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.2015年5月；3（5）：e12389。
doi:10.14814/phy2.12389。

限日喂养对大鼠肝脏代谢和5-羟色胺血液转运日变化的影响

马伦·巴尔德斯·富恩特斯 1, 加布里埃拉·维拉·里维拉 2, 达利亚·德伊塔·佩雷斯 三, 伊莎贝尔·门德斯 三, 玛丽亚·伊莎贝尔·米兰达 2, 毛里西奥·迪亚斯·穆尼奥斯 4
附属公司

限日喂养对大鼠肝脏代谢和5-羟色胺血液转运日变化的影响

马伦·巴尔德斯·富恩特斯等。 生理学代表. 2015年5月.

摘要

生物胺血清素是胃肠道、血小板和神经组织中的一种信号分子。在神经系统中，血清素及其代谢物受昼夜节律计时系统的控制，但尚不清楚肝脏中是否存在血清素的每日变化。为了探索这种可能性，我们测试了血清素代谢的节律模式是否受到日间限制喂养（DRF）的调节，DRF是与食物夹带振荡器（FEO）表达相关的协议。DRF涉及3周内每天2小时的食物获取。对照组包括随意进食（AL）以及急性禁食和再喂养。用高压液相色谱法测定血清素相关代谢物，用western blot、qPCR和免疫组织化学方法评估合成代谢酶和分解代谢酶，以生成24h图谱。结果显示，AL组的肝脏5-羟色胺、色氨酸羟化酶-1活性、血浆和血清中的蛋白质丰度以及5-羟色胺是有节律和协调的。DRF协议破坏了这种协调反应，并削弱了这些参数的节律性。我们展示了血清素的日常合成和降解以及在血液中的转运。这种节律可能影响外周器官中血清素的生理作用。DRF导致肝脏和血液5-羟色胺节律反应不协调。这种修饰可能是FEO生理学的一部分。

关键词：血液；白天限食；食物夹带振荡器；色氨酸；色氨酸羟化酶1。

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数字

图1
图1
用HPLC测定大鼠肝脏中L-Trp（A）、5-HTP（B）和5-HT（C）的日变化分析。每个点代表平均值±SEM。DRF小组获得食物的机会以黑条表示（1200–1400小时）。美国铝业公司(●), DRF公司(○), Fa公司(▲), Fa-Re公司(■), 介观铝(─) DRF（−∙∙），（a）单向方差分析，事后Bonferroni检验*P（P） < 0.05, **P（P）<0.01***P（P）<0.001，双向方差分析，事后Bonferroni检验。（b） 学生的t吨-测试P（P） < 0.05.n个 = 4. 5-HTP，5-羟基色氨酸；5-羟色胺；高效液相色谱法、高压液相色谱法；DRF，白天限制喂养；方差分析，方差分析。
图2
图2
右侧TPH mRNA表达量表中Fa值、酶活性（B）蛋白（C和D）和免疫组织化学（E和F）的每日变化。每个点代表平均值±SEM。DRF小组获得食物的机会以黑条表示（1200–1400小时）。美国铝业公司(●), 刚果民主共和国(○), Fa公司(▲), Fa-Re公司(■), 介观铝(─) DRF（−∙∙），（a）单向方差分析，事后Bonferroni检验和Kruskall–Wallis检验*P（P） < 0.05, **P（P）<0.01***P（P）<0.001，双样本Kolgomorov–Smirnov检验。（b） 曼·惠特尼P（P） < 0.05.n个 = 4. 在E和F中，右下角的框显示负控制。色氨酸羟化酶；DRF，白天限制喂养；方差分析，方差分析。
图3
图3
大鼠肝脏中的MAO-A。（A） 线粒体中MAO-A mRNA表达水平和（B）蛋白（C）Blot代表不同条件下MAO-A蛋白丰度的代表性样本。每个点代表平均值±SEM。DRF组获得食物的机会由黑条（1200–1400小时）AL表示(●), 刚果民主共和国(○), Fa公司(▲), Fa-Re公司(■), 介观铝(─) DRF（−∙∙），（a）Kruskall–Wallis检验*P（P） < 0.05, **P（P）<0.01***P（P）<0.001，Kolgomorov–Smirnov双样本测试。（b） 曼·惠特尼P（P） < 0.05.n个=4。单胺氧化酶；DRF，白天限制进食。
图4
图4
血液中5-HT的浓度。血浆（A）、血清（B）和血小板数量（C）。每个点代表平均值±SEM。DRF小组获得食物的途径由黑条（1200–1400小时）AL表示(●), 刚果民主共和国(○), Fa公司(▲), Fa-Re公司(■), 介观铝(─) DRF（−∙∙），（a）单向方差分析，事后Bonferroni检验*P（P） < 0.05, **P（P）<0.01***P（P）<0.001，双向方差分析，事后Bonferroni检验。（b） 学生的t吨-测试P（P） < 0.05.n个 = 4. 5-羟色胺；DRF，白天限制喂养；方差分析，方差分析。
图5
图5
血清素代谢和转运参数。（A） AL和（B）DRF组。每个点代表每个分析参数在第一个时间点的平均值百分比。(●) 肝脏中的5-HT(公式图像)TPH-1的酶活性(公式图像)TPH-1蛋白的相对水平，以及(公式图像)血清中的5-HT和(公式图像)血浆中的5-HT。DRF，白天限制喂养；5-羟色胺；TPH，色氨酸羟化酶。
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