Diabetic Retinopathy: Retina-Specific Methods for Maintenance of Diabetic Rodents and Evaluation of Vascular Histopathology and Molecular Abnormalities

doi:10.1002/9780470942390.mo140190

.2015年9月1日；5(3):247-270.

doi:10.1002/9780470942390.mo140190。

糖尿病视网膜病变：糖尿病啮齿动物维持视网膜的特异性方法以及血管组织病理学和分子异常的评估

亚历山大·文斯特拉^1 2 三, 刘海涛老师^1 三, Chieh Allen Lee先生¹, 杜云鹏¹, 杰唐^1 2, 蒂莫西·科恩^1 2

附属公司

¹凯斯西储大学和凯斯医学中心，俄亥俄州克利夫兰。
²俄亥俄州克利夫兰市退伍军人管理医疗中心研究服务151号。
^三这些作者为这项工作做出了同等贡献。

PMID： 26331759
预防性维修识别码：项目经理4597317
内政部： 10.1002/9780470942390.mo140190

糖尿病视网膜病变：糖尿病啮齿动物维持视网膜的特异性方法以及血管组织病理学和分子异常的评估

亚历山大·文斯特拉等。 Curr Protoc小鼠生物. 2015.

.2015年9月1日；5(3):247-270.

doi:10.1002/9780470942390.mo140190。

作者

亚历山大·文斯特拉^1 2 三, 刘海涛老师^1 三, Chieh Allen Lee先生¹, 杜云鹏¹, 杰唐^1 2, 蒂莫西·科恩^1 2

附属公司

¹凯斯西储大学和凯斯医学中心，俄亥俄州克利夫兰。
²俄亥俄州克利夫兰市退伍军人管理医疗中心研究服务151号。
^三这些作者为这项工作做出了同等贡献。

PMID： 26331759
预防性维修识别码：项目经理4597317
内政部： 10.1002/9780470942390.mo140190

摘要

糖尿病视网膜病变是视力损害的主要原因，随着越来越多的人患上糖尿病，视力损害的患病率继续增加。尽管视力很重要，但视网膜是人体最小的组织之一，已经发展出专门的技术来研究视网膜病。本文总结了用于（i）诱导小鼠糖尿病，（ii）在典型血管组织病理学发展所需的整个月内维持糖尿病动物，（iii）评估糖尿病视网膜病变的血管组织病理，以及（iv）量化与视网膜病变发展相关的异常的几种方法。

关键词：糖尿病；小鼠；视网膜；视网膜病变；链脲佐菌素。

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图1
在弹性蛋白酶或胰蛋白酶消化法中用于分离视网膜血管的工具。图中显示了一个倒置的巴斯德吸管（用于拾取脆弱的视网膜或血管）、微型刮板、齿钳、2个单毛刷和Vannas微型剪刀。增加一便士用于尺寸比较。

图5
使用头发“刷子”固定视网膜，并在视网膜表面轻轻敲打去除神经元细胞。在这张高倍显微镜照片中，部分消化的视网膜被视为照片中心的一个白色肿块，两条棕色“线”是用来固定（照片左下角的头发环）和轻轻抚摸（右上角较薄的头发）视网膜以刷掉弱粘附的神经细胞的头发。

图6
使用显微剪刀从部分清洁的视网膜上去除粘附的玻璃体。与部分清洁视网膜（顶部）的象牙色/灰色相比，玻璃体（底部）非常透明无色。

图7
清洁视网膜血管系统的准备工作，当其漂浮在水中时，向下观察孤立血管系统的碗状结构。

图8
当视网膜漂浮在水中时，从侧面观察视网膜血管系统的清洁准备。视网膜的碗状保持不变。

图9
安装皿/解剖显微镜装置。解剖盘上有一个高架平台（黑色有机玻璃），上面放着一个干净的显微镜载玻片。将整个制剂浸没在干净的水中，然后将清洁的视网膜轻轻漂浮在显微镜载玻片上（以红色突出显示），并使用单毛刷固定在玻璃载玻片。然后，水慢慢从暗室中流出，流到照片的顶部。

**图10**
在玻璃显微镜载玻片上干燥的孤立视网膜血管的PAS-H染色。毛细血管中的周细胞核往往更圆形，染色更密集，而毛细血管中的内皮细胞核往往更长圆形，染色更不密集。显示退化（无细胞）毛细血管。

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