Hepatoprotective effect of resveratrol against ethanol-induced oxidative stress through induction of superoxide dismutase in vivo and in vitro

doi:10.3892/etm.2016.3077

.2016年4月；11(4):1231-1238.

doi:10.3892/etm.2016.3077。 Epub 2016年2月16日。

白藜芦醇通过诱导超氧化物歧化酶对乙醇诱导的氧化应激的肝保护作用体内和在体外

陈伟明¹, 李·辛·肖², 佩久昌³, 董水义⁴, 特胜长⁵, 钱恒深⁵, 谢永裕⁴, 郭良伟⁴

附属公司

¹中华人民共和国台湾嘉义市浦子长庚纪念医院内科消化与肝病科，邮编61363。；长庚大学医学院临床医学研究所，台湾桃园333。；台湾桃园333长庚大学医学院。
²国立杨明大学传统医学研究所，台湾台北11221。
³长庚大学医学院临床医学研究所，台湾桃园333。
⁴中华人民共和国台湾嘉义市浦子长庚纪念医院内科消化与肝病科，邮编61363。；台湾桃园333长庚大学医学院。
⁵中华人民共和国台湾嘉义市浦子长庚纪念医院内科胃肠病和肝病科，邮编61363。；长庚大学医学院临床医学研究所，台湾桃园333。

PMID： 27073428
预防性维修识别码：项目经理4812565
内政部： 10.3892/等2016.3077

白藜芦醇通过诱导超氧化物歧化酶对乙醇诱导的氧化应激的肝保护作用体内和在体外

陈伟明等。实验治疗学. 2016年4月.

.2016年4月；11(4):1231-1238.

doi:10.3892/etm.2016.3077。 Epub 2016年2月16日。

作者

陈伟明¹, 李·辛·肖², Pey-Jium Chang公司³, 董水义⁴, 特胜长⁵, 钱恒深⁵, 谢永裕⁴, 郭良伟⁴

附属公司

¹中华人民共和国台湾嘉义市浦子长庚纪念医院内科消化与肝病科，邮编61363。；长庚大学医学院临床医学研究所，台湾桃园333。；台湾桃园333长庚大学医学院。
²国立杨明大学传统医学研究所，台湾台北11221。
³长庚大学医学院临床医学研究所，台湾桃园333。
⁴中华人民共和国台湾嘉义市浦子长庚纪念医院内科胃肠病和肝病科，邮编61363。；台湾桃园333长庚大学医学院。
⁵中华人民共和国台湾嘉义市浦子长庚纪念医院内科消化与肝病科，邮编61363。；长庚大学医学院临床医学研究所，台湾桃园333。

PMID： 27073428
预防性维修识别码：项目经理4812565
内政部： 10.3892/等2016.3077

摘要

本研究旨在研究白藜芦醇（RSV）对乙醇诱导的氧化应激的肝保护作用体内，并研究RSV对肝细胞发挥抗氧化作用的潜在机制。C57BL/6J小鼠分为四组：未处理对照组、乙醇处理组、RSV处理组和乙醇+RSV处理。分析血脂谱、肝脏脂质蓄积和抗氧化酶活性。以HepG2细胞为细胞模型，分析超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）和过氧化物酶体增殖物激活受体（PPAR）在RSV介导的乙醇诱导氧化应激保护中的作用。在C57BL/6J小鼠中，乙醇导致血浆甘油三酯水平和肝脏脂质积聚显著增加（P<0.05），而RSV显著增加SOD活性。在HepG2细胞中，RSV处理的HepG2细胞中SOD活性增强，而CAT和GPx的活性不受影响。Western blot和定量聚合酶链反应分析显示RSV显著增加SOD蛋白和mRNA表达水平（P<0.05）。通过瞬时转染实验，观察到PPARγ参与RSV给药HepG2细胞中SOD基因表达的调节。总之，本研究的结果表明，RSV可能通过诱导SOD活性和基因表达，有助于保护肝细胞免受乙醇诱导的氧化应激。

关键词：抗氧化酶；乙醇；氧化应激；过氧化物酶体增殖物激活受体；白藜芦醇。

PubMed免责声明

数字

**图1。**
用油红O染色的（A）对照组、（B）乙醇组、（C）白藜芦醇组和（D）乙醇+白藜芦醇组小鼠肝组织的代表性显微照片（放大倍数x200）。

**图2。**
乙醇和白藜芦醇对细胞活力和ROS生成的影响。（A）用50、100、200和400 mM乙醇、白藜芦醇和乙醇加白藜芦醇处理HepG2细胞24小时。用MTT法评估白藜芦》对细胞活力的影响。所有值都以对照组的百分比表示，该百分比设置为100%。（B）通过将2′，7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯转化为2′，7'-二氯二氢荧光素来测定活性氧的产生。结果表示为与对照组相比的相对荧光强度，设置为1。数据以平均值±标准误差（n=3-5）*P<0.05表示，与对照组相比。活性氧。

**图3。**
C、E和RSV对抗氧化酶活性的影响。分析了（A）SOD、（B）CAT和（C）GPx的酶活性。结果代表了四种不同的分析。数据表示为平均值±标准误差*与对照组相比，P<0.05。C、控制；E、乙醇；RSV，白藜芦醇；SOD、超氧化物歧化酶；过氧化氢酶；谷胱甘肽过氧化物酶。

**图4。**
E和RSV对抗氧化酶mRNA和蛋白表达的影响。分析（A）SOD、（B）CAT和（C）GPx的Western blot和定量蛋白表达水平，以及（D）SOD，（E）CAT及（F）GPx mRNA水平。结果显示为四个实验的平均±标准误差*与对照组相比P＜0.05。C、控制；E、乙醇；RSV，白藜芦醇；SOD、超氧化物歧化酶；过氧化氢酶；谷胱甘肽过氧化物酶。

**图5。**
E和RSV对PPAR表达和活性的影响。（A） PPARα、PPARβ/δ和PPARγ的相对蛋白表达水平使用补充乙醇和/或呼吸道合胞病毒的HepG2细胞24小时的核提取物的蛋白质印迹分析来测量。（B）PPAR蛋白水平的诱导倍数相对于对照表达，设定为1。数据表示为平均值±标准误差（n=4）。（C） PPARα、PPARβ/δ和PPARγ的转录活性分别通过使用带有PPRE-luc的HepG2细胞和pGSH-PPARα，pCMX-hPPARβ-δ或pCMX-h PPARγ质粒的转染实验进行评估。结果显示为通过将归一化荧光素酶活性与报告载体PPRE-luc分开而获得的相对荧光素酶活性*与对照组相比，P<0.05（n=4）。增殖物激活受体；C、控制；E、乙醇；呼吸道合胞病毒、白藜芦醇。

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