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.2015年8月;10(2):513-518.
doi:10.3892/etm.2015.2514。 Epub 2015年5月22日。

缺血后处理减轻肾缺血再灌注损伤大鼠炎症反应

附属公司

缺血后处理减轻肾缺血再灌注损伤大鼠炎症反应

陈慧(音)等。 实验治疗学. 2015年8月.

摘要

缺血后处理(IPoC)涉及在先前缺血的组织或器官中再灌注开始时应用的一系列短暂、快速、间歇性的缺血发作。以前的研究表明,IPoC可以减轻缺血再灌注(I/R)损伤引起的组织损伤。本研究的目的是研究IPoC是否对肾I/R损伤大鼠模型的炎症反应有有利影响。Wistar大鼠在缺血45分钟后再灌注24、72或120小时(I/R组)。在IPoC组中,对I/R大鼠进行6个周期的10秒再灌注,然后进行10秒缺血发作。采集血样以测定血尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)水平。此外,还进行了组织学检查和免疫组织化学染色,以确定核因子κB(NF-κB)的定位。此外,采用定量聚合酶链反应(qPCR)分析检测细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平,同时采用western blot分析检测NF-κB的蛋白表达水平。结果表明,I/R组BUN和Cr水平显著升高,而IPoC大鼠肾损伤明显减轻。免疫组织化学分析显示,IPoC可降低NF-κB的表达水平。此外,qPCR结果显示,IPoC显著抑制I/R损伤诱导的ICAM-1、IL-6和TNF-αmRNA表达水平的增加。Western blot分析表明,I/R组NF-κB的表达水平上调,而IPoC则抑制其表达。总之,IPoC被证明对肾脏I/R损伤具有强大的抗炎作用。

关键词:炎症;缺血再灌注损伤;缺血后处理;坏死因子-κB。

PubMed免责声明

数字

图1。
图1。
24小时后,IPoC对(A)血清Cr和(B)BUN浓度以及(C)Jablonski分级量表评分的影响。数据以平均值±标准误差表示*与假手术组相比,P<0.05;#与24小时I/R相比,P<0.05 Cr,肌酐;BUN,血尿素氮;虚伪、拙劣;I/R、缺血和再灌注;IPoC,缺血后处理。
图2。
图2。
采用苏木精-伊红(H&E)染色(放大倍数×200)评价组织学特征,同时采用免疫组织化学染色(放大倍率×400)研究核因子-κB(NF-κB)的表达。显示(A)假手术组、(B)I/R组和(C)IPoC组在24小时再灌注结束时用H&E染色的代表性肾脏切片。(D)假手术组、(E)I/R组和(F)IPoC组再灌注24小时结束时肾脏中NF-κB的表达。假的,假的;I/R、缺血和再灌注;IPoC,缺血后处理。
图3。
图3。
IPoC对缺血45分钟、再灌注24、72和120小时后肾脏中(A)ICAM-1、(B)IL-6和(C)TNF-αmRNA表达水平的影响。根据β-肌动蛋白标准化mRNA表达水平。数据表示为平均值±标准误差*与假手术组相比,P<0.05;#与24小时的I/R相比,P<0.05;与72小时I/R相比,P<0.05;与120小时I/R相比,P<0.05,TNF-α、肿瘤坏死因子-α;IL-6、IL-6;细胞间粘附分子-1;虚伪、拙劣;I/R、缺血和再灌注;IPoC,缺血后处理。
图4。
图4。
(A) 代表性的蛋白质印迹和(B)定量分析揭示了缺血45分钟后,再灌注24、72和120小时后,IPoC对肾脏NF-κB表达的影响。β-actin用于确保每条车道上装载等量的蛋白质。数据表示为平均值±标准误差*与假手术组相比,P<0.05;#与24小时I/R相比,P<0.05;与72小时I/R相比,P<0.05;与120小时I/R相比,P<0.05。NF-κB、核因子-κB;虚伪、拙劣;I/R、缺血和再灌注;IPoC,缺血后处理。

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