跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https（https）：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2015:2015:307594.
doi:10.1155/2015/307594。 Epub 2015年2月23日。

基于抗氧化活性和分子机制的中国蜂胶（杨树型）和杨树树胶乙醇提取物的比较

张江林 1, 曹雪萍 1, 顺平 1, 王凯（Kai Wang） 1, 金湖石 2, 张翠萍 1, 郑霍庆 1, 胡福良 1
附属公司

基于抗氧化活性和分子机制的中国蜂胶（杨树型）和杨树树胶乙醇提取物的比较

张江林等。 基于Evid的补体Alternat Med. 2015.

摘要

蜂胶的生物活性因植物来源而异，中国蜂胶（杨树型）的显著抗氧化作用已被广泛报道。氧化应激与炎症有关，并导致许多疾病。在本研究中，为了评价蜂胶乙醇提取物（EECP）和杨树胶乙醇提取物的抗氧化能力并阐明其潜在的分子机制，我们采用HPLC分析了它们的成分，并用化学分析方法评估了它们的自由基清除活性和还原能力。此外，我们研究了EECP和EEPG在RAW264.7细胞中清除ROS和表达抗氧化基因（HO-1、TrxR1、GCLM和GCLC）方面的作用。我们进一步研究了MAPK通过特定抑制剂对抗氧化基因表达的影响。用共聚焦显微镜分析了Nrf2的核移位效应。结果表明，EECP具有较高的TPC和FDC值，但TFC值不显著。EECP中11种化合物的含量也高于EEPG。植物化学分析和细胞实验均表明EECP比EEPG具有更强的抗氧化活性。EECP和EEPG通过直接消除活性氧物种并激活Erk-Nrf2-HO1、GCLM和TrxR1信号通路来增强内源性抗氧化防御。

PubMed免责声明

数字

图1
图1
EECP和EEPG中11种化合物的HPLC色谱图。1：咖啡酸；2:第页-香豆酸；3：阿魏酸；4：白藜芦醇；5：槲皮素；6：芹菜素；7：山奈酚；8：白杨素；9：松脂蛋白；10：高良姜素；11：咖啡酸苯乙酯。SD：标准。
图2
图2
EECP和EEPG对RAW264.7细胞活力的影响。用指示浓度的EECP和EEPG处理RAW264.7细胞24小时 h、 CCK-8法测定细胞活力。结果为平均值±标准差(n个= 3).
图3
图3
通过DCHF-DA分析，EECP和EEPG降低RAW264.7细胞内的ROS水平。RAW264.7细胞分别用EECP和EEPG处理0.5 h、 在有或无300的情况下进一步培养 μ月H2O（运行）2用于13 h、 并用DCHF-DA（200 μM） 对于0.5 h.通过流式细胞仪分析测定ROS水平。（a） 流式细胞术分析的代表性结果。（b） 每个条形代表每组的荧光强度值。
图4
图4
EECP和EEPG刺激RAW264.7细胞抗氧化基因的mRNA表达。（（a）–（d））为了检测EECP和EEPG对抗氧化基因mRNA表达的时间过程，用EECP处理细胞（5 μg/mL）或EEPG（15 μg/mL）。（（e）–（h））用指定浓度的EECP和EEPG处理RAW264.7细胞6次 h.通过qRT-PCR测量mRNA的表达，并使用GAPDH对结果进行归一化，这三个独立的实验进行，结果表示为平均值±SD。
图5
图5
EECP和EEPG在RAW264.7细胞的蛋白质水平上激活抗氧化基因的表达。（a）–（d）在有或无EECP和EEPG的情况下培养RAW264.7细胞，以检测HO-1的时间依赖性诱导，γ-GCLM和TrxR1蛋白。（（e）–（g））HO-1的剂量依赖性诱导的激活效应，γ-GCLM和TrxR1蛋白。RAW264.7细胞与指示浓度的EECP和EEPG孵育9 h.用western blot检测所有蛋白的表达β-微管蛋白作为内部对照。（b）–（d）、（f）和（g）的每个值代表抗氧化基因每条带的密度与β-微管蛋白。通过图像J计算值。
图6
图6
EECP和EEPG主要通过p38/P-p38和Erk/P-Erk途径介导抗氧化基因的表达。（a）、（b））分别用指定浓度的EECP和EEPG处理RAW细胞，处理时间如下。然后，用NP40收获细胞并提取细胞质蛋白。western blot检测Akt、磷酸化Akt，JNK、磷酸化JNK，p38，磷酸化p38和磷酸化Erk的表达。（c） 用或不用抑制剂（LY294002，20）预处理RAW细胞 μM；SP600125，20型 μM；SB203580，30型 μM；PD98059，20型 μM） 对于0.5 h.之后，在存在或不存在EECP和EEPG的情况下，按指定浓度培养细胞1 用NP40收集h和细胞质蛋白。western blot检测Akt、磷酸化Akt和JNK、磷酸化JNK和p38、磷酸化p38和磷酸化Erk的表达。（d）–（f））用或不用抑制剂（LY294002，20）预处理RAW264.7细胞 μM；SP600125，20型 μM；SB203580，30型 μM；PD98059，20型 μM） 对于0.5 h、 然后用EECP或EEPG培养或不培养5 h.然后，取下培养基，用新鲜培养基培养RAW264.7细胞，继续培养4个 h.在收获时，收集蛋白质，并使用western blot检测TrxR1、HO-1、GCLM和β-微管蛋白。β-微管蛋白被用作每条泳道的蛋白质负荷控制。
图7
图7
EECP和EEPG对RAW264.7细胞Nrf2核转位的刺激作用。通过激光扫描共聚焦显微镜评估Nrf2的核移位效应。RAW细胞与指定浓度的EECP和EEPG培养4天后 h、 用甲醇-丙酮固定细胞（1 : 1） 解决方案。然后，用抗Nrf2抗体、Alexa Fluor 488-偶联抗兔IgG抗体和DAPI对细胞进行染色。（a） RAW264.7细胞的形态。（b） DAPI与Alexa Fluor 488-偶联抗兔IgG抗体的融合。（c） 将DAPI和Alexa Fluor 488-偶联抗兔IgG抗体的图片与RAW264.7细胞的形态合并，以清晰识别Nrf2的位置。
请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

查看所有类似文章

引用人

查看所有“被引用”文章

工具书类

    1. 安敏荣，熊泽S.，Usui Y.，等。中国各地蜂胶的抗氧化活性及成分。食品化学。2007;101(4):1383–1392. doi:10.1016/j.foodchem.2006.03.045。-内政部-公共医学
    1. Shi H.，Yang H.，Zhang X.，Yu L.蜂胶甲醇提取物的植物化学成分及其抗炎和清除自由基特性的鉴定和定量。农业与食品化学杂志。2012;60(50):12403–12410. doi:10.1021/jf3042775。-内政部-公共医学
    1. Wang K.，Ping S.，Huang S.，等。中国蜂胶（杨树型）富含黄酮的乙醇提取物体外抗炎作用的分子机制。基于证据的补充和替代药物。2013;2013:11. doi:10.1155/2013/127672.127672-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Park S.Y.、Park D.J.、Kim Y.H.等。通过PI3K/Akt和Nrf-2信号通路上调血红素氧化酶-1，介导五味子苷在牙龈卟啉单胞菌LPS刺激的巨噬细胞中的抗炎活性。免疫学快报。2011;139(1-2):93–101. doi:10.1016/j.imlet.2011.05.007。-内政部-公共医学
    1. Iio A.、Ohguchi K.、Maruyama H.等。巴西红蜂胶的乙醇提取物增加ABCA1的表达并促进THP-1巨噬细胞的胆固醇流出。植物医学。2012;19(5):383–388. doi:10.1016/j.phymed2011.10.007。-内政部-公共医学