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.2016年3月:83:283-93。
doi:10.1016/j.biomaterials.2016.01.005。 Epub 2016年1月5日。

POSS纳米复合材料的表面改性以增强合成生物支架的细胞整合

附属公司

POSS纳米复合材料的表面改性以增强合成生物支架的细胞集成

克莱尔·克劳利等。 生物材料. 2016年3月.

摘要

多面体低聚倍半硅氧烷聚(碳酸盐-尿素)氨基甲酸乙酯(POSS-PCU)是一种多功能纳米复合生物材料,作为组织工程的生物支架应用日益广泛。合成植入物与宿主组织的整合可能存在问题,但可以通过地形改性加以改进。我们描述了通过在材料表面分散致孔剂(碳酸氢钠(NaHCO3)、氯化钠(NaCl)和蔗糖)来优化POSS-PCU,其主要目的是增加表面孔隙度,从而为改善细胞和血管生长提供额外机会。我们评估了成孔剂对材料的机械强度、表面化学、润湿性和细胞相容性的影响。用扫描电子显微镜(SEM)表征表面孔隙度。表面化学和润湿性没有变化,仅检测到机械性能的轻微变化。成孔剂的大小与所生成结构的孔隙度密切相关,较大的成孔剂改善了结构内空间的互连性。使用原代人支气管上皮细胞(HBEC),我们证明所有表面修饰的体外细胞相容性适中;然而,较大的孔隙导致细胞聚集。这些细胞能够在POSS-PCU支架上分化。体内支架植入表明,较大的孔径有利于细胞整合和血管长入。这些实验表明,用大孔剂进行表面修饰可以改善POSS-PCU纳米复合支架的整合,并表明需要在上皮覆盖所需的无孔表面和合成支架整合和血管化所需的多孔结构之间取得平衡结构设计。

关键词:生物相容材料;纳米复合材料;多孔性;再上皮化;组织工程;气管。

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数字

图1
图1
不同表面孔隙率的POSS-PCU支架的特性。(A) 对支架的最大应力、应变百分比和杨氏模量进行了分析,结果表明支架之间的变化最小。(B) ATR-FTIR光谱显示支架之间没有变化。(C) 通过外加气泡接触角的表面湿度也保持不变。(D) 渗透性测试显示,在撒上蔗糖后发生了最显著的变化,这增加了通过支架的流速。实验一式三份,并使用Kruskal–Wallis检验和Dunn修正进行多重比较分析。统计显著性显示为*p<0.05,**p<0.01。
图2
图2
表面除尘脚手架的表面形貌。(A) 使用扫描电子显微镜(SEM)图像和每种成孔剂类型确定的平均最大直径分析成孔剂尺寸。(B) 支架中每种致孔剂产生的孔径分析(n=50)。(C) 候选支架顶部表面和横截面的SEM图像(比例尺=100μm)。
图3
图3
人类支气管上皮细胞(HBEC)在POSS-PCU上的粘附、存活和生长。四种不同支架上细胞的代谢活性和胶原涂层组织培养塑料(TCP)对照组在5天内的代谢活性表示为培养过程中细胞中阿拉马蓝减少的百分比。实验一式三份,使用双向方差分析测试和Bonferroni后验进行分析。统计显著性显示为*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001。
图4
图4
人支气管上皮细胞(HBEC)粘附在表面修饰的POSS-PCU支架上,但聚集在支架上。HBEC以1×10的速度接种在脚手架上6细胞/厘米2种子接种后两天,戊二醛被固定,并通过扫描电子显微镜成像。顶部和中间行显示脚手架的灰尘表面分别为75×和400×。第三行显示放大的扫描电子显微镜图片,显示HBEC粘附在支架上,有早期细胞骨架发育、足突挤出和扁平化的证据。底部面板显示了放大75倍的脚手架横截面。
图5
图5
皮下或肌肉植入后表面修饰的POSS-PCU支架的整合。植入后4周和8周植入的蔗糖和无尘支架的组织学图像。支架要么植入皮下,要么植入肌肉。苏木精和伊红(H&E)染色显示细胞渗入支架,Masson三色显示基质沉积。这突出了在早期和晚期时间点植入肌肉和8周后植入皮下(比例尺=100μm)的蔗糖沉积支架中显著的细胞浸润和基质沉积。
图6
图6
POSS-PCU的蔗糖粉尘增加新血管生成体内植入后4周和8周,对植入的蔗糖和无尘样品进行免疫荧光染色。脚手架边缘用虚线高亮显示。DAPI核反染显示,与蔗糖沉积支架相比,未处理支架中的细胞浸润最小,而蔗糖沉积支架中的所有细胞都存在。CD31染色(白色箭头)证实蔗糖沉积支架内存在血管(比例尺=100μm)。
图7
图7
POSS-PCU的集成通过增加表面灰尘产生的表面孔隙度而得到改善。植入后4周和8周,植入粉尘和非粉尘POSS-PCU支架的横截面扫描电子显微镜(SEM)图像。与蔗糖覆盖的POSS-PCU支架相比,非覆盖的支架始终表现出具有最小整合的胶囊状结构,后者显示组织向内生长到单个孔中。

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