Stroke increases neural stem cells and angiogenesis in the neurogenic niche of the adult mouse

doi:10.1371/journal.pone.0113972

.2014年12月1日；9（12）：e113972。

doi:10.1371/journal.pone.0113972。 2014年电子收集。

中风增加成年小鼠神经源性生态位中的神经干细胞和血管生成

张瑞兰¹, 迈克尔·肖普², 辛西娅罗伯茨¹, 刘贤双¹, 闵伟（音）¹, Siamak P内贾德·达瓦拉尼¹, 王新丽（Xinli Wang）¹, 张正刚¹

附属公司

¹美国密歇根州底特律亨利·福特医院神经科。
²美国密歇根州底特律亨利·福特医院神经科；美国密歇根州罗切斯特奥克兰大学物理系。

PMID： 25437857
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内政部： 10.1371/日记.pone.0113972

中风增加成年小鼠神经源性小生境中的神经干细胞和血管生成

张瑞兰等。公共科学图书馆一号. 2014.

.2014年12月1日；9（12）：e113972。

doi:10.1371/journal.pone.0113972。 2014年电子收集。

作者

张瑞兰¹, 迈克尔·肖普², 辛西娅罗伯茨¹, 刘贤双¹, 闵伟（音）¹, Siamak P内贾德·达瓦拉尼¹, 王新丽（Xinli Wang）¹, 张正刚¹

附属公司

¹美国密歇根州底特律亨利·福特医院神经科。
²美国密歇根州底特律亨利·福特医院神经科；美国密歇根州罗切斯特奥克兰大学物理系。

PMID： 25437857
预防性维修识别码：项目经理4250076
内政部： 10.1371/journal.pone.0113972

摘要

成人脑室-脑室下区（V/SVZ）神经原生态位独特的细胞和血管结构在调节神经干细胞功能中起着重要作用。然而，神经干细胞的体内鉴定及其与该生态位内血管的关系在很大程度上尚不清楚。我们使用侧脑室壁的整体制备，在局灶性脑缺血发作后3个月的过程中，检测了成年小鼠V/SVZ中神经干细胞和血管的结构。中风显著增加了胶质纤维酸性蛋白（GFAP）阳性神经干细胞的数量，这些神经干细胞通过位于侧脑室室管膜细胞形成的风车结构中心的顶端突起与脑脊液（CSF）接触。这些细胞的长基部突起延伸到室管膜下的血管。此外，卒中后7天和14天，非缺血小鼠的V/SVZ内皮细胞增殖分别从2%增加到12%和15%。V/SVZ中的血管体积从卒中前占总体积的3%增加到卒中后90天的6%。中风增加的血管生成与神经母细胞密切相关，这些神经母细胞几乎覆盖了V/SVZ的整个侧脑室壁。这些数据表明，中风会导致成年V/SVZ神经源性生态位的神经干细胞和血管结构的长期改变。中风后的这些结构变化可能通过神经干细胞与脑脊液中蛋白质的相互作用及其室管膜下神经血管的相互作用，为神经干细胞介导中风诱导的神经发生提供了新的见解。

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利益冲突声明

竞争利益：提交人声明，不存在相互竞争的利益。

数字

**图1。GFAP公司⁺心室表面的突起。**
从具有代表性的非缺血（A，B）和缺血（C，D）整体支架的顶部表面采集的双重和三重免疫荧光图像显示乙酰化微管蛋白⁺纤毛与γ-微管蛋白⁺基底体（A、C）和含有单个γ-微管蛋白的细胞⁺基底体⁺β-catenin中心的过程⁺鹅卵石室管膜细胞（B，D）。定量数据（E、F）显示GFAP阳性细胞的数量⁺顶端表面的突起*p<0.05，无===========================================================6只小鼠/组。酒吧===========================================================10微米。

**图2。溴化铀⁺核位于针轮结构的中心。**
从代表性非缺血性（A，D）和缺血性（B，E）整体坐骑的顶面下方采集的双重和三重免疫荧光图像显示BrdU⁺核（A、B）和PH3⁺单γ-微管蛋白核⁺β-catenin中心的基底体（D，E）⁺室管膜细胞。定量数据（C）显示含BrdU的细胞数量⁺和PH3⁺原子核*p<0.05，无===========================================================6只小鼠/组。酒吧===========================================================10微米。

**图3。V/SVZ的脑微血管。**
IV型胶原的原始复合物（A）和相应的三维（B）图像⁺来自具有代表性的非缺血全峰（non-）和缺血全峰7、14、30和90天的脑血管。图B中的红色和绿色分别表示小于7.5µm和大于7.5µm的血管直径。图C显示了血管体积的定量数据。数据由三维血管量化程序生成。所有图像中的数字单位都是微米。典型的双免疫荧光图像（D，E）显示CD31⁺细胞（红色）为BrdU⁺（绿色、箭头和箭头），并且正交视图（E）显示了面板D中显示的CD31+/BrdU+单元的共同定位（箭头）。面板F显示CD31的定量数据⁺/溴化铀⁺细胞。典型的三维图像（G，H）显示IV型胶原的视图⁺未用FITC-右旋糖酐（绿色）从0（G）和46（H）度角灌注的弦状血管（红色，箭头）。第一组显示了MCAO 90天内尾撑船的定量数据*与非缺血组相比p<0.05，n===========================================================6只小鼠/组。

**图4。V/SVZ中的微血管结构和成神经细胞。**
从具有代表性的非缺血性（A）和缺血性（B）整体支架上获得的双重免疫荧光图像（从心室表面观察）显示IV型胶原网络⁺血管（红色）和GFP的分布⁺成神经细胞（绿色）。Z轴（C，D）总厚度为50µm的投影图像显示GFP⁺非缺血全山的成神经细胞局限于SVZ（C，绿色），而GFP⁺缺血区的成神经细胞从SVZ（D，绿色）向下分布到纹状体（D，绿）。SVZ处X–Y轴的厚度为1µm的单一合成图像，以及心室表面下方纹状体对应的Z堆栈（C，D）显示IV型胶原⁺血管和GFP⁺成神经细胞。

**图5。GFAP公司⁺/溴化铀⁺V/SVZ中的细胞和血管。**
三重免疫荧光图像（A）的代表性正交视图显示BrdU⁺（绿色）和GFAP⁺长突起细胞（红色）与IV型胶原接触⁺血管（蓝色）。图B显示BrdU的定量数据⁺/GFAP公司⁺细胞。来自代表性非缺血性（C）和缺血性（D）整体支架的双重免疫荧光图像显示GFAP⁺长过程接触IV型胶原⁺血管。

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