跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息,确保你在联邦政府政府网站。

HTTP服务器

该站点是安全的。
这个https(https)://确保您连接到官方网站,并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2016年1月19日;113(3):656-61.
doi:10.1073/pnas.1509834113。 Epub 2016年1月6日。

心外横隔/心外膜前内皮细胞模式胚胎冠状动脉-静脉连接

附属公司

心外横隔/心外膜前内皮细胞模式胚胎冠状动脉-静脉连接

埃琳娜·卡诺等。 美国国家科学院程序. .

摘要

最近的报道表明,哺乳动物胚胎冠状动脉内皮(CoE)起源于静脉窦和心室心内膜。然而,心外细胞对CoE的贡献被认为是次要的,对冠状动脉的形成没有显著影响。使用经典(Wt1(Cre))和以前未描述的(G2-Gata4(Cre。我们的结果表明,至少20%的胚胎冠状动脉和毛细血管内皮细胞来源于ST/PE室。此外,我们发现,G2-Gata4(Cre)小鼠ST/PE和Tie2(Cre。综上所述,我们的结果表明,ST/PE衍生的内皮细胞对正确的冠状血管形态发生有重要贡献,并且是其所必需的。

关键词:Gata4;Wt1;冠状动脉内皮;心外膜前;横隔。

PubMed免责声明

利益冲突声明

作者声明没有利益冲突。

数字

图1。
图1。
ST/PE G2型-Gata4公司整个心脏发育过程中的细胞。(A类B类)G2级-Gata4公司LacZ公司小鼠在E9.5时横隔(包括PE)显示报告活性(A类)E11.5时流入心肌(B类,箭头)。(C类D类)G2免疫组织化学-Gata4公司克里夫兰+示例说明了GATA4的表达(C类)和WT1(D类)G2中的蛋白质-Gata4公司克里夫兰+E9.5 PE处的电池(E类F′)G2级-Gata4型CreYFP公司小鼠G2数量增加-Gata4公司克里夫兰+E10.5期和E14.5期之间心外膜下和心肌内发育中的心外膜细胞。心外膜包括WT1+/G2级-Gata4公司+(箭头)和WT1+/G2级-Gata4公司单元格(F类,箭头)。少数EPDC暂时保留WT1的表达(F类F′,白色箭头),但其他EPDC不(F′,黑色箭头)。(G公司)重量1基因表达在心外膜明显,但仅限于少数EPDC(箭头)。(H(H))E14.5–18.5处EPDC通过心肌壁的渐进性扩张与G2平行-Gata4公司克里夫兰+合并发展冠状血管(箭头)。(J)3D重建()和组织切片分析(J)发展中的冠状血管允许血管周围细胞(箭头所示J)区别于G2-Gata4公司克里夫兰+CoE细胞(箭头在J). (K(K)L(左))通过Notch1胞内结构域(N1ICD)核定位对活性Notch1信号的识别证实了这些血管的动脉性质(箭头)。A、 中庭;AVC、房室管;ENDO,心内膜;EPI,心外膜;IVS,室间隔;MYO,心肌;PE,心外膜前;ST,横隔;五、 心室。(比例尺:100µm inA类B类; 50µm英寸C类H(H); 40µm英寸; 10µm英寸J; 25µm英寸K(K); 5µm英寸L(左)
图S1。
图S1。
ST/PE衍生内皮细胞的起源和血管化特性。(A类D类)Cre重组酶在G2中的表达CreYFP公司胚胎在E12.5流入心肌中很明显(A类)主动脉壁E13.5处(C类,箭头),但不在E12.5处的心外膜中(B类)E13.5处的心外膜或心肌层(D类). (E类F类)在G2中克里夫兰胚胎,心内静脉窦为YFP(箭头在E类). 一些G2-Gata4公司克里夫兰+/CD31型+细胞也可以被合并在心室内膜中(箭头位于F类). (G公司)鹌鹑至雏鸡PE嵌合体移植中,也会出现PE衍生内皮细胞在心室内膜的融合。表达鹌鹑全核标记物QCPN(绿色)的PE衍生物侵入肌球蛋白表达的心室壁(MF20+,红色);其中一些细胞并入心室内膜(箭头)。(H(H))通过QH1内皮标记物(红色)的表达进一步证实了这些鹌鹑PE衍生细胞的内皮特性。FITC-共轭后烹饪镜头心内膜(绿色)、PE-衍生CoE细胞(星号)的凝集素反染很容易与心内膜融合的细胞(箭头)区分开来。(L(左))无PE组织(与哺乳动物ST同源)的后心包间质移植使胚胎心肌(绿色QH1)广泛血管化+中的单元格J; 箭头在标记这些细胞在房室管的积聚)。封闭的区域J放大K(K)显示心肌层的内皮细胞侵袭(红色,cTNI+)从心外膜下间隙(箭头)。同样的现象在房室管也很明显(如箭头所示L(左)). 一些ST衍生的内皮细胞也合并在心内膜中(箭头位于K(K)). A、 中庭;AE,心房内膜;房室管;CVM,致密性心室内膜;ENDO,心内膜;EPI,心外膜;LA,左心房;左心室;右心房;右心室;SE,心外膜下;SV,静脉窦;小梁心室肌;五、 心室。(比例尺:25µm inA类B类; 50µm英寸C类H(H)和L;150µm英寸J; 75µm英寸K(K)
图S2。
图S2。
E9.5 PE具有内在的血管潜能。(A类)半定量RT-PCR证实E9.5 PE细胞表达血管祖细胞(Scl公司/塔尔1/素食者-2)和内皮细胞(CD31)标记物。(B类C类)PE中CD31的低表达与分化CD31的积累相一致+PE背面的CoE细胞(B类C类; 整个PE用虚线标记C类). (D类F类)体外培养E9.5 PE分化为CD31+CoE细胞仅在存在VEGF的情况下(比较E类F类具有D类). (比例尺:100µm)
图2。
图2。
重量1-表达细胞及其子代对CoE有贡献(A类B类)WT1蛋白在E10.5–E12.5的心外膜细胞和EPDC中广泛表达,与重量1促进者驱动GFP公司表达式(箭头)。(C类G公司)中的报表表达式重量1绿色荧光粉CD31中可以观察到胚胎+心外膜下的(E类E类“)和心肌内(F类G公司)E12.5–E14.5处的冠状血管(箭头所示D类G公司),但不是在早期发育阶段(C类). (H(H))有几个重量1GFP公司+/CD31型+在围产期仍能发现细胞(箭头所示)。(,我',以及J)早期重量1克里夫兰+细胞形成心外膜(箭头位于; 用黑色箭头标记的区域在中放大我')和第一个EPDC(如箭头所示J). 在E11.5许多重量1克里夫兰+心外膜细胞显示形态EMT特征(箭头位于我'). (JK(K))血统报告者与血管标记物CD31在E13.5之间的心外膜下和心肌内冠状丛中共定位(J)和E15.5(K(K))(箭头)。(L(左)O(运行))围产期(L(左)M(M))和新生儿(N个O(运行))爱心秀重量1克里夫兰+包含在CoE中的单元格(箭头位于L(左)O(运行))和CoSM层的大CoA(箭头位于M(M)和箭头O(运行))以及毛细血管(如箭头所示N个). (P(P)R(右))重量1CreERT2公司;罗莎26-E9.5用三苯氧胺诱导的YFP胚胎显示YFP+E.14.5冠状血管中的细胞合并(箭头)。(S公司)妊娠中期胚胎和新生儿分离心室的典型细胞图。数字表示事件总数的百分比。两者都是重量1克里夫兰+和G2克里夫兰+人群包括CD31+在单元格中。A、 中庭;AVC、房室管;CoA,冠状动脉;冠脉;ENDO,心内膜;EPI,心外膜;IVS,室间隔;五、 心室。(比例尺:100µm in; 50µm英寸A类,C类,D类,J,M(M),N个,以及P(P); 25µm英寸B类,F类H(H),K(K),以及L(左); 25µm英寸R(右); 10µm英寸E类E〃O(运行); 5µm英寸
图S3。
图S3。
E9.0小鼠心脏中Wt1谱系衍生的心肌细胞。(A类B类)少数重量1克里夫兰+在PE细胞转移到心肌表面之前或期间,可以在发育中的心脏中发现细胞(E9.5)。这些重量1克里夫兰+细胞表达心肌标记物(α-SMA;箭头A类)但不是血管标记物(CD31+) (B类). (C类)在心外膜早期(E10.5–11.5),一些罕见的心内膜重量1克里夫兰+/CD31型+细胞可以被记录下来(箭头)。(D类)心脏的总百分比重量1克里夫兰+和G2克里夫兰+显示了整个发育过程中的细胞。ENDO,心内膜;EPI,心外膜;MYO,心肌。(比例尺b粗糙度:50µm)
图3。
图3。
G2级-Gata4公司和有条件的系统重量1缺失扰乱了CoA的形成。(A类F类)G2型-Gata4型Cre公司;重量1LoxP/LoxP公司胚胎CoE结构畸形,无法接触到心内膜(比较中的双头箭头A类D类并将电影S3与电影S4进行比较)。突变体显示致密心肌厚度显著降低(对比B类E类). N1ICD免疫组织化学鉴定心肌内血管畸形为CoA(箭头位于C类F类)而心外膜下血管结构为N1ICD(预期CoV)。(G公司H(H))他莫昔芬诱导的(E10.5)全身性重量1缺失会急剧减少心肌内血管的数量。(I′′)心外膜下血管(箭头)形成正常。CoA,冠状动脉;冠脉;ENDO,心内膜;EPI,心外膜;五、 心室。(比例尺:50µm inA类B类; 25µm英寸C类; 50µm英寸D类,E类,G公司; 25µm英寸F类
图S4。
图S4。
G2级Cre公司-驱动Wt1删除。有效删除重量1在中G2-数据4血统通过WT1蛋白的缺失得到证实(比较A类C类)RALDH2酶的减少重量1目标(比较B类D类). ENDO,心内膜;心外膜;五、 心室。(比例尺:50µm)
图4。
图4。
内皮重量1表达是冠状动脉形成所必需的。(A类B类)对照组H&E染色部分重量1LoxP/LoxP公司+三苯氧胺(A类)和突变型领带CreERT2公司;重量1LoxP/LoxP公司+他莫昔芬(B类)E16.5胚胎。(C类F类)WT1+细胞对冠状血管的贡献(箭头所示C类)在突变体中减少(D类E类)、和重量1E16.5突变心脏的基因表达降低(F类). (G公司H(H))E16.5突变胚胎心脏显示致密室壁冠状动脉CD31减少+单元格(向内箭头H(H); 与…相比G公司). (J)CD31所占面积的量化+单元格()和CD31型基因表达(J)E16.5心脏。A、 中庭;EPI,心外膜;五、 心室。(比例尺:50µm)数据为平均值±SEM*P(P)< 0.05, ***P(P)<0.001。
图S5。
图S5。
Tie2-Cre铁路应急响应小组-驱动Wt1删除。Western blotting显示他莫昔芬诱导Wt1重组的特异性LoxP/LoxP公司小鼠与Tie2CreERT2公司;重量1LoxP/LoxP公司突变小鼠。
图5。
图5。
EPDC对CoE.ST/PE衍生内皮细胞(绿色)的作用模型产生心外膜和EPDC(A类C类)并并入心肌内CoA和毛细血管内皮(D类). 箭头颜色表示主要的跨壁内皮细胞流动;箭头大小估计事件的频率。A、 中庭;A-V,动静脉;CoA,冠状动脉;CoV:冠状静脉;EPI:心外膜;PE:心外膜前;ST,横隔;SV,静脉窦;五、 心室。

类似文章

引用人

  • 胚胎心外膜形成分子机制的新见解。
    Carmona R、López-Sánchez C、Garcia-Martinez V、Garcia-López V、Muñoz-Chápuli R、Lozano-Velasco E、Franco D。 Carmona R等人。 心血管疾病杂志。2023年10月24日;10(11):440. doi:10.3390/jcdd10110440。 心血管疾病杂志。2023 PMID:37998498 免费PMC文章。 审查。
  • 无冠状动脉的主动脉:一种罕见畸形的解剖变异。
    Karila-Cohen J、Laux D、Houyel L、Bonnet D。 Karila-Cohen J等人。 儿科心脏病学。2024年1月;45(1):200-207. doi:10.1007/s00246-023-03330-7。Epub 2023年11月7日。 儿科心脏病学。2024 PMID:37934240
  • 小鼠心脏小梁血管生成的先决条件心内膜-间质转换。
    Lu P、Wu B、Wang Y、Russell M、Liu Y、Bernard DJ、Zheng D、Zhou B。 Lu P等人。 开发单元。2023年5月8日;58(9):791-805.e4。doi:10.1016/j.devcel.2023.03.009。Epub 2023年4月5日。 开发单元。2023 PMID:37023750 免费PMC文章。
  • Cre-loxP介导的遗传谱系追踪:解开发育中心脏的细胞命运和起源。
    王T、陈X、王K、朱J、于X、王S、刘C、王K。 Wang T等。 《前心血管医学》,2023年2月27日;10:1085629. doi:10.3389/fcvm.2023.1085629。eCollection 2023年。 《Front Cardiovasc Med.2023》。 PMID:36923960 免费PMC文章。 审查。
  • Wt1的内皮细胞缺失破坏冠状动脉血管生成和心肌发育。
    Ramiro-Pareta M、Müller-Sánchez C、Portella-Fortuny R、Soler-Botija C、Torres-Cano A、Esteve-Codina A、BayéS-GeníS A、Reina M、Soriano FX、Montanez E、Martínez-Estrada OM。 Ramiro-Pareta M等人。 发展。2023年3月15日;150(6):设备201147。doi:10.1242/dev.201147。Epub 2023年3月27日。 发展。2023 PMID:36852644 免费PMC文章。

工具书类

    1. Pérez-Pomares JM,de la Pompa JL。心外膜和冠状动脉发育过程中的信号传导。Circ Res.2011;109(12):1429–1442.-公共医学
    1. Red-Horse K、Ueno H、Weissman IL、Krasnow MA。通过静脉细胞的发育重编程形成冠状动脉。自然。2010;464(7288):549–553.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Wu B,等。心内膜细胞通过心肌-心内膜VEGF信号传导的血管生成形成冠状动脉。单元格。2012;151(5):1083–1096.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. 田X等。血管形成。新生儿心脏中独特冠状血管群的从头形成。科学。2014;345(6192):90–94.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. 田X,蒲伟东,周波。冠状动脉血管生成的细胞起源和发育程序。2015年循环决议;116(3):515–530.-项目管理咨询公司-公共医学

出版物类型

MeSH术语