BAMBI Promotes C2C12 Myogenic Differentiation by Enhancing Wnt/β-Catenin Signaling

doi:10.3390/ijms160817734

.2015年8月3日；16(8):17734-45.

doi:10.3390/ijms160817734。

BAMBI通过增强Wnt/β-连环蛋白信号通路促进C2C12肌源性分化

张强玲¹, 新鹅食², 宋成创³, 孙士铎⁴, 公社杨⁵, 小李⁶

附属公司

¹西北农林科技大学动物科学与技术学院动物脂肪沉积与肌肉发育实验室，杨凌712100。langyan.95@163.com。
²西北农林大学动物科学技术学院动物脂肪沉积与肌肉发育实验室，杨凌712100。xineshi@nwsuaf.edu.cn。
³西北农林科技大学动物科学与技术学院动物脂肪沉积与肌肉发育实验室，杨凌712100。chengchuangsong@163.com。
⁴西北农林科技大学动物科学与技术学院动物脂肪沉积与肌肉发育实验室，杨凌712100。ssdsm@tom.com。
⁵西北农林科技大学动物科学与技术学院动物脂肪沉积与肌肉发育实验室，杨凌712100。gsyang999@hotmail.com。
⁶西北农林科技大学动物科学与技术学院动物脂肪沉积与肌肉发育实验室，杨凌712100。nicelixiao@nwsuaf.edu.cn。

PMID： 26247931
预防性维修识别码：项目经理4581218
内政部： 10.3390/ijms160817734

BAMBI通过增强Wnt/β-连环蛋白信号通路促进C2C12肌源性分化

张强玲等。国际分子科学杂志. 2015.

.2015年8月3日；16(8):17734-45.

doi:10.3390/ijms160817734。

作者

张强玲¹, 新鹅食², 宋成创³, 孙士铎⁴, 公社杨⁵, 小李⁶

附属公司

¹西北农林科技大学动物科学与技术学院动物脂肪沉积与肌肉发育实验室，杨凌712100。langyan.95@163.com。
²西北农林科技大学动物科学与技术学院动物脂肪沉积与肌肉发育实验室，杨凌712100。xineshi@nwsuaf.edu.cn。
³西北农林大学动物科学技术学院动物脂肪沉积与肌肉发育实验室，杨凌712100。chengchuangsong@163.com。
⁴西北农林科技大学动物科学与技术学院动物脂肪沉积与肌肉发育实验室，杨凌712100。ssdsm@tom.com。
⁵西北农林科技大学动物科学与技术学院动物脂肪沉积与肌肉发育实验室，杨凌712100。gsyang999@hotmail.com。
⁶西北农林科技大学动物科学与技术学院动物脂肪沉积与肌肉发育实验室，杨凌712100。nicelixiao@nwsuaf.edu.cn。

PMID： 26247931
预防性维修识别码：项目经理4581218
内政部： 10.3390/ijms160817734

摘要

骨形态发生蛋白和激活素膜结合抑制剂（BAMBI）被认为是细胞增殖和分化的重要调节因子，可抑制转化生长因子-β并增强各种细胞类型中Wnt/β-catenin信号传导。然而，其在骨骼肌中的作用仍基本未知。在本研究中，我们发现BAMBI的表达水平在C2C12啮齿类成肌细胞系的早期分化阶段达到峰值。通过siRNA敲除BAMBI抑制C2C12分化，表现为MyoD、MyoG和MyHC表达受到抑制以及分化和融合指数降低。BAMBI敲除降低了Wnt/β-catenin信号传导的活性，其特征是β-catentin的核转位减少和Axin2的转录降低，Axin1是Wnt/α-catenin信号传导途径的一个有充分文献记载的靶基因。此外，使用Wnt/β-catenin信号的激活剂LiCl治疗，挽救了BAMBI siRNA导致的C2C12分化减少。总之，我们的数据表明，正常C2C12的分化需要BAMBI，其在肌肉发生中的作用是由Wnt/？-catenin途径介导的。

关键词：班比；C2C12；氯化锂；Wnt/β-catenin；肌源性分化。

PubMed免责声明

数字

图1
时间mRNA表达谱*BAMBI公司*(一),*MyoD公司*(b条)和*MyHC公司*(**c（c）**)C2C12肌源性分化期间。结果表示为平均值±标准偏差。

图2
敲除BAMBI抑制肌源性分化。转染和成肌诱导48和96小时后收集所有细胞样本(一)BAMBI和GAPDH的western blot图像；(b条)siRNA干扰对小鼠脑组织mRNA和蛋白表达的影响*BAMBI公司*; (**c（c）**)mRNA的表达*MyoD公司*48小时和*肌细胞生成素*和*MyHC公司*96小时；(d日)48小时MyoD和96小时MyHC的western blot图像及其对应的GAPDH；(**e（电子）**)48小时MyoD和96小时MyHC的蛋白表达；(**（f）**)分化后96小时C2C12肌管中MyHC的免疫荧光，100倍放大拍摄图像；(克)肌管数量；(小时)分化指数；和(我)肌管融合指数。结果表示为平均值±SD；n个=3*第页< 0.05; **第页< 0.01.

图3
击倒*BAMBI公司*抑制Wnt/β-catenin信号传导。转染和肌细胞诱导48小时后，收集所有细胞样本(一)核β-连环蛋白和层粘连蛋白B1的western blot图像；(b条)核β-catenin蛋白水平；(**c（c）**)Axin2的mRNA表达；(d日)核β-catenin和层粘连蛋白B1的western blot图像；(**e（电子）**)核β-catenin蛋白水平；(**（f）**)Axin2的mRNA表达；(克)BAMBI和GAPDH的western blot图像；和(小时)BAMBI的mRNA和蛋白表达。结果表示为平均值±SD；n个= 3; *第页< 0.05; **第页< 0.01.

图4
氯化锂拯救了*BAMBI公司*C2C12肌源性分化的siRNA。转染和成肌诱导48和96小时后收集所有细胞样本(一)mRNA表达*MyoD公司*48小时和*肌细胞生成素*和*MyHC公司*96小时；(b条)西方印迹图像*MyoD公司*,*MyHC公司*，以及*GAPDH公司*; (**c（c）**)蛋白质的表达*MyoD公司*48小时和*MyHC公司*96小时；(d日)免疫荧光图像*MyHC公司*在分化后96小时的C2C12肌管中，以100倍放大率拍摄的图像；(**e（电子）**)肌管数量；(**（f）**)分化指数和(克)肌管融合指数。结果表示为平均值±SD；n个= 3; *第页< 0.05; **第页< 0.01.

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