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.2014年10月;66(10):711-22.
doi:10.1002/iub.1321。 Epub 2014年11月7日。

2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷通过上调超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶保护人脐静脉内皮细胞对抗溶血磷脂酰胆碱诱导的凋亡

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2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷通过上调超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶保护人脐静脉内皮细胞对抗溶血磷脂酰胆碱诱导的凋亡

赵静(音译)等。 IUBMB寿命. 2014年10月.
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摘要

2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-d-葡萄糖苷(TSG)已被证明可以保护人脐静脉内皮细胞(HUVECs)免受溶血磷脂(LPC)诱导的损伤;然而,潜在的分子机制仍有待确定。本研究旨在探讨TSG对LPC诱导的HUVEC损伤的保护机制。我们用不同浓度的LPC处理HUVEC,建立了稳定的LPC诱导细胞模型,发现10.0µg/mL的LPC最适合诱导HUVECs损伤。通过细胞计数试剂盒-8、凋亡测定、透射电镜、丙二醛(MDA)、抗氧化酶超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧(ROS)、谷胱甘肽过氧化物酶和线粒体膜电位的测定,评估TSG对LPC诱导的细胞损伤的影响。用实时逆转录聚合酶链反应和免疫印迹法分别测定caspase-3、Bax、Bcl-2、PARP-1和细胞色素C的mRNA和蛋白水平。TSG预处理能够防止LPC诱导的HUVEC损伤,并以浓度依赖的方式恢复细胞活力。LPC处理的细胞表现出典型的凋亡形态学变化,包括细胞质空泡化、线粒体肿胀,以及典型的凋亡生化特征,包括线粒体膜电位丧失、caspase-3活化、Bcl-2降低、PARP-1升高、Bax上调和细胞色素C释放,TSG预处理明显抑制了所有这些。LPC处理HUVECs导致SOD和谷胱甘肽过氧化物酶降低,MDA和ROS水平迅速升高。TSG预处理使SOD和谷胱甘肽过氧化物酶水平恢复到正常水平,并显著降低ROS和MDA水平。我们的数据表明,TSG通过阻断线粒体凋亡途径抑制LPC介导的HUVEC的凋亡,并提示TSG保护作用的机制与激活SOD和谷胱甘肽过氧化物酶、清除细胞内ROS和减少脂质过氧化有关。

关键词:2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-d-葡萄糖苷;细胞凋亡;内皮损伤;谷胱甘肽过氧化物酶;人脐静脉内皮细胞;溶血磷脂酰胆碱;线粒体膜电位;活性氧;超氧化物歧化酶。

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