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.2015年7月20日；128(14):1942-7.
doi:10.4103/0366-69999.160560。

CD117端粒酶活性的比较分析+CD34型+含有骨髓间充质干细胞、心肌成纤维细胞和心肌细胞的心肌细胞

李元元, 山山路, 徐婷（Ting Xu）, 张洪琪, 华立 1
附属公司

CD117端粒酶活性的比较分析+CD34型+含有骨髓间充质干细胞、心肌成纤维细胞和心肌细胞的心肌细胞

李元元等。 Chin Med J（英语）. .

摘要

背景：本研究在体内和体外对心脏末端细胞（TC）群体进行了表征，并研究了其与有丝分裂相关的端粒酶活性。

方法：利用透射电镜和相差显微镜观察了心脏TCs的典型形态特征；通过靶向细胞表面蛋白CD117和CD34，通过流式细胞术对CD117+CD34+心脏TC进行分类，并在原代细胞培养的基础上通过免疫荧光验证。然后使用细胞计数试剂盒8对选定群体的优化基础营养培养基进行检测。在该条件培养基下，捕获细胞分裂过程，并检测CD117+CD34+心肌细胞与骨髓间充质干细胞（BMSCs）、心肌成纤维细胞（CFBs）和心肌细胞（CMs）的端粒酶活性。

结果：心脏TC投射出具有特征性的末端足，细节段（足节）与扩张（足）交替出现。此外，64%的原代培养心肌细胞由CD117+CD34+心肌细胞组成；免疫荧光证实。在活细胞成像系统中，观察到CD117+CD34+心脏TC在短时间内进入细胞分裂，随后在细胞体中部形成明显的内陷。采用实时定量端粒重复扩增试验，CD117+CD34+心脏TC中的端粒酶浓度明显低于BMSC和CFB，显著高于CM。

结论：心脏TC代表一个独特的细胞群体，CD117+CD34+心脏TC具有相对较低的端粒酶活性，这与BMSC、CFB和CM不同，因此它们可能在维持心脏稳态方面发挥重要作用。

PubMed免责声明

利益冲突声明

利益冲突：未申报。

数字

图1
图1
心脏TCs的形态学就地文化方面。（a） 透射电镜显示，Tps是心脏TC的特征性细胞延长，是特殊的长形，主要是窄形（通常约100 nm）和念珠状形式，可容纳足细胞中的线粒体、内质网和小泡（通常<1μm宽）。在合并的二维图像中，观察到Tps不连续，表明其在心脏组织中的三维分布；（b） 在相差显微镜下，心脏TC表现为长而薄的Tps，具有典型的念珠状足和足粒。TC：端粒细胞；Tp：Telopode；CM：心肌细胞；FB：成纤维细胞；棒材：20μm。
图2
图2
CD117的流式细胞术分析和免疫荧光+CD34型+心脏TCs。（a） 荧光活化细胞分选显示，64%培养的心脏TC同时具有CD34+和CD117+; （b） 激光扫描共聚焦显微镜证实，分选的培养细胞共同表达心脏TC、CD34和CD117的标记物。TC：端粒细胞；Tp：Telopode；棒材：20μm。
图3
图3
CD117培养基的优化+CD34型+心脏TCs。评估了四种培养条件对CD117增殖能力的影响+CD34型+心脏TCs。在培养的第1、2和4小时测量细胞数量。结果表明，含10%FBS的高糖DMEM对刺激增殖最有效(P（P）< 0.05). TC：端粒细胞；DMEM：Dulbecco的改良鹰式介质；FBS：胎牛血清。
图4
图4
CD117的细胞分裂+CD34型+活细胞成像系统监测心脏TCs。（a） 培养12小时，粘附CD117+CD34型+心脏TC开始分裂。（b） 培养48小时，CD117+CD34型+心脏TC进入细胞分裂，细胞体中部形成内陷。（c） 培养56小时，CD117+CD34型+当子细胞向相反方向迁移时，心脏TC表达特征形态Tps。TC：端粒细胞；Tp：Telopode。
图5
图5
CD117端粒酶表达活性的比较+CD34型+心脏TC和FB、CM。CD117中端粒酶的活性+CD34型+采用实时定量端粒重复扩增法检测心脏TCs。分析中包括BMSC、CFB和CM作为参考。CD117中的端粒酶浓度+CD34型+心脏TCs分别比BMSCs和CFBs低2.5倍和1.5倍(P（P）< 0.05); 并且显著高于CMs(P（P）< 0.05). CTCs：心肌细胞，BMSCs：骨髓间充质干细胞，CFBs：心肌成纤维细胞，CMs：心肌细胞。
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