跳到主页面内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https（https）：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2015年5月1日；290(18):11515-25.
doi:10.1074/jbc。M114.587253。 Epub 2015年3月20日。

前列环素预防溶血磷脂酰胆碱诱导的中枢神经系统周细胞丢失和脱髓鞘

村松理子 1, 黑田麻里子 2, 肯·马托巴 2, 林小云 2, 高桥奇佐 2, 小山义久 2, 山下俊雄 三
附属公司

前列环素预防溶血磷脂酰胆碱诱导的中枢神经系统周细胞丢失和脱髓鞘

村松理子等。 生物化学杂志. .

摘要

周细胞在中枢神经系统的生理和病理生理条件中发挥着关键作用。周细胞可以防止血管渗漏，从而阻止血脑屏障受损引起的神经元损伤。因此，周细胞可能是治疗神经退行性疾病的良好靶点，尽管缺乏证据。在这项研究中，我们发现前列环素通过对成年小鼠脊髓周细胞的保护来减弱溶血磷脂酰胆碱（LPC）介导的血管功能障碍。LPC降低了体外血脑屏障模型中周细胞的数量，这种减少可以通过前列环素类似物伊洛前列素治疗来阻止。鞘内注射伊洛前列素可减轻小鼠脊髓注射LPC后血管屏障的破坏。此外，伊洛前列腺素治疗可减少注射LPC的小鼠的脱髓鞘和运动功能缺陷。这些结果支持前列环素作用于周细胞以维持血管屏障完整性的观点。

关键词：阿克森；血脑屏障；小鼠；多发性硬化；神经突起生长；神经变性；少突胶质细胞；脊髓。

PubMed免责声明

数字

图1。
图1。
LPC降低TEER和周细胞数量在体外BBB模型。 A类,图表显示大鼠TEER的变化在体外在指示的LPC浓度下处理的BBB模型。数值代表平均值±S.E.（控制：n个= 7; 1 μ米:n个= 6;n个= 6; 50 μ米:n个＝6）.*，第页<0.05，使用Scheffe检验；**，第页<0.01，使用Scheffe检验。B类DAPI染色细胞的代表性图像。比例尺，50微米。C–E类,图显示周细胞的数量（DAPI+transwell下侧的电池）。C类、内皮细胞（DAPI+transwell中的单元格）。天、星形胶质细胞（DAPI+培养皿上的细胞）。E中，LPC治疗后24小时。BBB试剂盒中的细胞用50μ米LPC公司。数值代表平均值±S.E(n个=12口井）。**，第页<0.01，使用Scheffe检验。NS公司，不显著。F、，LPC治疗后24小时Tuj1标记神经元的代表性图像。这个图表显示Tuj1-阳性神经元的数量。从原代培养中获得细胞。数值代表三个独立实验的平均值±S.E。比例尺，50微米。G、，LPC治疗24小时后Iba标记小胶质细胞的代表性图像。从原代培养中获得细胞。这个图表显示Iba1阳性细胞的数量。数值代表三个独立实验的平均值±S.E。比例尺，50微米。H、，LPC处理后24小时MBP标记的少突胶质细胞的代表性图像。从原代培养中获得细胞。这个图表显示MBP阳性细胞的数量。数值代表三个独立实验的平均值±S.E。比例尺，50微米**，第页使用Tukey测试<0.01。
图2。
图2。
伊洛普治疗LPC引起的周细胞丢失。 A类，用IP受体抗体染色的培养周细胞的代表性图像。上部面板，PDGFRβ（周细胞标记物，绿色)，IP受体(红色)和DAPI(蓝色);下部面板，CD13（周细胞标记物，绿色)，IP受体(红色)和DAPI(蓝色).比例尺，50微米。B类，用PDGFRβ抗体（周细胞标记物，绿色)和裂解半胱天冬酶-3(红色). 用或不用伊洛前列素（1μ米)持续30分钟，然后将LPC添加到最终浓度为50μ米.左侧面板，低倍图像。右侧面板，高倍率图像。比例尺，200微米。用指定试剂处理24小时后周细胞caspase-3阳性比率的量化。数值代表三个独立实验的平均值±S.E.。**，第页<0.01，使用Scheffe检验。C类,图表显示大鼠TEER的变化在体外在有或无伊洛前列素的情况下，用LPC治疗BBB模型。n个= 4–5.NS、，不重要。天,图表显示了在有或无伊洛前列素的情况下，经LPC处理的大鼠血管内皮细胞（solo-culture）中TEER的变化。根据BBB试剂盒中对照组的TEER值计算TEER值的比率。数值代表四个独立实验的平均值±S.E。E类，经LPC和/或伊洛前列素处理的培养少突胶质细胞的代表性图像。比例尺，50微米。用抗MBP的抗体（少突胶质细胞标记物，绿色)和DAPI(蓝色). 这个图表显示MBP的数量+用指定试剂处理24小时后的细胞。数值代表三个独立实验的平均值±S.E.。**，第页<0.01，使用Scheffe检验。F类，用LPC和/或伊洛前列素处理的培养少突胶质细胞的代表性图像。比例尺，50微米。这个图表显示了用所示试剂治疗24小时后少突胶质细胞中MBP的表达。数值代表三个独立实验的平均值±S.E。
图3。
图3。
伊洛前列素治疗可防止LPC介导的成年脊髓血管屏障破坏。 A类，可视化CNS中的血管泄漏。上部面板，显示Alexa Fluor 555缀合尸体碱渗漏的胸脊髓的代表性图像(红色)LPC注射后1天进入脊髓。注射LPC后立即开始伊洛普治疗。这个虚线表示组织的轮廓。比例尺，1毫米。中间面板，显示Alexa Fluor 555结扎尸体分布的胸椎脊髓代表性图像(红色)注射LPC后1天脊髓内。注射LPC后立即开始伊洛普治疗。对切片进行CD31（血管内皮细胞标记物，绿色).比例尺，100微米。下部面板，显示内源性IgG泄漏的胸椎脊髓横截面代表性图像(绿色)在LPC注射后1天进入脊髓。注射LPC后立即开始伊洛普治疗。用DyLight 594标记对切片进行血管复染焦糖乳杆菌凝集素（血管内皮细胞标记物，红色).比例尺，100微米。B类术后第1天脊髓损伤处Evans Blue漏液的定量。数值代表三个独立实验的平均值±S.E.。**，第页<0.01，使用Scheffe检验。C类和D、，代表性Western blots(C类)和半定量分析(天)显示术后1天脊髓中克劳丁-5、闭塞素和ZO-1的表达。从脊髓的一段（包括损伤部位）制备蛋白质印迹样品。这个图显示相对于α-微管蛋白表达标准化的指示蛋白质的表达水平。数值代表五个独立实验的平均值±S.E.。*，第页<0.05，使用Scheffe检验；**，第页<0.01，使用Scheffe检验。
图4。
图4。
伊洛前列素治疗可预防LPC介导的成年脊髓周细胞损伤。 A类和B类，显示CD13-阳性（周细胞标记物，A类)或PDGFRβ阳性（周细胞标记物，B类)周细胞(绿色)术后1天在LPC病灶处。用DyLight 594标签对部分进行复染焦糖乳杆菌凝集素(红色).方形指示低倍图像中的区域，以指示高倍图像的对应区域。比例尺，低倍率为200μm，高倍率为50μm。C类,图表显示CD13-阳性凝集素标记血管的覆盖范围(A类)或PDGFRβ阳性(B类)周细胞。数值代表平均值±S.E(n个= 4).天,图表显示了脊髓背角每段凝集素标记血管的总长度，如B类值代表平均值±S.E(n个= 4).NS公司，不显著。E类，用CD13抗体染色的胸椎脊髓横截面的代表性图像(绿色)和裂解半胱天冬酶-3(红色).比例尺，100微米。F类,图表显示caspase-3阳性周细胞与总周细胞的比率。数值表示平均值±S.E(n个= 4). **,第页与对照组相比<0.01；##，第页与使用Scheffe检验的LPC相比，<0.01。
图5。
图5。
伊洛前列素治疗可预防LPC介导的脱髓鞘和运动功能障碍的进展。 A类术后1天，用Kluver-Barrera染色（髓磷脂染色）对代表性胸椎脊髓横截面进行染色。比例尺，500μm左侧面板和200μm右侧面板。B类,图表显示脊髓背角的脱髓鞘区域。脱髓鞘面积通过减去蓝色脊髓背角总面积。数值代表平均值±S.E.（控制：n个= 3; 液化石油气：n个= 4; LPC+伊洛普：n个= 4). **,第页与对照组相比<0.01；##，第页与使用Scheffe检验的LPC相比，<0.01。C类和D、 图形显示行为运动记录的分数(C类)和Basso鼠标刻度分数(天)在用或不用伊洛前列素治疗的小鼠脊髓内注射LPC。数值表示平均值±S.E.（对照：n个= 6; 液化石油气：n个= 7; LPC+伊洛前列素：n个= 7). **,第页< 0.01; *,第页与使用Scheffe检验的LPC相比，<0.05。E类和F、 图形显示巨噬细胞吞噬活性的比率(E类)和小胶质细胞(F类)用LPC和/或伊洛前列素治疗。数值代表三个独立实验的平均值±S.E。
请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

查看所有类似文章

引用人

查看所有“被引用”文章

工具书类

    1. Obermeier B.、Daneman R.、Ransohoff R.M.（2013）血脑屏障的开发、维护和破坏。《国家医学》第19卷，1584–1596页-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Fortin D.（2012）血脑屏障：在脑肿瘤转移治疗中的影响。货币。癌症药物靶点12，247–259-公共医学
    1. Rosenberg G.A.（2012）与血脑屏障相关的神经疾病。J.大脑。血流代谢。32, 1139–1151-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Shlosberg D.，Benifla M.，Kaufer D.，Friedman A.（2010）血脑屏障破坏作为创伤性脑损伤的治疗靶点。Nat.Rev.Neurol公司。6, 393–403-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Winkler E.A.、Bell R.D.、Zlokovic B.V.（2011）《健康与疾病中的中枢神经系统周细胞》。自然神经科学。14, 1398–1405-项目管理咨询公司-公共医学

出版物类型

MeSH术语