所改善。与糖尿病组相比，经GSPE治疗的糖尿病组大鼠视网膜中的SOD和GSH-Px活性显著增加（分别为P=0.011和P=0.001）。此外，与糖尿病组相比，GSPE治疗糖尿病组大鼠的MDA显著降低（P=0.013），Nrf2和HO-1在膀胱中的表达水平显著升高（分别为P=0.038和P=0.043）。糖尿病组视网膜细胞凋亡明显高于对照组（P<0.001）；与糖尿病组相比，经GSPE治疗的糖尿病组也显著降低（P=0.014）。这些结果表明，服用GSPE可能通过激活Nrf2通路改善氧化应激介导的损伤，从而保护视网膜免受高血糖损伤。

关键词：细胞凋亡；糖尿病性视网膜病变；葡萄籽原花青素提取物；核红系2相关因子2；氧化应激。

PubMed免责声明

数字

**图1。**
糖尿病诱导和GSPE治疗2个月后大鼠的视网膜形态。对照组和DM+GSPE组的视网膜高度组织化，检测到完整的层；而DM组表现出视网膜紊乱，层受损（标尺，20µm；染色，苏木精和曙红）。糖尿病；葡萄籽原花青素提取物。

**图2。**
对照组、DM组和DM+GSPE组中Nrf2和HO-1的表达水平。（A）免疫组织化学分析显示，DM+GSPE组大鼠视网膜中Nrf2表达水平增加。Nrf2主要表达于视网膜的神经纤维、神经节细胞和内网状层（标尺，20µm；染色剂，苏木精）。（B） Western blot分析显示，与DM组相比，DM+GSPE组的细胞核Nrf2表达水平增加。（C） Western blot分析显示，与DM组相比，DM+GSPE组的细胞质HO-1表达水平增加*与糖尿病组相比，P=0.038；^#P=0.043 vs.糖尿病组（n=6）。糖尿病；葡萄籽原花青素提取物；核因子红细胞2相关因子2；HO-1，血红素加氧酶-1。

**图3。**
对照组、DM组和GSPE治疗DM组的视网膜细胞凋亡。（A） TUNEL染色显示对照组、DM组和GSPE治疗的DM组视网膜细胞凋亡。DAPI（蓝色），箭头表示视网膜细胞凋亡（红色；标尺，50µm）。（B） TUNEL染色后，在550nm激发下观察玻片，红色荧光细胞被定义为凋亡细胞*与对照组（n=5）相比，P=0<001；^#与DM组（n=5）相比，P=0.014。DAPI，4′6′-二氨基-2-苯基吲哚盐酸盐；末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP镍标记；糖尿病；葡萄籽原花青素提取物。

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