跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

点政府

政府意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息,确保你在联邦政府政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https(https)://确保您连接到官方网站,并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2015年7月17日;10(7):e0132725。
doi:10.1371/journal.pone.0132725。 电子收集2015。

利用表达Far-Red荧光蛋白的细胞进行大鼠体内非侵袭性成像和肿瘤生长转移定量研究

附属公司

利用表达Far-Red荧光蛋白的细胞进行大鼠体内非侵袭性成像和肿瘤生长转移定量研究

手克里斯廷森等。 公共科学图书馆一号. .

摘要

非侵入性体内成像正在成为基础和临床前研究的重要工具。近红外(NIR)荧光染料和探针用于非侵入性光学成像,因为人体组织在NIR区域的吸收和自体荧光较低,因此允许更大的穿透深度和高信噪比。目前,细胞追踪系统依赖于在注射前标记细胞或在成像前注射针对所选细胞群的探针。这些方法无法对肿瘤生长进行成像,因为细胞标签在细胞分裂过程中被稀释。在本研究中,我们开发了稳定表达远红外荧光蛋白E2-Crimson的细胞系,从而能够连续检测和量化肿瘤生长。在异种移植物大鼠模型中,我们表明可以使用光学成像在5周内检测到E2-Crimson表达细胞。荧光强度与肿瘤体积和重量相关,并允许对整个肿瘤分区进行可靠和稳健的量化。使用一种新的注射方案,在大鼠模型中建立并验证了MDA-MB-231乳腺癌细胞在肺部的接种。

PubMed免责声明

利益冲突声明

竞争利益:提交人声明,不存在相互竞争的利益。

数字

图1
图1。体外表达E2-Crimson的细胞系分析。
使用FT在光学模体中测量不同数量的(A)MDA-E2、(B)HeLa-E2和(C)A594-E2细胞的荧光强度。仅在106细胞。比较E2-Crimson表达细胞和野生型亲本细胞系之间的(D-F)细胞活力和(G-I)迁移潜能。所有数据均表示为平均值±标准偏差。显著性采用Students t检验。n=3。
图2
图2。MDA-E2细胞的长期检测体内.
(A) 裸鼠侧腹注射MDA-E2或MDA-WT肿瘤细胞,用卡尺测量肿瘤大小。n=5–6。(B) 用FT扫描MDA-E2肿瘤大鼠。用卡尺测量左轴荧光强度(黑色三角形)和右轴肿瘤体积(灰色方块)。n=6。所有数据均表示为平均值±标准偏差。
图3
图3。肿瘤生长期间肿瘤中癌细胞浓度的测定。
使用线性回归法将MDA-E2肿瘤的荧光强度转换为细胞数(图1A)。对于每只动物,将计算的总细胞数除以通过(A)FT体积重建或(B)卡尺测量的相应肿瘤体积。黑色圆圈表示单个动物。所有数据均表示为平均值±标准偏差。n=6。
图4
图4。体内肿瘤肿块和血管系统的成像和可视化。
(A) FT 3D重建了一只患有MDA-E2肿瘤(绿色)和相关血管系统(红色)的大鼠的体积,使用AngioSense进行可视化。Bar表示4.1μm。(B)体外(A)中相应肿瘤的反射图像。Bar表示4.1μm。(C) 用CD31抗体(红色)和人细胞核(绿色)染色的(A)和(B)肿瘤的典型组织学图像。细胞核用DAPI(蓝色)染色。肿瘤块用(*)标记,周围血管化的宿主基质用(^)标记。条形图表示100μm。
图5
图5。体内肺部肿瘤的检测。
(A) 肿瘤细胞注射36天后,FT和μCT数据集的联合登记。浅灰色表示FT检测到的荧光信号,μCT显示骨骼结构,呈红色。(B)Ex活体对应肺部的反射图像。(C) 具有CD31抗体(红色)和人类细胞核抗体(绿色)的肺组织的典型组织学图像。细胞核用DAPI(蓝色)染色。人类肿瘤细胞簇用(*)标记。条形图表示100μm。

类似文章

引用人

工具书类

    1. 鹌鹑DF,Joyce JA。肿瘤进展和转移的微环境调控。《国家医学》2013;19(11):1423–37. 10.1038/3394海里-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Mao Y,Keller ET,Garfield DH,Shen K,Wang J.肿瘤微环境中的基质细胞与乳腺癌。癌症转移评论2013;32(1–2):303–15. 10.1007/s10555-012-9415-3。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Brekken RA、Puolakkainen P、Graves DC、Workman G、Lubkin SR、Sage EH。SPARC阴性小鼠肿瘤生长增强与ECM变化相关。临床投资杂志。2003;111(4):487–95. 10.1172/JCI16804-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Boyd NF、Martin LJ、Yaffe MJ、Minkin S.乳房X光密度与乳腺癌风险:当前认识和未来展望。2011年乳腺癌研究;13(6):223 10.1186/bcr2942-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Zhang Y,Nojima S,Nakayama H,Jin Y,Enza H。正常基质成分的特征及其与前列腺癌发生的相关性。Oncol报告,2003年;10(1):207–11. .-公共医学

出版物类型

MeSH术语

赠款和资金

这项工作得到了德国联邦和州政府卓越倡议(Grant EXC 294;生物信号研究中心,BIOSS)和第五届INTERREG上莱茵河项目(项目:纳米@矩阵). 资助者在研究设计、数据收集和分析、决定出版或编写手稿方面没有任何作用。